ELISA測定HIV抗體對艾滋病的診斷價值分析

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【摘要】目的探討酶聯免疫吸附試驗（elisa）測定人類免疫缺陷病毒（hiv）抗體對艾滋病（AIDS）的診斷價值。方法選擇2019年1月—12月于深圳市龍崗區第三人民醫院治療的AIDS高危人群或疑似HIV感染患者1820例，采集清晨空腹靜脈血，采用ELISA、膠體金法檢查HIV抗體，并以蛋白印跡診斷HIV抗體結果作為金標準，計算膠體金法、ELISA的敏感度、特異度及準確率、陰性預測值、陽性預測值，以及與蛋白印跡診斷結果的一致性。結果1820例AIDS高危人群或疑似HIV感染患者經蛋白印跡證實陽性、陰性各有21例、1799例；膠體金法診斷HIV抗體陽性、陰性各有372例、1448例，其中漏診7例，誤診358例；ELISA診斷HIV抗體陽性、陰性各有56例、1764例，其中漏診1例，誤診36例。以蛋白印跡診斷結果作為金標準，ELISA診斷HIV抗體敏感度（95.24%）、特異度（98.00%）及準確率（97.97%）、陰性預測值（99.94%）、陽性預測值（35.71%）均高于膠體金法（66.67%，80.10%，79.95%，99.52%，3.76%），有統計學差異（P<0.05）；膠體金法診斷HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性差（Kappa=0.051，P=0.000）；ELISA診斷HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性較為理想（Kappa=0.511，P<0.001）。結論ELISA用于HIV抗體篩查中敏感度、特異度及準確率、陰性預測值、陽性預測值均較高，且與蛋白印跡診斷結果的一致性較佳，能夠提高AIDS檢出率，可作為篩查HIV抗體較為準確的方法于臨床推廣。

【關鍵詞】艾滋病;人類免疫缺陷病毒;酶聯免疫吸附試驗;膠體金法;蛋白印跡;診斷效能;一致性

艾滋病（AIDS）作為一種免疫性疾病，具有較強的傳播性，多由于人類免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）經血液途徑、性接觸途徑及母嬰途徑等感染所致，若未能及時診斷并治療會破壞人體免疫系統，造成患者反復感染，威脅生命安全。隨著我國AIDS從局部暴發到廣泛流行，其防治策略也逐漸從道德宣傳和出入境防范轉變為主動對公眾進行AIDS知識的宣傳教育，各級地方政府、人民醫院、學校都參與到AIDS防治的宣傳教育中。加強HIV抗體檢測，有利于及時發現HIV病毒并對其傳播進行阻斷[1，2]。酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）、膠體金法為篩查HIV抗體的重要方法，但目前何種方法檢測結果更為準確尚無確切結論[3，4]。本研究探討ELISA測定HIV抗體對AIDS的診斷價值，并與膠體金法診斷HIV抗體結果進行比較，從而實現AIDS早發現、早診斷、早治療，現報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2019年1月—12月于深圳市龍崗區第三人民醫院治療的AIDS高危人群或疑似HIV感染患者1820例。其中男943例、女877例；年齡28~59歲，平均年齡（42.19±3.26）歲；體質量指數（bodymassindex，BMI）18.2~29.7kg/m2，平均（23.49±1.56）kg/m2；受教育程度：小學及以下、初中、高中、高中以上各有459例、318例、586例、457例；婚姻狀況：未婚、再婚、離異/喪偶各有906例、893例、21例；職業：無工作、有工作各有146例、1674例；性取向：男男性行為、異性性行為各有820例、1000例。

1.2入選標準

納入標準：①依從性較高，能夠積極配合臨床診治，未患有精神疾病，理解及認知功能正常；②患者均進行ELISA、膠體金法檢查HIV抗體。排除標準：①存在嚴重機體感染；②合并惡性腫瘤；③肝、腎功能不全；④已確診為HIV感染者或者確診為AIDS患者。

1.3方法

1.3.1儀器及試劑全自動酶免儀（AE115）由深圳市愛康生物科技有限公司提供，儀器性能良好，均經過校準；ELISA試劑、膠體金試劑分別由珠海麗珠試劑有限公司、廣州萬孚生物技術股份有限公司提供，所有試劑均在有效期范圍內使用。1.3.2檢測方法采集患者清晨空腹靜脈血6mL，3000轉/min離心10min，離心后取上清液，采用膠體金法、ELISA測定檢測HIV抗體。膠體金法檢測時取待測樣本50μL分別加于試紙板條加樣區，將1滴稀釋液加在加樣區上方，于30min內觀察并記錄結果。ELISA采用常規操作進行檢測，嚴格依據試劑盒說明書完成各項操作過程，初篩陽性標本進行雙孔復試。

1.4評價指標

①記錄膠體金法、ELISA診斷HIV抗體結果。②以蛋白印跡診斷HIV抗體結果作為金標準，計算膠體金法、ELISA診斷HIV抗體敏感度、特異度、準確率、陰性預測值、陽性預測值。③計算膠體金法、ELISA診斷HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性。

1.5統計學方法

采用SPSS22.0統計學軟件分析數據，計數資料以%表示，采用χ2檢驗，一致性采用Kappa檢驗（Kappa>0.75表明一致性極好，0.4~0.75表明一致性較為理想，<0.4表明一致性差），P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1蛋白印跡診斷結果

1820例患者經蛋白印跡證實陽性、陰性各有21例、1799例。

2.2膠體金法、ELISA診斷

HIV抗體結果膠體金法診斷HIV抗體陽性、陰性各有372例、1448例，其中漏診7例，誤診358例；ELISA診斷HIV抗體陽性、陰性各有56例、1764例，其中漏診1例，誤診36例；以蛋白印跡診斷結果作為金標準，ELISA診斷HIV抗體敏感度、特異度、準確率、陰性預測值、陽性預測值高于膠體金法，有統計學差異（P<0.05）。見表1、表2。

2.3膠體金法、ELISA診斷

HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性分析膠體金法診斷HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性差（Kappa=0.051，P=0.000）；ELISA診斷HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性較為理想（Kappa=0.511，P<0.001）。

3討論

據統計，2018年新增HIV感染者中多數來自于男男性行為人群、吸毒者、性工作者等高危人群以及他們的伴侶。全球新增HIV感染者人數從1997年的290萬下降至2018年的170萬，但仍然低于2020年的目標50萬，控制HIV新增、減少HIV傳播仍面臨很大的挑戰。AIDS作為一種傳染性疾病，會對人體免疫系統進行攻擊，降低患者免疫功能，導致多種感染，增加惡性腫瘤發生風險[5]。1981年美國診斷出首例AIDS患者，近年來AIDS病毒感染率較高，目前我國AIDS患者及HIV感染患者約占總人口的0.06%。目前臨床仍缺乏較為有效的抗HIV藥物及預防疫苗，而這也是導致AIDS患者死亡率較高的重要原因。目前在毒品交易泛濫及人口流動性強、性解放的社會環境中，HIV感染者已從高危人群不斷向一般人群擴散，傳播速度較快[6]。AIDS具有較強的潛伏期，發病早期患者無典型癥狀，極易被忽視，進而通過多種不同途徑傳播給他人。因此對公眾進行警示性教育，將艾滋病疫情情況進行公布，對患者的HIV抗體進行早期檢測以明確診斷，有利于控制傳染源，將傳播途徑切斷，進而達到良好的防治效果[7，8]。HIV病毒感染人體后，約10d左右血漿中便可檢測到HIV核酸，約2~3周后血漿中可出現p24抗原，并可產生ＩgM抗體，隨后ＩgG抗體貫穿HIV感染的后續階段。故在HIV感染人體后，HIV核酸為體內首先出現的生物標記物，其次為p24抗原，最后為抗體。為有效控制AIDS流行傳播，制訂適宜的HIV抗體實驗室檢測策略，對AIDS的疫情監測、診斷和治療有重要意義。選取高精度、高質量的試劑與檢測方法是檢測高危HIV感染人群最為重要的步驟，以獲得更為準確的檢測結果。膠體金法檢測HIV抗體時，保存及攜帶方便，具有檢測速度快及操作簡便等優點，但其診斷特異性及敏感度并不高[9]。ELISA測定HIV抗體簡便易行，是將HIV抗原或抗體包被在固相載體上，加入酶標記的特異性二抗，根據酶作用底物后的顯色顏色對試驗結果進行判斷，屬于一種半定量的檢測技術[10]。其能夠對HIV抗體直接檢測，也能對血液標本、組織標本中微量HIV抗體進行檢測，且不會受類風濕因子干擾，診斷敏感度及特異度較高[11]。但由于HIV抗原及其他反轉錄病毒間會發生交叉反應，故采用ELISA測定HIV抗體也會存在假陽性現象，增加與受檢者之間的糾紛[12]。本研究探討了ELISA測定HIV抗體對AIDS的診斷價值，并與膠體金法診斷HIV抗體結果進行比較。結果顯示，1820例AIDS高危人群或疑似HIV感染患者經蛋白印跡證實陽性、陰性各有21例、1799例；以蛋白印跡診斷結果作為金標準，ELISA診斷HIV抗體敏感度、特異度及準確率、陰性預測值、陽性預測值高于膠體金法（P<0.05）；膠體金法診斷HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性差（Kappa=0.051，P=0.000）；ELISA診斷HIV抗體結果與蛋白印跡診斷結果的一致性較為理想（Kappa=0.511，P<0.001）。提示與膠體金法相比，ELISA測定HIV抗體敏感度、特異度、陰性預測值、陽性預測值較高，與蛋白印跡診斷結果的一致性較為理想，能夠準確篩查HIV抗體，降低誤診及漏診率，最大限度發現HIV感染患者，有利于為AIDS的早期診斷及治療提供參考。雖然本次研究中ELISA用于篩查HIV抗體中的準確率、敏感度及特異度均高于膠體金法，檢查結果準確、便捷且快速，可作為篩查HIV抗體一種成本效益最優的檢測方法；但ELISA測定中也存在假陽性及假陰性現象，會導致漏診、誤診的發生，故臨床上應該加強對HIV相關檢查方法的研究，以期為AIDS的診斷、預防及治療提供確切指導，使AIDS的檢測策略更加完善。綜上所述，ELISA診斷HIV抗體效能優于膠體金法，且與蛋白印跡診斷結果的一致性較為理想，有利于提高AIDS的檢出率，為其防治提供依據。

作者：何奕斌 單位：深圳市龍崗區第三人民醫院