打工感想范文

時間:2023-04-10 04:51:23

導語:如何才能寫好一篇打工感想,這就需要搜集整理更多的資料和文獻,歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文,供你借鑒。

打工感想

篇1

一.工作是辛苦的

常聽工作了的人說,工作是辛苦的,學生時代是美好的。可是,在我們想象之中,可以略微的感覺到工作的艱辛,但怎么也體會不出學生的輕松:繁重的學習任務,各種各樣的考試,還有一級級的升學考試……。通過這次暑假打工,我終于體會到了工作的艱辛。

由于我們工作的是來店顧客調查,所以我們的工作時間就會很長,總體來說每天工作時間在早上9點到晚上8點半,吃飯時間累計一小時,中午休息一個小時,工作時間大概有9個多小時。最主要的是我們的工作持續很久,從早上8點多到晚上8點多,全天處在空調房內不間斷的講話。況且在商場內,人聲嘈雜,我們必須很大聲的講話,這使得我們口干了,嗓子啞了,到了第四天我們都感到了嗓子難受。以前在大熱天總希望整天在空調內呆著,但我們發現,長時間處在空調環境里,一出到外面就感到很舒服,這時我們真正體會到什么叫做爽。

工作是辛苦的。且不說持續時間的“漫長”、工作時的不自由,但說工作的壓力已經使我們喘不過氣來了。工作的壓力來自工作的難度和工作量。雖然我們有小禮品贈送,但在有的時段要約還是比較難的,有的時候要連續的被拒絕好幾次的。早上7點多,我們就必須起床,然后匆忙的吃早餐,再趕往家樂福,然后開始緊張的工作。除了中午休息的一個小時和吃飯外,我們從早上八點多到商場里一工作就到天黑后的八點多。由于整天在商場里忙著工作,終日不見陽光,所以當我們出來吃午飯時都會覺得猛烈的陽光很親切。

工作的壓力和艱辛使我越來越感到全身又酸又累,到了第七天中午時我真的不想做下去了,盡管工作已經接近結束。

二.學會微笑

你能否對一個陌生人微笑并主動上前打招呼?在以前我是不會這樣做的,但在暑假的打工時我學會了這點。“我們這類從事服務業的,賣的就是我們真誠的微笑。”還是帥哥督導能了解我,他說“真委屈你這個千金來從事這樣的服務行業了,你并不適合做這個^_^”,但他卻相信我一定不會中途放棄,他甚至堅信我會做的最好。他認為我的性格決定了我會做的最好:做就做到最好和永不伏輸的性格。也許是他的激勵,更可能是我的本性就不服輸吧,我確實做的比其他人更好。雖苦雖累,但我們面對客戶時還是要扮出笑臉來,否則將要約不到任何人。微笑對我們這種工作很重要,因為我們是直接面對客戶的。很多時候,特別是到了晚上,我們已經很困很累了,但是我們還要強打笑臉去要約,然后裝做很輕松很友好的跟客戶大聲談話。剛跟客戶講完話之后我就笑不起來了,因為太累了,嘴都磨破了,臉皮也僵了……

用強打笑臉來形容再恰當不過了,對一個陌生人,面無表情的人,甚至覺得很惡心的人都得微笑的上前要約。我們沒有太多的選擇,只能違心的去陪著笑臉。不過,學會對陌生人笑,并試圖說服他參加你的工作對我們以后的工作很重要。所以暑假的打工經歷讓我學會這點是很好的,畢竟它對我們以后的工作很有利。

三.勇氣和技巧

要約是一項需要勇氣和技巧的工作。

成功要約的每一個對象都本來是陌生人,但不是每個陌生人都可以成功要約。成功要約要具備幾個條件:1.選對對象2.找出與客戶的共同點3.靈活使用語言。

要約過程中,勇氣是特別重要的。很多時候,我們必須遭遇幾個拒絕才能要約成功。所以,往往我們在連續遭遇了幾個冷面孔之后真的再沒有勇氣再出擊了。面對著形形的顧客,他們有的步履匆匆的走出,有的悠哉游哉的逛著,有的面無表情讓人生畏,有的和藹可親平易近人……我們應該向那些人要約呢?很多時候我們不能太偏向于同一類人的,因為局限于一類人的話我們將很難要約到很多人。所以,我們必須具備很大的勇氣和屢敗屢試的精神。況且很多時候,我們發現很多看上去很不可接近的人溝通起來卻很舒服很順暢。所以,面對很嚴肅的或者面無表情的客戶,很多時候我們必須鼓起勇氣強打笑臉上前要約——雖然我們經常的遭到拒絕。其實,在這個過程中我們“幼小的心靈被打擊得鮮血淋漓”,所以每個成熟的心靈背后都有一段辛酸的往事。

大膽面對各種各樣的人,并努力跟對方溝通,從而獲取有益的信息,這就是我們的工作。其實,跟陌生人溝通有的時候很難,有的時候也很容易。“溝通從心開始”,盡管會受到很多冷遇,但只要我們真心的相對,報以真誠的微笑,大部分人是不會太拒絕我們的。

其實,很多時候是我們自己打敗了自己。在沒有嘗試之前我們就根據歷史經驗給對方來了個判定,認定了他是不可接近的。一定程度上,這是畏難而退的表現。只有你敢去嘗試,你會發現,以前認為很多不可接近的人原來是如此的通情達理和善解人意,他們是很容易溝通的。或者我認為,那些看起來不易于溝通的人更渴望溝通和理解吧,或者“孤獨的人要么是天使,要么是野獸。”:

技巧也是一個很重要的方面。

篇2

【關鍵詞】肝硬化;腸內營養;支鏈氨基酸;谷氨酰胺;膽酸

肝硬化的綜合治療涉及多個方面,營養支持是其中重要的一項治療措施,但容易被忽視,或應用不當,不合理的營養支持甚至會引起肝功能障礙[1]。本文利用肝硬化大鼠模型就此進行一些探討研究,應用支鏈氨基酸、谷氨酰胺和膽酸聯合強化腸內營養,觀察其對肝硬化大鼠的肝功能和血漿內毒素水平的影響,探究選擇性強化腸內營養的方案及其在肝硬化治療中的價值,以期找到一個簡便易行,而又合理的營養支持措施。

1 材料與方法

1.1 材料 動物:清潔級SD雄性大鼠18只,6周齡,體重(230±10)g,徐州醫學院實驗動物中心提供。實驗動物生產許可證號SCXK(蘇)20100003,使用許可證號SYXK(蘇)20100011。藥品:戊巴比妥鈉(中國醫藥(集團)上海化學試劑公司)、硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)(上海士鋒生物科技有限公司)、支鏈氨基酸和谷氨酰胺(無錫一諾化工產品有限公司)、熊去氧膽酸(上海恒遠生化試劑公司)。

1.2 肝硬化大鼠模型和分組 應用硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)造模[2],用0.03%TAA溶液代替大鼠飲用水,自由進食12周制備肝硬化模型,終末有3只瀕死狀態去除,剩余大鼠恢復清潔自來水飲水2周。隨機取7只一組分為兩組,分別移至清潔新籠適應1 d開始試驗。兩組隨機編為A組(對照組)和B組(試驗組),在自由飲水和進食的基礎上,B組給予營養強化,2次/d營養液灌胃,連續一周。營養液組成:支鏈氨基酸(1.8 ml/100 g體重)、谷氨酰胺(1.0/100 g體重)、以及占比0.2%的膽酸。A組予同量同次生理鹽水灌胃作為對照。試驗結束后首先給大鼠稱重記錄,然后用1%戊巴比妥鈉(0.3 ml/100 g體重)腹腔注射麻醉,固定于手術臺上,手術部位用碘伏消毒,打開腹腔暴露肝臟,將胃挪開稍翻轉肝臟,在肝門與腸道之間找到顏色暗的粗血管即門靜脈,用一次性無菌無熱原污染真空采血管(含少許抗凝劑)由門靜脈采血4 ml,進行3000rpm/min離心1 min,分離血漿、血清待測。

1.3 檢測指標 ①肝功能測定:自動生化分析儀(HRTACHR7600)測定血清谷草轉氨酶(AST)、谷丙轉氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、白蛋白(ALB)濃度、前白蛋白(preALB)濃度。②血漿內毒素(endotoxin)檢測:采用顯色基質鱟試劑盒,操作步驟按其說明書進行。結果以Eu/ml表示。③記錄試驗后兩組大鼠體重。

1.4 統計學方法 計量資料以均數±標準差(x±s)表示,應用簡明統計分析軟件t檢驗方法檢驗。

2 結果

2.1 A組和B組肝功能結果比較 見表1。

B組(試驗組)與A組(對照組)比較,ALT、AST、TBIL顯著降低,preALB明顯提高,ALB無明顯變化。

2.2 A組和B組內毒素和體重結果 見表2。

3 討論

肝硬化的營養不良表現是多方面的,低蛋白血癥及氨基酸失衡是其中重要的一個方面,支鏈氨基酸減少而芳香族氨基酸增多,是誘發肝性腦病的原因之一。同時氨基酸成分的紊亂又影響蛋白質的合成,而內源性蛋白質的降解進一步加劇低蛋白血癥,形成惡性循環[3]。本研究強化了肝硬化大鼠的支鏈氨基酸營養,試驗組前白蛋白水平得到提高,說明該營養方案有利于蛋白合成,而白蛋白沒有顯著變化。可能與前白蛋白半衰期較白蛋白短,而試驗時間不夠長有關,而前白蛋白更能敏感反應肝臟合成功能。研究表明肝硬化伴隨著腸屏障功能的損傷[4],肝硬化時腸上皮細胞微絨毛稀疏、排列不整齊并有部分缺如,而且上皮細胞間緊密連接開放。部分線粒體腫脹,基質密度降低,嵴減少。肝硬化使腸黏膜發生一系列的變化導致其屏障功能受損[5]。谷氨酰胺是腸上皮細胞增殖的重要原料,是腸道修復的主要營養物質[6]。血中內毒素水平與腸黏膜屏障的通透性密切相關[7],本研究顯示,含谷氨酰胺的營養強化干預措施降低了肝硬化大鼠的血漿內毒素水平,說明應用谷氨酰胺可減輕肝硬化的腸屏障功能損傷。肝硬化時膽汁分泌可顯著減少[8],研究表明如增加腸內膽酸含量則有利于肝功能改善[9],對營養支持有益,也有益于抑制腸內細菌過生長。本研究的腸內營養強化方案就包含了膽酸成分,肝功能的改善結果也是令人滿意的。這一營養強化方案方便易行、價格低廉,值得在臨床進一步研究推廣。

參 考 文 獻

[1] 謝鋼,李運景.全胃腸外營養長期應用引起的肝損害.藥物不良反應雜志,2007,9(5):335338.

[2] 羅時敏,譚衛民,莊思敏,等.硫代乙酰胺誘導的肝硬化大鼠蛋白質代謝變化.中國醫師雜志,2005,7(7):919921.

[3] Ikeda S,Kudsk KA,Fukatsu K,et al. Enteral feeding preserves mucosal immunity despite in vivo MAdCAM1 blockade of lymphocyte homing.Ann Surg,2003,237(5):677685.

[4] 陳渝萍,鐘轉華,梁月環,等.微生態制劑對肝硬化患者腸屏障功能影響及療效觀察.臨床消化病雜志,2010,22(4):204207.

[5] 李建紅,霍麗娟,高峰.谷氨酰胺對肝硬化大鼠腸屏障功能的保護作用.中國藥物與臨床, 2013,13(3):305307.

[6] 果磊,黃崇本.谷氨酰胺在腸道的代謝及其作用.中國藥房,2005,16(4):305307.

[7] 高青芳,馬小美,劉虹.血必凈對腸源性內毒素血癥引起的急性肝損傷的保護作用.中國藥物與臨床,2010,13(3):775777.

篇3

一、大學生村干部通過兩年多的實踐,從不會干到干得好,精神和能力兩方面得到升華。

大學生村干部要想干得好,必須對自己有個準確的定位。大學生“村干部”與一般“村干部”相比較,有他的特殊性。“大學生村干部”既不是公務員、事業單位工作人員,也不是完全意義上的村干部。大學生“村官”的工作職責是協助、配合“兩委”建設社會主義新農村,這是大學生當好“村官”的前提。剛到村里時,應該迅速認識、了解、熟悉工作環境,多向村里的老同志請教、學習,爭取盡快進入工作狀態。目前,我鎮首批大學生村干部均有2年以上的基層工作經驗,大多數村官認為在日常要做好六個方面的工作。第一,政策法規的宣傳員。第二,村情民意的調查員。第三,富民強村的促進員。第四,群眾事務的代辦員。第五,弱勢群體的救助員。第六,遠程教育的操作員。

大學生村干部是個新生事物,沒有先例可借鑒,通過第一批大學生村干部深入實踐,我們發現以往選聘大學生村干部的對象及基本條件狹窄,缺乏從實際考慮。由于各村發展狀況層次不齊,經濟發展的近期傾向對村官的要求也不同,比如該村的實際情況是農業較發達,選派專業背景是工科的大學生效果就不如專業背景是農學的大學生。

二、八成以上的大學生村干部希望能夠繼續留任,但是普遍對待遇保障表示憂慮。

通過調查發現,對于第一批即將期滿的大學生村干部來說,有90%的人希望政府能夠拿出一定數量的基層事業單位工作崗位,面向此批大學生村干部定向招錄;有85%的大學生村干部愿意繼續任職;有10%的大學生村干部表示要到社會上另謀職業;有5%的大學生村干部打算利用政府推行的優惠政策自主創業。大學生村干部都紛紛表態,如果能夠繼續任職,一定會兢兢業業,勤勤懇懇協助村支部書記、村主任做好各方面的工作,并積極配合兩委為各村的經濟發展謀求更多的福利。

目前,大學生村干部的政策待遇和保障普遍偏低。第一批大學生村干部今年的工資基本在1500元左右,工資水平和本地的企業員工收入有點差距;并且在當前鄉鎮機關、事業編制嚴格控制的情況下,大學生村干部的“身份”問題難以落實下來,這也使大學生村干部對未來感到迷茫。

三、嚴格聘期考核和年度考核,優秀者優先續聘。

我市XX年選聘的大學生村干部聘期將滿,各鄉鎮(街道)黨(工)委可以對任期滿大學生村干部進行聘期考核和年度考核,考核合格者可續聘。考核主要應該圍繞“德、能、勤、績、廉、學”六個方面,“村官”們撰寫述職報告后,所在鄉鎮(街道)召集考核對象進行集中述職,考核組現場對其進行評分。此外,考核對象所在鄉鎮(街道)將召集其所在村支部書記(主任)、干部和黨員群眾,分別對考核對象進行民主測評,按4:3:3匯總得出民主測評分。考核實行百分制,其中民主測評占總分的60%,考核組評分占30%,考核對象互評占10%。考核結果分優秀、稱職、基本稱職和不稱職四等,60分以下為不稱職。考核結果作為大學生“村官”任用、考錄、獎懲和解聘的重要依據,考核優秀者將優先續聘。

篇4

經局黨組研究決定,今天召開全局干部職工思想作風整改大會。主要任務是認真總結前一階段思想作風建設的情況,安排部署整改提高階段的各項工作,動員廣大干部職工進一步解放思想,提高認識,強化措施,狠抓落實,圓滿完成思想作風建設活動的各項工作任務。下面,我講三個方面的問題:

一、前一階段思想作風建設情況

自全縣干部思想作風建設活動開展以來,規劃局干部職工迅速行動,較好完成了的工作任務,主要體現在:

一是領導班子重視。局黨組多次召開會議,專題研究部署思想作風建設工作。班子成員帶頭垂范,根據職責分工,分片包干負責,形成了分級管理,一級抓一級,層層抓落實的良好局面。此外,我局還邀請部分人大代表和政協委員召開座談會,認真聽取他們的批評和建議,并由局黨組成員當面逐一回復。從而使全局干部思想作風進一步轉變,機關效能進一步提高,大局意識進一步增強,有力地促進了城鄉規劃事業的發展。

二是自我剖析深刻。廣大干部職工積極查找個人在理想信念、宗旨觀念、組織紀律、思想作風和工作作風等方面存在的問題中找不足,從工作實踐中找差距,從實際案例中找教訓,切實做到了問題查得準,根源挖得深,觸及靈魂和要害。按照活動要求,局機關黨支部認真組織召開了專題民主生活會,組織黨員干部開展批評和自我批評,做到了講黨性不講面子,講要害不講枝節,使黨員干部思想受到了很大觸動,認識上得到了升華。

三是活動形式多樣。為進一步激發廣大干部職工參與作風建設活動的積極性和主動性,組織了社會公開服務承諾、黨風廉政建設警示教育、“作風監督熱線”、“陽光規劃”等多項活動。寓作風建設于活動之中,形成了廣大干部職工關注、支持、抓好作風建設的良好氛圍。公開服務承諾活動求真務實、詳細具體,并通過電視對外進行了公開承諾;黨風廉政建設警示教育采取觀看警示錄象、從而筑牢了黨員干部拒腐防變的思想道德防線,激發了立黨為公、執政為民的內在動力。

二、存在的問題及其原因

在肯定成績的同時,我們也要看到存在的問題和不足,主要表現在:一是服務不優,存在憑個人感覺辦事、相互推諉、說話不中聽、對群眾不熱情等現象;二是執法不嚴,剛性控制引導不夠、規劃隨意性大,行政處罰標準不一、變化多;三是形象不佳,內部管理不夠規范,極少數人紀律作風觀念淡薄。

規劃局是一個新單位,我們從事的是具有戰略性、前瞻性和挑戰性的公共管理工作,一切工作無套路可循,無先例可遵,也暫無過多的手段與資源可依。過去的一年多,廣大干部職工加班加點,辛勤工作,做了許多有影響的、有目共睹的、大量卓有成效的工作,在座的絕大部分同志可謂勞苦功高。為什么在全縣作風建設講評大會上規劃局被點名批評?原因何在?

作為黨組書記和局長,承擔作風建設的責任責無旁貸,第一責任在我。我已經在最近的局黨組會、局長辦公會上作了自我批評,請大家繼續監督和支持我的工作。同時,大家靜下來想一想,拋開國家法律和政策層面的因素不說,我們主觀上是不是還個別存在大局意識不強、服務意識不強、公仆意識不強?作為國家工作人員,是執行公務的人員,也是為人民群眾提供公共服務的人員。我們的權力來自人民,我們的薪水出自納稅人,我們應當而且必須為民眾提供好我們的服務。這不是過分的、特殊的要求,而是每個人的應有之義和基本職責。我們有時在工作中是不是“多了點火氣、少了點耐心”?古人說:“心平氣和、百福自集。”工作情緒化,無條理性,一團亂麻,天天忙得暈頭轉向,既不出活,更不出彩。我們的內心要和諧,管好自己的情緒,不要因為過激的言行,而影響整個部門的形象。所謂態度決定一切。一個人的工作作風好,不是裝出來的,而是從內心深處自然流露出來的。我們要學會安排,學會思考。我們的工作是有原則的,只能滿足建設單位和個人的合理要求,不能滿足他們的無理要求;與其他部門的合作,既要講配合,又要講原則,必須做到不卑不亢。

三、變壓力為動力積極整改

11月3日,縣委常委、組織部部長曾祥文同志親自掛帥的縣委思想作風建設工作組進駐規劃局。對此,我們應該正確認識和對待,大家不要有包袱,我們要變壓力為動力,積極整改。

一是加強教育,提高認識。緊緊圍繞縣委、縣政府的中心工作,全力以赴地完成交辦的各項任務,千方百計圍繞中心創造性地開展工作,服務全縣發展大局,是我們的職責。縣里定下來的事情,安排好的工作,我們堅決馬上去辦,立即去做,做到雷厲風行,精益求精。同時,加強黨風廉政警示教育,鼓勵高調做事,低調做人;高標準工作,低標準生活。強化廉潔自律,凈化社交圈,多與基層群眾交往,多與有品味的人交往,少與不懷好意、拉拉扯扯的人交往,更不要與低級粗俗、品味低下的人交往。

二是選賢用能,激活隊伍。堅持“不能讓綜合素質高的人吃虧,不能讓干事的人吃虧,不能讓老實人吃虧”的用人導向,大力實行競爭上崗制度,正股級負責人一律實行競爭上崗。努力破除“求全責備”、“論資排輩”等陳舊觀念,大膽提拔使用優秀干部,把他們放到重要崗位去鍛煉,嚴格要求、嚴格教育、嚴格管理,促使他們健康成長。同時加快制定完善定期輪崗制、ab崗位制、首問負責制、服務承諾制、窗口部門流程化管理等制度,并著手修訂完善現有的一系列制度,進一步規范制度,實現用制度管人、管事、管作風,激活干部職工隊伍,保證局內各項工作規范順暢。

三是簡化程序,優化服務。堅持“只做減法,不做加法”,在法律、法規規定的情況以外,不增加新的規劃審批環節和條件。堅持“換位思考,急人所急”,積極為建設單位出謀劃策,把事情辦妥辦好。每個工作人員務必做到“六不讓”(即不讓領導布置的工作在我這里延緩;不讓該辦的事在我這里耽擱;不讓差錯在我這里產生;不讓來辦事的群眾在我這里受冷落;不讓不正之風在我這里產生;不讓單位形象在我這里受損害)、“六個一”(即一張笑臉迎進,一句好語相問,一杯清茶暖心,一把椅子讓座,一身正氣辦事,一個滿意答復),真正在思想感情上貼近群眾,真正把對上負責與對下負責有機統一起來。

篇5

【摘要】 探討虎金顆粒對免疫性肝纖維化模型大鼠肝功能和血清中肝纖指標的變化的影響。[方法]用豬血清腹腔注射誘導免疫性肝纖維化模型,并用不同劑量的虎金顆粒進行干預,用全自動生化分析儀測定肝功能,用放射免疫分析法測定血清肝纖指標。[結果]豬血清誘導的肝纖維化大鼠血清中AST、ALT、HA、LN、IVC和PCⅢ含量均明顯升高,虎金顆粒對上述指標有一定的逆轉作用,并能升高血清中白蛋白含量。[結論]虎金顆粒對免疫性肝纖維化有一定的防治作用,能降低肝纖維化程度,同時有效減輕肝細胞損傷,改善肝功能。

【關鍵詞】 虎金顆粒;免疫性;肝纖組化;肝功能

Abstract: [Objective] To explore the effect of Hujin Granule on liver function and serum fiber index of rats with immune hepatic fibrosis. [Method] Make abdominal injection with pig serum to induce immune hepatic fibrosis model, make intervention with different dosages of the Granule, measure liver function with automatic biochemical analyzer, and test serum hepatic fibrosis index with radioimmune analyse. [Result] The AST,ALT,HA,LN,IVC and PCⅢ contents in rats serum with hepatic fibrosis induced with pig serum rose obviously, the Granule had definite reversion to the indexes above and could raise albumin content in serum. [Conclusion] Hujin Granule has definite prevention to immune liver fibrosis, can reduce fibrosis degree, meanwhile effectively decrease liver cell injure and improve liver function.

Key words: Hujin Granule; immune; liver fibrosis; hepatic function

虎金顆粒是我校肝病專家的經驗方,該方由虎杖、郁金、澤瀉、三七、山楂、靈芝所組成,有活血祛瘀、疏肝益氣、清熱祛濕的功效,臨床上用于治療肝纖維化和肝硬化有較好的療效。本文擬采用豬血清誘導的免疫性肝纖維化模型,從血清酶、血清蛋白、血清肝纖指標等方面,進一步探討該方的抗肝纖維作用。

1 材料與方法

1.1 動物

健康SD大鼠,雄性,體重120~140g,由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供(動物合格證:2003A010)

1.2 藥品與試劑

(1)虎金顆粒:由廣州中醫藥大學中藥研究所提供,系按處方比例取虎杖、郁金、山楂、靈芝等藥物,用70%乙醇回流提取,濃縮而得的稠膏經真空干燥粉碎后再與適量三七粉混合,制成顆粒劑,批號:030604。使用前用蒸餾水配制成24%、12%、6%三種濃度的混懸液,放置于4℃冰箱保存。(2)陽性對照藥:秋水仙堿(Colchicines),為昆明制藥集團股份有限公司產品,批號002509。(3) 豬血清:從廣州市加禾屠宰廠取新鮮豬血,靜置數小時后取豬血上清部分,3500rpm離心10min,回收上清,即得豬血清,用0.45μm微孔濾膜過濾除菌,分裝后于-20℃冷凍結冰,后轉-70℃保存備用。(2)谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)試劑盒,由南京建成生物工程研究所提供。(5)透明質酸(HA)、層黏蛋白(LN)、Ⅳ型膠原( ⅣC)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)試劑盒,由北京北方生物技術研究所提供。

1.3 主要儀器

SN695B型放免γ測量儀(上海日環儀器廠生產);7060型日立全自動生化分析儀。

1.4 分組

將SD大鼠隨機分為6組。①正常組:不經造模階段,同等條件下喂養作正常對照。②模型組:同等條件下喂養,不給治療藥物。③秋水仙堿組:每日灌服秋水仙堿1次,用量為0.1mg/kg。④虎金顆粒大劑量組:每日灌服虎金顆粒1次,用量2.4g/kg。⑤虎金顆粒中劑量組:每日灌服虎金顆粒1次用量為1.2g/kg。F組:⑥虎金顆粒小劑量組:每日灌服虎金顆粒1次用量為0.6g/kg。

1.5 造模

腹腔注射豬血清,0.5ml/只,每周2次,連續12周,于造模之日起,開始灌胃給藥,至第12周,每組隨機選取存活的大鼠 8只,在乙醚麻醉下打開腹腔,經下腔靜脈采血,分離血清-70℃保存待檢。

1.6 谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)的檢測。采用全自動生化分析儀進行檢測。

1.7 透明質酸(HA)、層黏蛋白(LN)、Ⅳ型膠原(ⅣC)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)的檢測。采用放射免疫分析法,按說明書嚴格操作。

1.8 統計方法

全部數據均以 表示,采用SPSS11.5統計軟件進行數據分析,組間比較采用t檢測法。

2 結果

2.1 由豬血清誘導的免疫性肝纖維化模型大鼠血清中ALT、AST明顯升高,與正常組比較,差別有顯著性(P

2.2 模型組大鼠血清白蛋白含量明顯減少,白蛋白和球蛋白的比值(A/G)下降,而虎金顆粒組血清白蛋白有不同程度的恢復,特別是虎金顆粒大劑量組,白蛋白含量和A/G比值幾乎接近正常組(見表2)。表2 各組大鼠血清中ALB、TP、A/G含量變化(略)與正常組比較:##P

2.3 豬血清誘導的肝纖維化大鼠血清中HA、LN、IVC和PCⅢ均明顯高于正常組,差別有顯著性(P

3 討論

結果表明,由豬血清誘導的免疫性肝纖維化模型大鼠血清中ALT、AST明顯升高,與正常組比較,差別有顯著性,而虎金顆粒組血清中ALT和AST的含量明顯減少,且有一定的量效關系,表明虎金顆粒對豬血清所致的免疫性肝纖維化大鼠有較好的保肝降酶作用。

血清白蛋白(ALB)的水平可反映肝臟功能。 但由于炎癥肝細胞破壞,或抗原性改變刺激免疫系統導致球γ蛋白增高,彌補了血清蛋白的減少部分,因此總蛋白(TP)可能變化不大,但白蛋白和球蛋白的比值(A/G)可能變小。因此,臨床上常把測定血清白蛋白的濃度及A/G作為慢性肝病患者肝功能實際情況的重要指標[1]。實驗結果表明,模型組大鼠血清白蛋白含量明顯減少,白蛋白和球蛋白的比值(A/G)下降,而虎金顆粒組大鼠血清白蛋白有不同程度的恢復,特別是虎金顆粒大劑量組,白蛋白含量和A/G比值幾乎接近正常組。因此認為,虎金顆粒能促進免疫性肝損傷大鼠的白蛋白的合成,并能提高血清白蛋白的含量度,恢復A/G比值。

豬血清誘導的肝纖維化大鼠血清中HA、LN、ⅣC和PCⅢ均明顯高于正常組,差別有顯著性。虎金顆粒不同劑量組與模型組比較,血清中HA、LN、 ⅣC和PCⅢ均有不同程度的下降,且呈現出一定的量效依賴關系。結果表明,虎金顆粒對免疫性肝纖維化有一定的防治作用,能降低肝纖維化程度,同時有效減輕肝細胞損傷,改善肝功能。

篇6

1、斯柯達昊銳工具箱里有OpEN是讓空調冷風可以吹進去的開關,類似冷藏箱。

2、斯柯達昊銳,是上海大眾汽車有限公司推出的一個汽車品牌,首批上市的有9款車型,其中1.8T5款,2.0T4款。9款車型中除了1.8TSI版本中帶有一款手擋車型外,其余8款昊銳產品均為6速手自一體變速器,DSG版昊銳將會在2010年推出,為國產7速DSG變速器。

3、2009年7月16日,上海大眾斯柯達旗艦車型昊銳已經開始在全國范圍內進行了預售,之前官方公布了9款車型的預售價和詳細的參數配置。2009年8月18日昊銳正式上市。

(來源:文章屋網 )

篇7

關鍵詞:扒桿吊裝 施工技術 橋梁施工

隨著城市基礎設施建設步伐的加快,橋梁工程發揮著越來越重要的作用,在橋梁建設中,預制箱梁吊裝方案的正確選用,對于整體施工有著重要的影響,因此預制箱梁的合理吊裝是裝配式混凝土橋梁施工中的關鍵工序。吊梁方案的選擇,首先應結合施工現場的實際情況,如場地周圍建筑物、其他基礎設施、橋梁跨徑、工期條件等具體情況進行綜合考慮,以安全可靠、經濟簡單與加快施工進度為原則,選用合理的架梁方案。城市橋梁的建設中,往往由于施工場地狹小,周圍建筑物密集,臨空線路復雜,特別是在大跨徑、大噸位梁體吊裝中,吊車等無法站位,而扒桿吊裝這種古老的吊裝因為其設備簡單、組裝方便、移動靈活、易于運輸、操作簡便、成本低廉等特點受到人們的歡迎,特別是在梁體數量不太多且場地受限制時。

一、工程概況

大砂溝橋梁工程是在拆除原有橋梁的基礎上加寬的新建工程,舊橋為原109國道跨越大砂溝處3×20米的洪道橋,新建橋梁與大砂溝正交,全橋長70m,橋型結構為2×35m后張法預制空心箱梁,共有22片梁體,梁高為1.8m,邊梁寬為3.05m,中梁寬為2.8m,其中邊梁4片,安裝重量為130t,中梁18片,安裝重量110t,橋梁為蘭州市大砂坪高速公路進出口的必經之路,施工交通壓力大,橋體兩側建筑物密集,而且受拆遷影響,梁體施工場地狹小,臨空有高壓線和各種通信線纜,單片梁體較重,吊車吊裝無法站位,有效作業半徑不夠,無法實施;架橋機由于梁體不多且施工場地狹小,施工成本高,不經濟。綜合施工的可行性與經濟性,經過反復論證和比較。最終確定箱梁的吊裝采用雙人字扒桿法吊裝。下面介紹扒桿施工在梁體架設過程中的應用。

二、箱梁吊裝

1.人字扒桿結構及具體工藝

(1)人字形扒桿是采用角鋼加工而成的桁架結構。其中,主桿采用80×5角鋼焊接而成;平桿采用50×5角鋼;斜桿采用40×5角鋼。分為三節制作,節長為6m。桅桿豎立后底寬6m,兩付能承受吊裝能力160t,高度為18m。

(2)起重系統由滑輪組、導向滑輪、卷揚機組成。滑輪組采用16門滑輪(定、動滑輪各8門)、中20鋼絲繩花穿法聯結,鋼絲繩跑頭通過導向滑輪連接卷揚機。卷揚機采用50kN慢速卷揚機,單頭牽引力50kN,吊裝預制梁時最大牽引力30kN。對于卷揚機的地錨設置,一般可設于橋墩背墻的位置上,通過背墻的預留孔進行固定,也可用梁體連接座為其地錨。

(3)纜風繩采用φ28鋼絲繩,每副人字扒桿安裝前后纜風繩各2根,主拉背索纜風繩2根,由滑輪穿繞。利用大橋橋墩背墻上的預留孔作為纜風繩地錨,待第一跨吊裝后,利用連體箱梁作為人字扒桿架后纜風地錨,如果現場情況或扒桿的位置不允許時,可在橋的兩側選用合理的地方,澆注砼地錨或挖埋鋼木地錨進行扒桿的纜風繩固定。進而滿足后續扒桿的正常吊裝。在吊裝中,纜風繩的固定可以根據現場的實際情況進行適當的調整。在考慮箱梁的吊裝順序時,施工現場的實際情況對纜風繩的具體固定實施與細節都有著重要的影響。

(4)移動龍門架:主要解決預制場的預制箱梁起吊,確保采用鋼絲繩對預制箱梁的捆綁。起吊原理主要依據定動滑輪,通過固定的卷揚機進行拉引起吊,同樣對于移動龍門架上須安裝8門式的定動滑輪各一組,解決牽拉荷載的有效轉移,移動龍門架的移動主要靠兩側的手控電動裝置解決前后移動。所用的材質主要為φ150的無縫鋼管與300×15的工字鋼。荷載要求達到90t,凈寬度為3.5m。能夠滿足預制箱梁的基本尺寸要求。

(5)所需主要機具材料有:

主扒桿:兩付,每付六節,每節6m。

人字輔助扒桿:一付高6m,在豎立主扒桿時使用。

卷揚機:5臺,牽引能力5t(11kw)的慢速卷揚機,在起吊箱梁及運輸箱梁時使用。

油壓千斤頂50t規格4臺:當無法使用移動龍門架起梁時,可以采用油壓千斤頂起

動滑輪:4組,起吊梁用。

導向滑輪:10個,導向及其它用。

鋼絲繩:吊制用鋼絲繩直徑20mm:2500m,起吊預制梁拖運用。纜風繩直徑28mm:800m;分別作為扒桿的前纜風繩和后纜風繩。

梁托:2個;移梁時卡在梁端,并用三角支撐頂住梁翼,防止預制在移動及吊裝中發生傾覆。

2.梁體吊裝

(1)梁體運輸

首先將移動龍門架移至需要起梁的梁端處,龍門架深入梁端約1.5米左右,通過預制梁翼板的預留口,采用@40mm的鋼絲繩將箱梁進行綁扎,在鋼絲繩與箱梁接觸的部位采用護墊進行墊護,保護箱梁不被損壞。然后采用導向滑輪及滑輪組將梁吊起,放上平車把梁撐穩進行運輸。如果場地限制太大,可以采用托板和無縫鋼管做滾杠移梁,把箱梁放在托板上方,用卷揚機牽引滑動移梁,

為不影響后續箱梁的就位情況,要求對于橋臺的背墻施工完畢才能進行正常吊裝,可將扒桿豎立在背墻上部,比較穩定,有利于扒桿的橫移;對于扒桿的固定可以通過背墻上預留的洞口進行固定,利用背墻可以解決背墻后部的回填密實問題,避免箱梁運至背墻處出現背墻后部位置的不均勻下沉,影響箱梁的正常吊裝。

(2)首跨梁體吊裝

首跨梁體架設中,橋臺上的扒桿為主桿,橋墩上的扒桿為副桿,在第二跨梁體安裝時橋墩上的扒桿為主桿而另外一側橋臺上的扒桿則為副桿,主、副桿互換來吊裝前后兩跨梁。

當梁體前段移至橋墩時,主副扒桿的鋼絲繩通過吊鉤同時勾住梁體前段,前平車退出,副桿上的鋼絲繩收進,主桿上的鋼絲繩放松,梁體慢慢前移,移動過程中密切觀察,梁體底部不容許落在橋墩背墻上。當梁體前端接近橋墩時,在梁體后端通過轉向滑輪和卷揚機拉住梁體,然后用主桿上的吊鉤勾住梁體后端,后平車退出,控制梁后端的拉繩慢慢移動梁體,直到梁體到達設計位置,利用轉向滑輪調整梁體端頭橫向位置,同時主副桿吊鉤同時下降,調整好支座,使梁體就位。用同樣的方法吊裝完第一跨梁體。

第二跨梁體吊裝時主副桿位置互換,方法同第一跨梁體吊裝。

3.施工安全措施

(1)進場設備如卷揚機等必須要有相關部門的鑒定檢驗證書,保證設備的正常運轉,施工前做好驗算工作,包括鋼絲繩、吊具、滑輪組數、卷揚機功率、地錨固定受力等。

(2)作業人員必須經過安全培訓,聽從指揮人員統一指揮,纜風繩及梁體架設中必須有專人觀察,如有異常情況及時反映給指揮人員,進場人員佩戴安全帽,高空作業時必須系安全帶等防護用品。梁體吊裝過程中梁下禁止人員及機械停留。

(3)施工場地禁止非作業人員人內,作業時間應為白天,禁止在雨雪及大風等不良氣候條件下作業。

三、施工注意事項

1.雙扒桿頂部梁體自重荷載受力驗算時參考下式計算

P:K×預制梁重力的1/2+吊具重力+沖擊荷載,其中K為動荷載系數,電動卷揚機取1.1;手動卷揚機取1.0。

2.在梁下無支架,無導梁支托的情況下,把梁懸空掉過橋孔,再橫移、落梁,就位安裝,一般主扒桿高度不宜小于梁長的1/2,其有效高度不宜小于梁長的30%。

3.精確定位時前后方向由卷揚機帶動一鋼絲繩來調整,鋼絲繩盡量和梁體軸線重合,架橋全過程中,吊繩拉力與梁體軸線方向應保持垂直,確保不會對梁體產生較大的軸力。

4.梁體起吊及吊裝過程中,為防止鋼絲繩對梁體的損傷,可用鋼板加工和梁身相符的鋼托,內墊橡膠等柔性材料來保護梁體。

5.吊裝好的梁體在絞縫及連接板沒有施工之前不要作為纜風繩的地錨,因為梁體落在固定及滑動支座上容易移動,要及時保護成品。

四、結束語

橋梁(預制梁橋)的架設是橋梁施工過程中的一個重要的環節,其方案的選擇對工程的成敗及經濟效益有顯著影響。扒桿吊裝這種古老的吊裝技術,具有簡單、便于安拆、操作簡單、經濟等優點,在特定的環境下能發揮出其獨特的優勢,即節約了成本,又加快了工程進度。本文通過工程實例對扒桿吊裝的結構工藝、施工過程及注意事項進行了闡述,對同類型的工程施工具有一定的指導意義。

參考文獻

篇8

為提高我市大學生乙肝疫苗的接種率,有效預防乙型肝炎的流行,衛生部與國家扶輪組織、香港擇善基金會合作,決定在我市職業技術學院大學生人群中實施乙肝健康教育和疫苗接種防治項目,為了在我市大學生中有效開展乙肝防治知識的項目健康教育活動,特制定《市大學生項目乙肝健康教育工作實施方案》。

一、目標

總目標:

開展廣泛宣傳,提高在校大學生乙肝防治知識的認知。

具體目標:

目標人群乙肝相關知識知曉率達到95%以上。

二、目標人群:

市職業技術學院9月---7月期間在校大專、本科生。(不包括中專、研究生)

三、實施內容

(一)人員培訓

由市疾控中心負責學校校醫、輔導老師的培訓工作,由校醫、輔導老師對學生骨干進行培訓。具體培訓內容包括大學生項目實施方案、乙肝防控知識、健康教育組織實施等。

(二)健康教育

由市疾控中心、校醫、輔導員和學生骨干共同參與開展廣泛、深入的校園健康教育活動,提高廣大師生預防保健知識水平和主動參與預防乙肝的意識。

主要內容:乙肝傳播途徑、乙肝防治常識等

(三)主要形式、方法及時間安排:

1、在校園內懸掛橫幅、張貼宣傳畫,制作乙肝防治知識展板和板報等,營造濃厚的乙肝健康教育氛圍。(5月18日—6月20日)

2、利用校園廣播、網絡等媒體對乙肝防治知識進行宣傳。(5月18日—6月20日)

3、由市疾控中心專業人員到校園舉辦乙肝知識專題講座。(6月7日—6月11日)

4、印制乙肝相關知識的各類宣傳品在校園內散發,以提高學生參與積極性。(5月18日—6月20日)

5、組織開展乙肝知識問答活動,以便了解目標人群知識的知曉率。(5月18日—5月31日)

四、督導檢查

為了確保宣傳教育活動的有效組織實施,市級衛生、教育部門聯合擬對宣傳教育活動進行督導。通過現場調查、查閱資料等方法詳細了解項目組織實施及進展情況。

篇9

【摘要】 目的 使用SMMC-7721肝癌細胞株對SPRIDA-A、SPRIDA-B和SPRIDA-A+SPRIDA-B體外抑制腫瘤生長和粘附功能進行。 采用MTT比色法觀察SPRIDA-A、SPRIDA-B、SPRIDA-A+SPRIDA-B對SMMC-7721肝癌細胞生長和粘附功能的,測定其生長抑制率和粘附抑制率。結果 SPRIDA-A對SMMC-7721肝癌細胞生長抑制作用不明顯,SPRIDA-B和SPRIDA-A+SPRIDA-B對肝癌細胞生長有明顯抑制作用,并呈劑量依賴關系;SPRIDA-B對SMMC-7721肝癌細胞粘附功能有明顯抑制作用,并呈劑量依賴關系。SPRIDA-B作用于SMMC-7721肝癌細胞后,可見明顯的凋亡細胞形態出現。結論 SPRIDA-B對SMMC-7721肝癌細胞生長和粘附功能有明顯抑制作用,并可誘導細胞凋亡,是一個極具研究價值的抗腫瘤及抗轉移的新藥。

【關鍵詞】 SPRIDA-A;SPRIDA-B;肝癌細胞;轉移;粘附;凋亡

Effects of SPRIDA on growth and adhesion of hepatoma cell SMMC-7721

【Abstract】 Objective Study on SPRIDA-A,SPRIDA-B and SPRIDA-A+SPRIDA-B inhibit growth and adhesion of tumor in vitro by using hepatoma cell line SMMC-7721.Methods MTT was used to investigate the effect of SPRIDA-A,SPRIDA-B,SPRIDA-A+SPRIDA-B on growth and adhesion of hepatoma cell SMMC-7721,and detect the inhibition rate of growth and adhesion.Results SPRIDA-A could not obviously inhibit the growth of hepatoma cell SMMC-7721,SPRIDA-B and SPRIDA-A+SPRIDA-B could obviously inhibit the growth and adhesion of hepatoma cell SMMC-7721 in a dose dependent manner.It was clear that SPRIDA-B could induce the apoptosis of the cells, it was used on hepatoma cell SMMC-7721.Conclusion SPRIDA-B that could obviously inhibit the growth and adhesion of hepatoma cell SMMC-7721 and induce the apoptosis of the cells,was an antitumor and antimetastasis drug with remarkable value for study.

【Key words】 SPRIDA-A;SPRIDA-B;hepatoma cell;metastasis;adhesion;apoptosis

苦豆子Sophor alopecuroides L為豆科槐屬植物,在我國西北地區分布廣泛。我們從其全草中提取、分離得到生物堿I,并經半合成、純化制備得SPRIDA-A和SPRIDA-B,SPRIDA-A和SPRIDA-B為同分異構體。SPRIDA-A為人工構型,SPRIDA-B為天然構型。兩者由于構型不同,生物活性也可能不同,為了驗證其體外抗腫瘤和抗腫瘤轉移作用,我們利用SMMC-7721肝癌細胞進行了其體外抗腫瘤及抗轉移作用的研究[1~3]。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物 SPRIDA-A、SPRIDA-B,均為白色固體粉末,引吸濕性強,溶于水,純度大于95%,由本實驗室自制。

1.1.2 主要試劑 RPMI—60培養基、小牛血清、胰蛋白酶、MTT、二甲基亞砜(DMSO)購于醫學院血液學研究所, ECMGEL購自sigma公司。

1.1.3 細胞系 SMMC-7721肝癌細胞株,購于中國醫學科學院基礎醫學研究所。

1.2 方法

1.2.1 細胞培養 SMMC-7721肝癌細胞常規培養于10%小牛血清、100U/ml青霉素及100U/ml鏈霉素的RPMI—60培養基中,置于37℃ CO2培養箱內培養,2~3d傳代1次,以維持細胞處于對數成長期。

1.2.2 SPRIDA-A、SPRIDA-B、SPRIDA-A+SPRIDA-B對SMMC-7721肝癌細胞生長的影響 采用噻唑氮藍(MTT)比色分析法。將對數生長期細胞接種于96孔培養板,細胞濃度為8×104/ml,每孔0.2ml,將SPRIDA-A、SPRIDA-B、SPRIDA-A+SPRIDA-B與細胞共培養24h,加150μl DMSO,全自動酶標儀測定波長490nm光密度(A)值,每孔設6個復孔。試驗重復三次,各組均值。試驗組按下式計算細胞生長抑制率:

生長抑制率(%)=(1-試驗組A值/對照組A)×100%

1.2.3 SPRIDA-A、SPRIDA-B對SMMC-7721肝癌細胞粘附功能的影響 采用噻唑氮藍(MTT)比色分析法。96孔板每孔中分別鋪上ECM CEL各50μl,4℃過夜。加入1%BSA150μl/孔,37℃孵箱內孵育2h,倒置瀝干。9002與細胞共培養24h,調節細胞濃度為8×104/ml,每孔加0.2ml,吸附1h,用無血清培養液洗2次,加入200μl完全培養液,加MTT 20μl/孔,37℃孵箱內孵育4h,加DMSO150μl/孔。全自動酶標儀測定波長490nm的光密度(A)值,每孔設4個復孔,試驗重復二次,計算粘附抑制率:

粘附抑制率(%)=(1-加藥組A值/未加藥組A值)×100%

1.2.4 SPRIDA-A、SPRIDA-B對SMMC-7721肝癌細胞形態的影響 將對數生長期細胞接種于預先置有蓋玻片的6孔培養板內,細胞濃度為8×104/ml,每孔2ml,SPRIDA-A、SPRIDA-B終濃度分別為3.7879×10-4mol/L、1.1364×10-3mol/L、2.2727×10-3mol/L與細胞共培養24h,取出蓋玻片,Ciemsa染色后光鏡下進行細胞形態學觀察[4,5]。

2 試驗結果

2.1 SPRIDA-A、SPRIDA-B單用SMMC-7721肝癌細胞的生長抑制作用 見表1。

表1 SPRIDA-A、SPRIDA-B單用SMMC-7721肝癌細胞的生長抑制作用

由表1可見,SPRIDA-B對SMMC-7221肝癌細胞生長的抑制作用大于SPRIDA-A。隨著SPRIDA-B藥物濃度增大,抑制率也明顯增加,并呈劑量依賴關系。當藥物濃度為1.1364×10-3mol/L時,抑制率可達60%。兩組比較,差異有顯著性(P

2.2 SPRIDA-B、SPRIDA-A+SPRIDA-B對SMMC-7221肝癌細胞的生長抑制作用 見表2。

表2 SPRIDA-B、SPRIDA-A+SPRIDA-B對SMMC-7221 肝癌細胞的生長抑制作用

篇10

【摘要】

目的探討宮內缺氧對生后幼年大鼠齒狀回顆粒細胞及其學習能力的影響和當歸的干預。方法將孕14 d大鼠置于三氣培養箱內缺氧,當歸組在缺氧前注射當歸注射液;缺氧組注射生理鹽水;對照組注射生理鹽水,但不缺氧;待自然生產,產后30 d各組隨機取幼鼠行Morris水迷宮實驗,實驗后取腦組織,行神經元特異烯醇化酶(NSE)免疫組織化學染色。結果水迷宮實驗各組大鼠在目標象限的搜索時間比較:缺氧組<對照組(P<0.05);缺氧組<當歸組(P<0.05);積分光密度(IOD)均數比較:缺氧組<對照組(P<0.05);缺氧組<當歸組(P<0.05)。結論宮內缺氧能損傷齒狀回顆粒細胞并降低大鼠的記憶能力;當歸注射液能減輕宮內缺氧對齒狀回顆粒細胞的損傷,增強缺氧大鼠的記憶能力。

【關鍵詞】 宮中缺氧 當歸注射液 齒狀回顆粒細胞 記憶能力

宮內缺氧是臨床上的常見癥,缺氧對胎兒生長發育可產生嚴重影響,尤其對神經系統影響。神經系統在胚胎發育中出現最早,且對缺氧非常敏感;缺氧可導致如癲癇、腦癱、癡呆等的嚴重后遺癥,因此研究宮內缺氧對神經系統的影響具有重要的臨床意義。為此,本實驗通過建立大鼠宮內缺氧動物模型,采用免疫組織化學法檢測NSE在缺氧大鼠齒狀回中的表達及采用Morris水迷宮檢測缺氧大鼠的記憶能力,探討宮內缺氧大鼠在組織學和行為學上的變化及當歸的干預作用,為臨床研究宮內缺氧對神經系統的長期影響及評估當歸的藥用價值提供理論基礎。

1 材料與儀器

1.1 動物

孕SD大鼠20只,由瀘州醫學院動物實驗中心提供,一級實驗動物(許可證號:川實動管質第17號)。

1.2 儀器和試劑

NSE抗體、SABC試劑、DAB顯色試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司;三氣培養箱(美國REVCO COMPANY);自動切片機(Leica RM2245);Ax07 TRF-A熒光顯微成像系統(Olympus);Image-Pro Plus 5.1圖象分析系統(Media Cybernetics Company);250 g/L當歸注射液(武漢大學中南醫院批號:060926)。

2 方法

2.1 建立模型將孕14d的SD鼠隨機分為對照組12只、缺氧組12只、當歸組15只,缺氧組和當歸組孕鼠置于三氣培養箱內缺氧(O2濃度體積分數:130 ml/L,溫度:25 ℃),缺氧2 h/d,連續缺氧3 d,制作缺氧性腦損傷新生鼠模型,當歸組孕鼠在缺氧前1 h經尾靜脈注射250 g/L當歸注射液(8 ml/kg),注射7 d,缺氧組孕大鼠經尾靜脈注射生理鹽水(8 ml/kg),其余干預措施同治療組;對照組只注射生理鹽水,但不缺氧;待自然生產,生后喂養至第30天。

2.2 Morris水迷宮實驗各組隨機取大鼠(對照組12只,缺氧組12只,治療組15只)行Morris水迷宮實驗,在前幾次訓練中,如果時間超過60 s,則引導大鼠到平臺,讓大鼠在平臺上停留10 s。 連續訓練5 d,階段訓練4次/d,間隔15 min/次,第6天進行60 s的探查實驗;在整個水迷宮實驗的過程中,每天均保持實驗室的光線、環境布局不變。

2.3 免疫組織化學水迷宮實驗結束后立即取幼年大鼠腦組織,經固定、脫水、浸蠟、包埋,經海馬冠狀切面切片(片厚4 μm),切片脫蠟至水。行NSE(1:200)免疫組織化學染色。

2.4 分析與判斷方法

用Ax07 TRF-A熒光顯微成像系統觀察每一張切片,每張切片均以海馬齒狀回為觀察目標,放大倍數為200倍。胞質染成棕黃色的為顆粒細胞,每例大鼠選一張切片,觀察面積為:311×311像素。分析積分光密度值(IOD)和水迷宮實驗大鼠在目標象限的探察時間T。采用SPSS14.0統計軟件包分析,組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),兩兩比較用LSD檢驗。對各指標數值分別作正態分布和方差齊性檢驗。

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3 結果

水迷宮實驗缺氧組大鼠在目標象限的搜索時間比對照組搜索時間短,差異具有顯著性(P<0.05);當歸組大鼠搜索時間比缺氧組搜索時間長,差異具有顯著性(P<0.05)。

對照組大鼠齒狀回可見NSE陽性表達,為棕黃色,成帶狀“V”或“U”字形分布;缺氧組胞體形態不規則,NSE表達減弱;當歸組表達增多,但仍低于對照組位于顆粒層。圖像分析顯示,缺氧組IOD均數比對照組相應指標減低(P<0.05),當歸組IOD均數比缺氧組相應指標增高(P<0.05)。結果見表1。表1 各組積分光密度值及搜索時間(略)

4 討論

胚胎宮內缺氧動物模型目前比較成功的有兩種:一種是Bjelke法[1],該法就是先對孕鼠進行藥物麻醉,后通過夾閉血管的方法來制作缺氧模型。然而,麻醉藥物、剖腹手術可增加對孕鼠和胎鼠新的干擾因素,尤其是對胚胎神經系統的影響不容低估。另一種是余鴻等[2]制作的低張性宮內缺氧模型。本實驗在余鴻等研制的宮內缺氧模型的基礎上,采用了智能型三氣培養箱代替自制的缺氧缸而制成的持續低張性缺氧的動物模型。實驗結果發現缺氧組大鼠神經元的NSE免疫組化陽性細胞的IOD與對照組之間差異有顯著意義,說明缺氧后神經元的數量和功能發生了改變,提示宮內缺氧模型是成功的。與Bjelke法相比,此模型既排除了手術的干擾,也排除了二氧化碳濃度、溫度、濕度變化對實驗的干擾;同時也增大了大鼠缺氧時的活動空間,排除了動物情緒變化對實驗的干擾。

烯醇化酶參與糖酵解過程,其中γγ亞型特異性地存在于神經系統成熟的神經元和神經內分泌細胞中,被命名為NSE。本實驗中,觀察到缺氧后40 d缺氧組大鼠齒狀回NSE免疫組化反應減弱,反映出顆粒細胞在數量上減少,細胞形態不規則,這可能與缺氧導致細胞內Ca2+離子增加,以至細胞內鈣超載,誘發顆粒細胞凋亡[3]和缺氧使N-甲基-D-門冬氨酸(NMDA)受體激活損傷顆粒細胞有關[4]。水迷宮實驗提示缺氧組大鼠空間記憶能力明顯差于對照組,反映出作為記憶基礎的神經元功能受損。

當歸是臨床上的常用藥物,含有阿魏酸、當歸多糖、多種氨基酸和微量元素等[5]。本實驗發現應用當歸注射液大鼠NSE免疫組化反應陽性細胞數量較缺氧組增多,染色增強,說明當歸注射液能減輕缺氧對顆粒細胞的損傷;水迷宮實驗提示當歸組大鼠空間記憶能力明顯優于對照組,提示當歸注射液能改善缺氧大鼠的記憶功能,這與區炳雄等[6]發現當歸多糖可改善模型組小鼠學習記憶能力的結論一致,機制可能與以下兩方面有關:①當歸揮發油通過調節細胞內鈣離子代謝來緩解缺氧對血管平滑肌的刺激,抑制血管痙攣,改善微循環,使胚胎缺氧得以改善;②阿魏酸等有效成分清除缺氧后增多的氧自由基和抗脂質過氧化作用。細胞缺血缺氧時發生能量代謝失常和氧自由基生成,氧自由基可與細胞膜發生一系列反應,損傷細胞膜,產生大量的脂質過氧化物。阿魏酸通過直接消除自由基、抑制超氧自由基引起的膜脂質過氧化反應和自由基反應。

參考文獻

[1]Bjelke B, Andersson K, Ogren SO, et al. Asphyctic lesion: Proliferation of tyrosine hydroxylase-immunoreactive nerve cell bodies in the rat substantia nigra and functional changes in dopamine neurotransmission [J].Brain Res, 1991, 543(1):1.

[2]余鴻, 劉敦玉, 吳雨嶺, 等. 當歸對缺氧鼠胚模型神經干細胞增殖的影響[J]. 中國現代醫學雜志, 2005,15(21):3226.

[3]Mahura IS. Cerebral ischemia-hypoxia and biophysical mechanisms of neurodegeneration and neuroprotection effects[J].Fiziol Zh, 2003, 49(2):7.

[4]李振彪,吳希如,姜玉武. 發育中的海馬神經元缺氧后N-甲基-D-門冬氨酸受體通道電流變化及腺苷干預作用[J].實用兒科臨床雜志, 2007,21(12): 754.