生物工程研究報告范文
時間：2023-12-04 18:05:43
導語：如何才能寫好一篇生物工程研究報告，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。
篇1
姓名：張三
三年以上工作經驗 | 男 | 28歲(1982年1月1日)
居住地：加拿大
E-mail：
教育經歷：
學 歷：碩士
專 業： 生物科學，技術
學 校： 華中農業大學
2000 /9--2006 /6華中農業大學生物科學，技術碩士
我的碩士課題及成果:高效重組苜蓿中華根瘤菌的構建和應用研究
以pTR102 為載體構建重組質粒pHN307，其上克隆有來自苜蓿中華根瘤菌( Sinorhizobium meliloti) 的四碳二羧酸轉移酶基因dctABD、來自肺炎克氏桿菌( Klebsiella pneumoniae) 的nifA 基因和來自pDB30所含的發光酶基因luxAB,再通過三親本雜交把該質粒導入根瘤菌中.已成功構建5種苜蓿中華根瘤菌的重組菌株，并進一步檢測到與出發菌株相比具有顯著增效作用的重組菌，并做重組菌株和出發菌株的競爭結瘤實驗檢驗重組菌株的結瘤能力。
求職意向
到崗時間： 即可到崗
工作性質： 全職
希望行業： 制藥/生物工程
目標地點： 北京
期望月薪： 15K
目標職能： 生物工程/生物制藥
工作經驗：
公 司：辛普森集團
行 業：制藥/生物工程
職 位： 生物工程/生物制藥最高學歷
1、負責TNF-a抗體的人源化改造，包括抗體cDNA文庫的設計、文庫表達載體的構建及菌株篩選
2、作為項目負責人，全面負責“IL-12抗體人源化改造”項目，包括上游策略設計、抗體CDR3的親和力成熟、構建Fab表達文庫及篩選
3、負責Herceptin和Rituxan兩種仿制藥的CHO細胞表達載體的構建。構建多種調控體系下的表達載體
4、進行項目研究報告的書寫，以及項目負責人的定期項目報告與項目小組討論
自我評價
熟悉生物新藥開發流程，精通基因克隆，文庫構建等分子克隆技術，以及常規蛋白檢測手段;熟悉蛋白純化和細胞培養相關技術。
熟練查閱相關專業資料，熟練應用電腦辦公軟件以及生物相關的軟件和生物信息學技術。
篇2
生物工程專業綜合實驗是一門全面提高學生素質的復合型實驗課程。實驗教學改革以培養高質量學生為目標，結合地區經濟發展，融合教師科研項目，聯合社會企業人才，內涵式發展建設生物工程專業人才培養平臺，探索了以學生能力和素質為核心的實驗教學模式。
關鍵詞
生物工程；綜合實驗；內涵發展；教學改革
以學生為主體，以學生為核心，以挖掘學生潛力為目標進行實驗教學改革是非常有意義的嘗試。生物工程是集生物化學、細胞工程、基因工程、分子生物學、微生物學、發酵工程、生物物質分離工程等眾多生物技術的綜合性學科，是一門實驗性和應用性很強的學科。“生物工程專業綜合實驗”（簡稱“綜合實驗”）在本科生培養計劃中占有非常重要的位置，是一門能使學生綜合已學知識來設計和操作實驗，對學生實驗技能和實驗方法進行綜合訓練的復合型實驗課程[1-3]。加強實驗教學是體現學科特點，提高教學重量的關鍵環節，在加強對學生的素質教育和培養創新能力有著重要的、不可替代的作用。
1生物工程專業綜合實驗的發展進程
我校重慶理工大學一直以來秉承“以產學研為特色，以理論研究和應用研究為主，突出為兵工和地方經濟服務，以促進科技成果向產業和教學雙轉化為導向”的辦學指導思想，自2002年生物工程專業建立后，學院就將“綜合實驗”作為一門獨立的課程開設。課程目的一是強化學生對生物工程實驗基本操作，二是培養學生綜合運用專業知識和技能解決問題的能力。“綜合實驗”安排在第七學期末，學生在完成基礎專業課和專業實驗后，通過“綜合實驗”的學習和鍛煉可對前期所學理論知識有更直觀和深刻的認識。“綜合實驗”共72學時，經過了廣泛調研和精心準備，總計開設12個試驗項目。實驗設置具有以下特點：一是專業學習和地區經濟有機結合，實驗選題主要以現有西南地區生物工程產業為主，結合專業學習中生物中游（發酵）和生物下游（分離）技術。例如“氣體提升式反應器培養植物細胞”“廢水生物處理及參數測定”“大豆異黃酮的超聲提取分離純化實驗”等；二是基本實驗技能和中試應用有機結合，即實現了學生在走向行業一線之前的大練兵，又增進其生產意識。例如“采用機械攪拌罐培養大腸桿菌”“發酵液的預處理及與濾餅質量比阻的測定”“酶制劑的鹽析沉淀及酶活力的測定”“亞硫酸鹽法測容積氧傳遞系數”等。“綜合實驗”內容全面、領域范圍廣，食品和環境都包涵在內，但也過于龐雜，學生做完實驗后沒有一個完整產品的生產過程概念，并且和生物化學實驗有部分重復，如鹽析沉淀和凝膠過濾實驗。經過多年的教學總結，我們對專業綜合實驗不內涵式發展建設生物工程專業綜合實驗教學模式張麗杰（重慶理工大學藥學與生物工程學院重慶400054）斷調整和改進，刪減和生化實驗重復的部分，并把獨立的實驗整合成完整的生物技術綜合實驗，如下游分離實驗，學生學習從酵母菌經過細胞破碎、過濾、脫除雜離子和蛋白質，最終結晶得到海藻糖晶體技術，使學生對整個下游生物技術過程有了整體把握，并在做實驗的同時有機地應用其他學科所學理論。
2影響生物工程綜合實驗發展的瓶頸
2.1實驗內容過于單一，學生選擇的余地小
目前的綜合實驗主要集中在微生物的發酵、從酵母菌中提取純化海藻糖，只是涉足生物技術領域中比較小的領域，不利于學生的就業。生物技術領域包括的范圍很廣，如生物制藥、環境生物技術、食品、保健品、化妝品等，學生如果能夠結合西南地區經濟選擇課題進行嘗試創新實驗，對他們創造力的開發和專業認知都會有所幫助，還有助于擴大就業面。
2.2實驗教學模式單一，制約著學生創造性的發揮
目前生物工程專業綜合實驗還是按照老師準備實驗藥品、老師講解實驗內容、學生按照講義步驟做實驗、學生書寫實驗報告、老師批改實驗報告的模式進行。學生沒有自己的想法，完全按照老師的思路完成任務，出現問題不會思考，這對于本科教學是個致命的硬傷，學生的積極主動性及創造性完全被制約[4-6]。由于學生沒有參與到試劑的配制、設備的選型和實驗方案的制定，對生物技術的操作要領沒有真正的掌握，如不明白試劑配制的精準會直接影響實驗的結果，而在大學里缺失的一課在社會上可能會以慘痛的代價來彌補。在這種教學關系中，學生就像張著嘴等著喂吃的孩子，而老師就是給他們準備好飯菜的保姆，讓人實在不敢想其后果。
2.3實踐課各自一體，不能滿足培養專業工程人才的培養目的
我校生物工程專業的實踐課程的設置滿足了本科教學要求，但實踐課中的課程設計、生產實習、專業綜合實驗及畢業論文（設計）各成一體，使學生不能系統的掌握專業技能，無法把理論知識應用到實踐中，造成了教學資源與時間的浪費。2.4實驗內容的系統性還有待于加強生物工程專業綜合實驗目前只有下游技術進行了系統化，和上游及中游還沒有完全整合。培養學生成為工程技術人才，對生物技術上游、中游和下游的完整理解和掌握是必不可少的，每個環節對生物技術開發和研究都非常重要，學生只有全面掌握才能靈活應用到實踐中，并且增大就業面和就業機會。
3實驗教學改革發展的方向
改革生物工程專業綜合實驗的教學模式，使學生能夠由被動的接受老師灌輸知識到主動積極參與實驗，鼓勵實驗創新，增強動手動腦能力，培育畢業生成為真正適應社會發展的創新型人才。
3.1改革單一教學模式，鼓勵學生自主創新能力
綜合實驗創新模式示意圖由圖1可知，改革后的綜合實驗以加強基礎、拓寬專業口徑、圍繞區域經濟，培養創新精神和實踐能力，提高教學質量為原則，教師與學生采用平等討論、切磋交流、協同合作的方式，形成以學生為中心的教學氛圍。老師負責課題遴選[7-9]，結合西南區域的生物工程優勢和特色經濟建立課題庫。隨著時間推移和社會發展，課題庫可不斷更新升級，確保綜合實驗的持續性、開放性和區域特性。而且，選題還充分兼顧了生物上游、中游及下游技術的完備知識體系，確保學生在增強能力的同時也為就業打下基礎，更好地為地區經濟服務。實驗開展采用分組模式，兼顧學生獨立思考和團隊協作的能力鍛煉，充分發揮主觀能動性的同時也培養了團隊合作意識，最終提升學生的綜合能力。
3.2以創業為導向，將專業綜合實驗和課程設計、生產實習及畢業設計有機結合面對越發嚴峻的就業形勢，為體現大學教育服務社會的價值，需要書本知識和社會發展有機結合。生物工程專業涉及到生物領域的方方面面[10-12]，學生在大三掌握專業基礎課及基本實驗技能后，有意識地培養學生的創業思想。以《綜合實驗》為紐帶，串聯課程設計（第六學期）、生產實習（第六學期末）和畢業設計（第八學期），圍繞區域特色課題進行全面系統研究。學生在掌握課程設計理論后到工廠企業進行參觀實習，補充設計經驗，然后選擇課題進行試驗（即生物工程專業綜合實驗），在畢業設計環節繼續對該課題展開深入研究，并完成論文。在綜合實驗中鼓勵學生敢于創新，即使是不成熟的想法也給予肯定和獎勵。對于不成熟但具有可行性的想法，集中師生智慧和集體力量給予突破。通過系列培育，促使學生基本完成具有可行性的創業規劃，其中包括最佳工藝路線的選擇（可在專業綜合實驗、生產實習及畢業設計中完成）、市場研究報告（可在生產實習中完成）、工廠設計（可在課程設計、生產實習及畢業設計中完成）等。在實踐過程中專業和實用的知識不斷積累沉淀，為今后服務社會打下堅實基礎。
3.3轉變傳統考核方式，制定以創新能力為核心的考核細則
改革后的專業綜合實驗將學生文獻查閱、實驗可行性分析報告、實驗前準備工作、動手操作能力、分析解決問題能力、創新能力、團隊合作精神等作為評分標準，而不單以實驗結果的好壞判定，使成績更能也可跟真實和全面地展示學生的反映學生的綜合水平和創新能力。
4實施教學改革的方法和手段
4.1合理安排教學培養計劃中的理論課和實踐課
生物工程專業綜合實驗由上游、中游和下游三部分構成，由于上游技術（菌種篩選和基因工程實驗）需要時間較長，可以在第五學期末分子生物學和基因工程等課程完成后安排一個2周的綜合實驗，讓學生掌握微生物培養、分子克隆、PCR等生物技術。其他理論課可以適當增加實驗課，有利于學生更好理解理論知識的同時，掌握單元操作技能，在綜合實驗時可以熟練利用基本實驗操作為課題服務。如生物分離工程增加實驗課程，使學生掌握過濾、細胞破碎、萃取、離子交換樹脂、膜過濾等單元操作；發酵工程可以增加使用發酵罐實驗課，讓學生熟練掌握如何發酵的技術，而不是只在綜合實驗中涉及一次。另外綜合實驗可以安排在第七學期前期，避免和學生考研沖刺時間沖突。第七學期的理論課不宜安排過多，否則學生精力不夠，弱化實驗效果。
4.2打造專業教師團隊，培育創新型人才
本專業教師要互相溝通，避免重復講授某一知識點或某一實驗技能，把課程設計、生產實習和專業綜合實驗、畢業設計結合起來，在兼顧教師科研項目的同時，以培育學生為目標，幫助其完成感興趣的課題或者引導學生整體把握項目的意義。
4.3加強橫向合作
與其他高校、工廠企業、科研機關建立實質合作關系，互惠互利地引進和共享資源。使學生能夠根據需要走出課堂，參觀學習實際生產工藝和技術設備，增加對本專業的認同感和學習動力。
5結束語
改革后的綜合實驗實現了四個轉變：由知識傳授為主轉變為知識與能力并重發展；以理論傳授為主轉變為理論與實驗并重；以硬件建設為主轉變為軟件硬件協同發展；校企分開培養轉變為校企合作培養。綜合實驗具有可持續性、開放性和區域特色，更能提高學生對本專業學習的興趣，在教學中培養創新氛圍，讓學生養成創新習慣和提高創新興趣。通過專業綜合實驗教學模式的改革，使學生由被動學習變成積極主動學習，在鞏固所學理論知識的同時，建立創新合作機制，真正做到學以致用，為學生走向社會、創業和繼續深造打下堅實的基礎，成為符合社會發展與具有全球競爭力的人才。
參考文獻
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[11]趙天濤,張麗杰.工科院校的綜合實驗教學改革與探討[J].中國教育教學雜志，2009.21(5):22346-22347.
篇3
關鍵詞：生物產業；發展戰略；研究
中圖分類號：X17 文獻標識碼：A當今世界，生物技術革命正在悄然興起。面對這一新的發展機遇， 2007年4月8日，國家發改委頒布了“生物產業發展“十一五”規劃”，從而吹響了我國向生物產業全面進軍的號角。
1 形勢與需求
1.1 全球生物產業的發展態勢
近十年來，全球生物產業的產值以每5年增加2倍的速度增長，很多國家生物產業增長速度超過30%，約是世界經濟平均增長率的10倍。美國能源部、農業部研究報告指出，到2020年美國10%的基本化工原料將取自農作物資源，2050年達到50%；生物服務市場以年均20-25%的速度快速增長，2005年全球委托合同研究達163億美元，占研發投入的24.7%。很多學者預測，生物產業規模必將超過信息產業，產業規模大約是信息產業的10倍，到2020年，全球生物產業產值預計將達到30000億美元，到2025年，人類社會將全面進入到生物經濟社會。
1.2 我國生物產業的發展趨勢
生物產業整體規模保持高速增長。2008年，我國生物醫藥實現產值8666億元，同比增長25．23％。2010年我國生物產業產值超過1.5萬億元，2011年我國生物產業產值接近2萬億。
國際化步伐加快。2008年，全國生物醫藥實現出貨值723．24億元，同比增長13．75％；醫療設備及器械制造業實現出貨值233．13億元，同比增長16．58％。我國生物企業繼中古、中德在生物領域合作步入良性軌道后，中英、中印、中加之間的研究機構和企業合作步伐也不斷加快。
自主創新能力不斷提升。藥物基因和蛋白篩選國家工程實驗室等10個國家工程實驗室啟動建設。農作物基因資源與基因改良國家重大科學工程項目建成運行。治療型乙肝疫苗、人工耳蝸等一批重大技術和產品研制取得重要進展。
2 優勢與不足
2.1 比較優勢
資源優勢。黑龍江省土地總面積45.4萬平方公里，人均耕地面積4.65畝，是全國人均耕地3.3倍。全省未利用地達9675萬畝，可利用后備耕地資源近2250萬畝，占全國可開發耕地的22.5％。全省共有高等植物2532種，年產各種農業秸稈5600萬噸，薪炭林900萬噸，林業廢棄枝椏、木材加工等剩余物至少4000萬噸，中藥材物種856種。糧食產量和商品量位居全國第一位。
技術優勢。我省哈獸研研制先后獲得各類科技成果254項，其中國家發明一等獎2項，二、三等獎各1項；國家科技進步一等獎1項，二等獎7項，50余項科研成果達到國際先進水平。哈藥集團生物工程有限公司在國內率先推出重組人干擾素a-2b等產品，處于國內領先水平。省農科院培育的高產優質大豆綏農14獲得國家科技進步二等獎。哈爾濱工業大學任南琪教授等在國際上首創了以厭氧活性污泥為產氫菌種的發酵法生物制氫技術，使國際生物制氫產業化目標至少提前了十年。
人才優勢。哈獸研沈榮顯院士是國內該領域唯一一位中國工程院院士。哈爾濱醫科大學楊寶峰教授是我省首位國家973 重大項目首席科學家。世界首例基因敲除豬的完成者賴良學博士、世界首例克隆騾子的主要完成人李光鵬、世界首例胚胎細胞克隆猴的完成者孟勵、世界首例體細胞克隆大鼠完成者周琪、世界首例體細胞克隆雪貂的完成者李子義等人都是我省培養的杰出人才。
2.2 存在問題
原始創新較少。我省生物領域的原創技術，除生物疫苗外，其它的97％以上的藥品均為仿制品。產業規模偏小。2006年在全國生物制藥行業工業總產值的排位中，我省的位次在10名之外，除哈藥集團外沒有第二家企業能夠形成較強的產業優勢。研發投入偏低。全省101家生物高新技術企業的R&D支出為1.9億元，占整個產品銷售收入的比重僅為1.6%。而全球大型制藥公司研發投入占銷售額的比重在9%～18%之間，著名生物技術公司的研發投入占銷售額的比重則在20%以上。
3 戰略規劃
3.1 生物醫藥
重點開發生物基因治療類藥物、新一代頭孢菌素系列產品和具有獨特地域品質的中藥產品。到2020年，建立起完善的技術創新體系，具有較強的自主創新能力，成為我國重要的生物醫藥產業基地，銷售收入達到600億元。
3.2 生物農業
開發重要綠色農用生物產品6個,建立綠色農用生物產品生產基礎地5個，到2020年全省生物農用產品推廣面積達到5000萬畝。培育10-15個具有核心競爭力的大型種業（種畜、種禽、種苗）、綠色農用生物產品生產企業（集團）。
3.3 生物能源
建設燃料乙醇、生物柴油的中試基地，形成一批擁有自主知識產權的科技型生產企業。到2020年前，根據資源和市場情況,進一步進行生物柴油、燃料乙醇、生物質發電和供熱、生物質致密成型燃料和生物制氫的工業化建設，形成1-2個大型龍頭企業，建設成為全國領先且規模較大的生物能源基地。
4 政策建議
4.1 加強科技合作招商引企
引入國內大型企業集團，如中糧集團、深圳科新、天津泰達、華晨集團、亞泰集團等，利用其雄厚的資本或在生物產業多年積累的成功經驗迅速擴大我省生物產業規模；引入世界500強中的國外生物企業，如：美國輝瑞、強生、安進等公司，跟蹤國際生物產業前沿技術，拓展生物產業國際市場。
4.2 主動組織設計重大、重點項目
通過主動組織設計重大、重點項目，優化配置各部門科技資源，突出以企業為主體，加強“產學研”的結合，使企業真正成為投入主體、轉化主體和收益主體，促進科技型中小企業發展，使它們在不同發展階段都能得到政府資金的扶持，為我省經濟增長提供更多的增長點。
4.3 加強以俄羅斯為重點的國際科技合作
依托對俄羅斯、烏克蘭、哈薩克斯坦、白俄羅斯等國的地緣和人文優勢，重點積極開展同上述國家的國際科技合作。引進上述國家先進生物技術和產品，吸引這些國家的高層專家、學者來我省交流、講學，共同從事生物前沿技術的研發活動，為我省生物企業和引進企業提供強有力的技術支撐和保障。
4.4 建設生物產業技術創新服務平臺
以共享為核心，以整合、配置優勢資源為主線，在我省現有工程技術研究中心、重點實驗室、中試基地的基礎上，建設面向我省生物產業發展的技術創新服務平臺，為生物產業創新活動提供科技基礎設施和條件平臺，重點包括：功能基因平臺、植物新成份篩選鑒定平臺、轉基因動植物技術研究平臺、功能性微生物技術研究平臺和基因表達產物分析平臺。
參考文獻
[1]生物產業發展“十一五”規劃.國家發改委.
[2]黑龍江省國民經濟和社會發展第十一個五年規劃綱要
[3]《中國生物產業發展報告2006》.國家發展和改革委員會高技術產業司中國生物工程學會.2007.1
[4]李學勇.中國生物產業調研報告[M].中央文獻出版社.2004.8.
[5]《中國生物技術發展報告》.科技部農村與社會發展司中國生物技術發展中心.2003.6.
篇4
關鍵詞：基因工程；教學改革；人才培養；教學方法
中圖分類號：G642.41 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2016）15-0097-02
隨著科學技術特別是生物技術的迅猛發展，生命科學進入了以生物信息學、生物技術和基因工程等為標志的嶄新領域[1]。《基因工程概論》是一門以分子生物學、分子遺傳學等相關學科為基礎的專業基礎課程，這門課程是各高校生物技術、農學、園藝等專業的主干課程，如何在有限的教學時間內提高教學質量，培養學生的創新和實踐能力，最終達到提高學生專業素養和綜合競爭力的目標[2]。在該課程的教學過程中進行了各方面的教學探索工作，充分利用多媒體和各種網絡資源開展新型教學模式，并及時補充植物學生物技術領域最新研究進展，激發學生對于生命科學知識學習的興趣和熱情，緊跟生命學科發展前沿，達到提高教學質量的目的。
一、由淺入深，雙語教學
學生在學習基因工程相關概念和知識的同時，通過了解基因工程的發展歷史，特別是在基因工程發展過程中一些推動人類解開生命之謎的標志性事件和經典實驗，來更加充分地理解學習的內容，同時能夠激發學生的學習興趣，例如孟德爾是如何針對豌豆七對獨立表現型在其雜交子代中出現分離的現象展開詳細研究的，最終經過統計發現了基因分離與自由組合定律，開創了遺傳學和基因工程的先河，通過諸多生動的實例，使學生充分了解生物技術領域內基因工程的發展歷史，同時也讓學生深深感受到每項令人矚目的科研成就的背后，科研工作者需要付出超乎想象的艱辛與努力，才能夠推動科學技術的進步[3]。其次，在講授基因工程內容相關概念的時候，需要進行雙語教學，讓學生在學習的同時，接觸到一些專業詞匯，為其今后閱讀國外基因工程研究進展文獻報告和從事基因工程相關研究工作奠定理論基礎。
二、教學方法的設計
傳統教育教學方式往往是教師作為教育主體，按照課程設置和既定思維，將事先設置好的內容按部就班地講解給學生的被動學習模式。整個授課方式較為枯燥，限制了學生對于《基因工程概論》所學內容的想象力和趣味性，不利于學生自我科研探索精神和創新能力的培養。《基因工程原理》作為農學生物技術等相關專業的理論課，需要依據教學大綱，進行學生自主學習、教師輔助學生學習等形式的教學內容的設計。以學生作為課程的主體，教師作為主導去鼓勵和啟發學生思考、發現和解決問題，教師僅僅能把知識灌輸給學生，但并不能幫助學生完全接受和消化所學內容，授人以魚不如授人以漁，通過提問式教學和包括完成課程作業、課堂分組討論等反饋式教學方法，及時了解學生對于知識掌握的情況，幫助學生溫故而知新，并結合平時完成作業情況，從多個方面對于學生的成績進行綜合評價[4]。只有提高學生自主學習的積極性，才能使其真正領會相關知識，開闊思路，實現多學科內容的交叉[5]。要從學生學習實際需求出發，注重將每一個基因工程發展史上的重要技術的研究思路和實驗引入課堂，例如紅色熒光蛋白、綠色熒光蛋白的發現及其在現代基因工程研究過程中是如何與目的基因形成融合蛋白來進行基因定位等方面的研究的，以較為生動的例子讓學生切實感受到基因工程技術的魅力所在和其存在的重要性[6]。另外，在《基因工程原理》課程中的較為抽象的部分重點內容，如乳糖操縱子的作用原理，單純的通過依賴多媒體教學方式使得授課內容過于籠統，在結合多媒體的同時，這部分教學內容以板書的方式則更能讓學生準確地了解其作用機制。另外，通過實踐教學發現，在理論教學過程中，通過文字的演示適時配合一些簡短而生動的生物學動畫和影像資料，如酵母單雜交和雙雜交的基本原理、鏈式聚合酶反應、基因的轉錄和翻譯過程及噬菌體感染大腸桿菌等相關教學，通過動畫和影片使學生對于所學知識從抽象思維到直接具體化，引起其學習積極性，幫助其理解所學知識。
三、緊跟基因工程學科發展前沿
教材的內容僅僅是基本，但并不是全部。基因工程研究發展日新月異，課本上的基礎內容還停留在過去發展的某個階段，過去有些未能解析的生命作用機制之謎如今得以解答，生物新技術特別是二代測序技術等快速發展使得我們可以更加有效地進行生命科學研究[7]。因此積極追蹤基因工程學科發展前沿，對于激發學生學習興趣，促進學生理解理論知識及其未來可能從事的科研工作提供很大幫助。教師在完成教學工作的同時也開展大量科研工作，教師在教學活動中可以結合自身的科研實例，將自己的事例搬上講臺，例如在介紹載體構建章節相關內容中，可以結合自己在科研中是如何構建pCambia3301植物雙元表達載體、pGBKT7酵母表達載體和pMD18-T克隆載體的例子進行說明，再例如在實際的科研實驗中是如何進行農桿菌GV3101轉化等。通過介紹自己最新的科研進展和生命科學領域的研究熱點，結合引導學生到圖書館檢索并閱讀相關科研文獻和研究報告，例如在介紹基因表達與調控章節部分內容時，現代生物技術的發展到今天，利用標記型RNA干擾替代傳統常規RNA干擾的方法能夠有效地避免基因脫靶現象的發生，通過引入基因工程最新研究成果，一方面能夠豐富課程內容，活躍課堂氣氛，拓寬學生的知識面，成功地把學生從書本中引入到書本外，另一方面在介紹過程中極大程度上吸引了學生的注意力，引發學生對于所產生科學問題及其相應解決方法的思考。這種教學模式受到學生的廣泛關注，學生課下通過媒體與老師和其他同學就某些科學問題展開詳細討論，比如基因工程研究在農業、醫藥、食品和化工等領域的重要應用，轉基因技術對人類發展的重要作用，但其同時對環境和人類健康也存在潛在威脅[8]。在熱烈討論的過程中，老師通過讓學生從數據庫中查閱大量科研文獻特別是一些最新發表的外文研究報告來引導學生自主學習，解決其學習中存在的疑慮和困惑。除此之外，考慮到未來學生對于基因工程、生物技術方面相關實驗技術的需求，在適當的時候，教師可以利用自己現有的科研資源，創造條件讓學生積極參加自己的科學研究工作，讓學生能夠接觸到基因工程實驗中重要的科研儀器和生物制品，學生通過輔助老師使用這些儀器設備和生物制劑來完成一些較為基礎的科學實驗，從而提高自身動手能力，并能進一步加深其對《基因工程概論》課程相關理論知識的理解，做到讓學生真正地走出書本。
四、建立綜合評價制度，提高學生綜合素質
考核和教學評價是評定課程教學效果和教育質量最直接也是最有效的方法。在傳統教學評價體系中，學生單純依賴課后復習資料和教師授課課件進行死記硬背，最終往往很難準確評估學生對課程的綜合學習情況。為了更加科學、更加有效地衡量學生學習這門課程的水平，建立綜合評價體系，從多個角度去考察學生思考問題、解決問題和對知識融會貫通的能力，避免學生死記硬背，讓學生真正理解所學知識，例如說《基因工程概論》第三章內容限制性內切酶，讓學生明確限制性內切酶的定義同時，通過舉例和課堂練習、課堂討論等方式讓學生理解在基因工程和分子克隆實驗中如何構建限制性內切酶圖譜及其利用限制酶進行不同類型的載體構建。在評價體系建立過程中，課堂練習、課堂討論等靈活評價成績占總評成績30%，而期末考試成績占70%，且期末考試試題中主觀題和實例應用題的比重較大，概念題和簡答題等客觀題比重較低，綜合檢驗學生對基因工程相關知識的應用能力。《基因工程概論》是一門涉及生物技術等多個交叉學科的課程，要求學生掌握翔實的專業基礎知識和實踐技能。《基因工程概論》課程改革是一項需要不斷探索、調整和改革的重要工程，如何提高課程教學質量，提高學生學習的自主性和對知識掌握的靈活性，就需要教師針對課程改革內容進行深入思考，既要照顧課堂實際教學情況，同時又要著眼于未來，特別是在生物技術、基因工程技術飛速發展的今天，教師必須緊跟基因工程學科發展方向，結合自己的科學研究工作不斷更新教學內容，改革教學方法，采用先進的教學手段，提高學生的學習效率，培養具有扎實理論知識和良好科研素養的高級專業人才[9]。使得學生在競爭如此激烈的社會環境下能夠做好充分準備，以扎實的專業知識武裝自己，提高自我適應性和競爭力。
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2010年11月28日~12月3日，當美國人還沉浸在感恩節的溫馨氛圍之際，來自全球共60000余名影像及其他臨床科室醫師及物理、數學、生物工程等相關學科專家齊聚芝加哥邁考密展覽中心，參加第96屆北美放射學會年會（RSNA）。RSNA 2010共收到論文、海報等4200份，共有700多家醫療設備廠商參展。
2008年和2009年爆發的金融危機壓制了放射市場的許多潛在需求，不過在經歷了兩年的經濟低迷期后，隨著醫療機構獲得了越來越多資金，醫療設備廠商也迎來了產業需求的回升，2010年成為全球放射行業回暖的一年。
個性化醫療成大會主題
本次大會主題為Personalized Medicine: In Pursuit of Excellence（追求卓越的個性化醫療）。在大會開幕式上，RSNA 2010主席Hedvig Hricak博士表示：“雖然個性化醫療不是一個新概念，不過當前它仍處于口號階段。很多醫生一直在尋求個性化的醫療方式，但卻缺少掌握它的方法和手段。”
在本次大會上，Hedvig Hricak做了“腫瘤影像學：癌癥個性化治療的指引之手”的報告，詳細討論了影像學對個性化醫療發展的促進作用。她強調在未來十年，分子影像學、綜合診斷、生物學驅動的介入放射以及治療診斷學將大放異彩。
首次舉辦中國專場
在本屆放射學領域盛會上，中華放射學會舉辦了專場報告會“China Presents”（中國研究報告專場），這是RSNA首次推出以中國為主題的會議。
在中國研究報告專場上，中國科學院復雜系統與智能科學重點實驗室田捷研究員做了有關采用功能性磁振造影（fMRI）進行針刺機理研究的大會口頭報告《Acupuncture Research by MR Imaging》（磁共振成像在針刺機理研究中的應用），展現了古老的中醫和現代醫學影像技術的美妙結合。雖然以美國為代表的西方國家已經逐步接受并認可了針灸作為補充替代醫學治療手段，不過針刺機理研究的主導權還是由國外的研究團隊把持。在《Acupuncture Research by MR Imaging》的報告中，田捷研究員在對針刺機理研究進行系統性綜述的基礎上，不但對占針刺機理研究主導地位的理論提出了質疑，而且為困擾針刺機理研究領域的爭議性問題提供了初步解答，提出了一整套既符合中醫針刺自身特點又獲得國際研究領域普遍認可的研究框架、評價方法和規范化的體系。
此外，田捷研究員帶領團隊在RSNA 2010上用兩個教育展板展示了團隊在醫學影像領域的最新研究成果，它們分別是“Unified Reconstruction Framework for Multi-modal Medical Imaging”和“Automatic Segmentation of Liver Tissue and Vessels for Liver Surgery Planning”。這兩個教育展板介紹了基于團隊自行研發的醫學影像處理與分析開發包MITK所做的相關研究和應用。MITK研發的主要目的是為醫學影像處理領域提供一個一致的算法框架，以整合醫學影像重建、分割、可視化等各類算法。其中展板“Automatic Segmentation of Liver Tissue and Vessels for Liver Surgery Planning”介紹了田捷研究員帶領團隊基于MITK開發的針對肝外科手術的CT圖像中肝實質及血管分割方法，獲得了RSNA 2010大會頒發的優秀展頒獎。
2010年11月30日，中華醫學會放射學會成功主辦了“RSNA 2010中國之夜”。中國醫科大學附屬盛京醫院院長兼放射科主任、中華醫學會放射學分會主任委員郭啟勇教授，候任主任委員馮曉源教授，各位副主任委員以及GE醫療等公司的中國區負責人悉數出席，共吸引了與會專家、醫療設備廠商公司代表以及在美華人放射專家等400多人參與。郭啟勇院長在中國之夜做了致辭，他指出：“隨著中國經濟的發展，醫療需求的增加，中國醫療器械市場吸引了世界各地的廣泛關注。我國的醫療科技水平也不斷攀升發展，截止到目前RSNA共收錄了176篇中國放射學領域的論文。這代表著中國影像工作者在RSNA這個世界學術舞臺上的話語權不斷得到增加。”
值得一提的是，Hedving Hricak博士親自為以郭啟勇教授為首的中國放射學醫師授予了榮譽獎章。
iPad在放射科中的作用得到重視
在本屆北美放射學年會上，與會人員就iPad在放射科發展中的作用這一話題進行了熱烈討論。紐約東梅多區拿騷大學醫學中心Toshimasa Clark博士認為：“隨著遠程放射學的發展，隨時隨地在計算機終端采用3G數據服務進行讀片的概念值得進一步拓展，研究者們需要對iPad的潛力進行評估。”拿騷大學醫學中心研究者創造出了一個簡略的組件模型查看研究報告，然后他們評判了iPad在處理以下5個組件時的表現：顯示性能、網絡連接、DICOM可視化、報告生成、 RIS界面、數據安全。
“如果一名臨床醫生要求參與一項急診檢查的讀片工作，那么在3G無線數據網絡內的任何一名放射科醫生都可以很容易地使用iPad查看關鍵的檢查數據，核實、編輯甚至完成住院醫生的原始報告。”Toshimasa Clark介紹道。
介入放射學獲得重點討論
由于美國還沒有徹底從經濟衰退中走出來，因此很多美國人非常關注那些能夠幫助他們節省治療成本的醫療技術。其中，介入放射學正是為經濟衰退中預算緊縮和讓患者盡快康復所量身打造的醫學。為此，RSNA 2010設置了很多議題，討論影像引導下的介入治療技術，以便使介入手術更安全、便捷，比以往更經濟，同時縮短患者的住院時間，或者根本不需要讓患者住院就能使他們康復。推動介入放射學的規范化成為2010北美放射學會介入放射學相關科學報告和繼續教育課程的主題。
在2010年11月28日RSNA 2010的開幕式上，維也納大學放射科教授Christian Herold博士做了放射診斷學的年度演說，他演講的主題是評估和處理局灶性肺部病變的創新技術。來自德國慕尼黑的一個研究團隊在報告中指出，對于一些高度血管頭部和頸部腫瘤，Onyx膠栓塞比聚乙烯醇栓塞更加安全和有效。來自法國的研究人員發現，由于三維乳腺斷層合成一個完整的靶活檢目標，因此他們可以活檢病變甚至二維X線攝影看不到的病變。
影像領域最新技術展示
在本屆年會上，GE醫療、西門子等醫療廠商攜其新產品、新技術亮相，向全球放射界和醫學影像界展示自己。
1. GE醫療展示最新技術進展
在RSNA 2010上，GE醫療重點展示了多項旨在支持其健康創想戰略并在全球范圍內幫助改善辨認保健的技術。GE醫療重點展示了公司CT產品組合中最新的低劑量技術― 一種基于模型的被稱為Veo的迭代重建（MBIR）技術。Veo通過應用革命性的新建模技術，改變了CT影像的“規則”，降低了噪音，提高了分辨率，同時改善了低對比可檢測性和偽影抑制能力。
GE醫療集團還展示了一個高性能介入組合實驗室，它以更低的價格和總擁有成本提供出色的影像質量和業界最高級別的DQE探測器，可以幫助將介入手術的成本控制在中小型鄉村醫院可負擔的范圍內。
2. 西門子展示分子CT和分子MR復合成像解決方案
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成年心肌細胞也能再生
成年心肌細胞被J為是不能再生的細胞，而第三軍醫大學大坪醫院心血管內科主任曾春雨科研團隊，用實驗結果顛覆了這一傳統認知。該團隊心肌再生課題組王偉副教授等人歷時6年研究，直觀地顯示了成年心肌細胞不但具備再生能力，而且通過調控后，其子代細胞還具備收縮功能。相關論文近日在國際心血管領域頂尖期刊《循環》雜志在線發表。曾春雨介紹，這一研究揭示了成年心肌增殖的生物學特征和心肌內源性再生的重要途徑，為臨床促進心肌再生，治療心肌梗死和心力衰竭帶來曙光。
益生菌可緩解對蝦食物過敏
海鮮過敏，讓海鮮愛好者“苦不堪言”。近日，從浙江工商大學（下稱“浙商大”）傳來好消息，“浙商大”食品與生物工程學院教授傅玲琳帶領團隊研究發現，特定益生菌對蝦食物過敏具有緩解效果，相關的益生菌菌株也已獲批了國家發明專利。食物過敏是由一種叫“免疫球蛋白E”引起的異常的免疫反應。現代研究表明，益生菌可通過腸道調節自身系統免疫反應。這一項研究成果為全面了解和緩解對蝦食物過敏提供了支撐和借鑒。
泡菜中的乳酸菌可降低胃癌患病率
韓國圓光大學生命環境學院教授金玉振研究發現，泡菜中所含乳酸菌可抑制胃癌成因之一的幽門螺桿菌感染機率，進而降低胃癌患病率。幽門螺桿菌受到具有相應抗菌效果的乳酸菌阻擋，無法附著在胃粘膜上，因此降低了細菌感染的風險。此前，對于幽門螺桿菌的感染通常是采用抗生素療法。由此導致耐藥性細菌的增加以及對于新型藥劑的需要，也在醫療界引起了廣泛爭議。
結婚對男士體重影響：身高體重指數明顯上升
男人結婚后容易發胖？最近，英國科學家在《社會科學與醫學》雜志上研究報告稱，男性婚后的身高體重指數很可能會明顯上升。結果顯示：已婚男性比未婚男性的身高體重指數明顯高出不少，且很可能婚后才開始“發福”；孩子出生之后3年內男性也會明顯增重；而相比沒有孩子或孩子已成年的父親，家有低于19歲的孩子時，父親的身高體重指數也明顯更高；一個不那么令人愉快的發現是，離婚往往使人消瘦。
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一、轉基因食品生產現狀
自1983年轉基因煙草和馬鈴薯成功問世以來，美國農業部（USDA）和美國食品與藥物管理局（FDA）于1994年將第一個轉基因植物食品延熟保鮮轉基因番茄推向了市場化生產，轉基因農作物種植面積迅速擴大。美國批準商業花種植的轉基因農作物品種已有11種。目前至少有18個國家進行了轉基因作物的商業化生產，其中美國占全球的68%，阿根廷占全球的22%，加拿大占全球的6%，中國占全球的3%，這四個國家轉基因作物總占全球的99%。其中大豆玉米棉油菜4種轉基因作物占全球種植總面積的16%，而全球轉基因作物中大豆和玉米的種植面積占轉基因作物的總種植面積的82%，如加上棉花油菜比例增至99%。在這短短的十余年時間轉基因作物以及食品在市場很快占有一席之地，轉基因食品也很快進入了人們的日常生活。
二、為什么要生產轉基因食品
農業科學家利用DNA重組技術、細胞融合技術等基因工程技術基因導入農作物體內，獲得具有優良性狀的轉基因新品系，一是可以降低生產成本、提高農作物產量，減少環境污染；二是延長果蔬產品的保鮮期；三是改善食品的口味和品質。
三、轉基因技術的安全性分析
1.轉基因作物本身可能演變為農田雜草植物在獲得某種特定基因，可能會增強其生存競爭性，在生長勢、越冬性、耐受性、種子產量等方面強于非轉基因植物。若被推廣種植，釋放到自然環境中的機會特別大，將會迅速地成為新的優勢種群，進而演變成農田雜草。
2.基因漂流影響其他物種。轉基因作物中的一些抗除草劑、殺蟲劑和病毒的抗性基因通過花粉雜交等途徑向其同種或近緣野生種轉移，從而產生出一些可抗除草劑、殺蟲劑和病毒的所謂“超級雜草”，造成不可估量的農業損失和生態災難。另外，自然界存在植物病毒的重組現象，隨著抗病毒轉基因作物的大面積推廣有可能產生侵染力、致病力更強的“超級病毒”，從而造成更大的危害。
3.可能對非目標生物造成危害，影響生物的多樣性。植物在引入抗蟲或抗病基因后，往往具有較強的“選擇優勢”，大量的轉基因作物進入自然生態系統中，造成生物數量劇減，甚至會使原有物種滅絕。
四、轉基因食品安全性分析
1.毒性問題。關于轉基因食品的毒性問題，目前只有一些相關的實驗報道，尚無人體的研究報告。蘇格蘭Rowlett研究院的Pitsaw博士曾聲稱培育出了帶凝集素（Latin）基因的改良馬鈴薯，但是這種馬鈴薯能夠破壞老鼠的肝臟和免疫系統。
2.過敏反應問題。在自然條件下存在許多過敏源。在基因工程中如果將控制過敏源形成red種子公司把巴西堅果中的2S清蛋白基因轉入大豆，以使大豆的含硫氨基酸增加，結果對巴西果過敏的人就對轉基因大豆產生了過敏反應。
3.營養問題。一些研究人員認為，外來基因會以一種人們目前尚不甚了解的方式破壞食物中的營養成分，降低食品的營養價值，引起營養失衡。美國倫更毒性中心的實驗報告指出，與一般大豆相比，耐除草劑的轉基因大豆中，防癌的成分異黃酮減少了。
4.對抗生素的抵抗作用。抗生素抗性基因是目前轉基因植物食品中常用的標記基因。但抗生素標記基因對人體的健康是否會造成不利的影響，例如是否會水平轉移到腸道微生物或上皮細胞，從而降低抗生素在臨床治療中的有效性，一直受到人們的關注。
五、轉基因食品安全與否存在著很大的爭議
1.中國專家認為轉基因食品安全。中國科學家認為目前的轉基因還是相當安全的。消費者對轉基因食品安全性的擔憂，主要因為對轉基因知識了解得還不多，今天我們種植的絕大部分作物也不是“原生態”的野生種，而是經過千百年人工改造選育，即不斷轉移基因創造的新品種。國內外數億人口多年食用轉基因食品并未發現對身體健康產生損害；全球每年種植億萬公頃轉基因作物，沒有發現破壞生態環境，反而使環境得到了明顯改善。同傳統食品相比，有些轉基因食品甚至比非轉基因食品更安全，比如說非轉基因玉米，往往會因為蟲害而誘發產生赤霉菌毒素造成人和動物的感染，而轉基因抗蟲玉米則不會有這種情況發生。
2.轉基因食品在美國有爭議。美國是轉基因食品的發源地，轉基因技術水平在世界上處于領先地位，也是世界上轉基因作物種植面積最廣泛的國家。20世紀90年代以來，美國全力進行轉基因技術開發并促其商品化，轉基因食品以驚人的速度向全球擴散。星聯轉基因玉米是美國Aventis公司為用于喂養家畜和工業用途而開發的，并未經獲準作為供人用食品而銷售。但是2000年9月市場上卻發現一些廠家生產的供人食用的玉米餅等食品中含有這種轉基因成分。雖然公司和美國政府斥巨資迅速從市場上召回相關食品，但仍有幾十名消費者稱自己因食用了這種玉米薄餅而出現了起疹、腹瀉、嘔吐和發癢等癥狀。星聯事件使食品生產廠商蒙受了巨大的經濟損失，轉基因食品生產也被認為是充滿風險的產業。“星聯”事件使美國人對轉基因食品風險的認知產生了很大影響，并促使美國FDA考慮加強對其管制。2001年1月，FDA了“有關生物工程食品上市前通知的建議”，建議通過立法強制要求制造商在將轉基因食品投放市場之前120天通知FDA，并向公眾公布有關信息。雖然這一建議轉變為立法還有待進一步磋商，但是轉基因食品所體現出的影響巨大、難以控制、難以計量的現代社會的風險特征，必然會對現有的食品安全保護制度提出政策制定的新思路產生影響。
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[關鍵詞]西部中小企業；融資
沖圖分類號]F276.3 [文獻標識碼]A [文章編號]1009-9646(2009)06-0023-02
一、西部中小企業特點
1 西部地區國有中小企業數量少，生產效率偏低
我國《中小企業促進法》根據企業職工人數、銷售額、資產總額等指標，結合行業特點劃分中小企業。實踐中把職工人數少于300人的企業定義為中小企業。據《陜西日報》報道，2005年陜西省共有中小型企業lI萬戶，占全省工業企業總數的99.8％，工業總產值、銷售收入、實現利稅分別占全省工業企業總數的75％、50％和40％。但是與東部地區相比較來說，相差還是很懸殊。2005年最新公布的《東西部中小企業發展結構比較研究報告》中指出，在數量上東部地區占全國的64.2％，西部地區占全國的11.41％；而中小企業的工業總產值東部地區占全國的74.51％。西部僅占7.04％。這說明東部中小企業平均生產規模比較大，大約是中部地區的1.58％，西部地區的1.78倍。所以說西部地區產值比重要比西部中小企業數量更加低。反映出了西部地區中小企業生產規模有限，生產效率較低，企業經濟效力相對低的事實。
2 西部地區中小企業生產技術落后，企業成長緩慢
2005年12月公布的《2005年成長型中小企業發展報告》中明確指出，在最具有成長性的前500家企業中，東部地區共有389家，占77.80％，西部地區有49家，占9.80％，地區間的差距竟然高達1:0.13。并且，西部地區的服務業、教育產業所占的比重相對來說也較低，在電子通訊、生物工程等領域內知識型、科技型中小企業數量還是很有限，中小企業產業結構不合理，生產工藝流程、技術設備落后；技術管理人才匱乏、管理水平不高；缺乏勇于創新的能力；生產的產品檔次低、市場競爭能力有限。
3 西部地區中小企業擴大了勞動就業，增加了地方政府財政收入
據統計，我國中小企業提供了大約75％的城鎮就業崗位，安置了農村2～3億剩余勞動力。據調查表明：2005年，陜西省中小企業從業人員約145萬人，占全省工業企業職工總數的75％。近年來，在西部農業化經營的推進過程中，必然會出現大量農業剩余勞動力，在西部推進工業化的進程中，由于國企改革與調整，也會釋放出大量富余人員。因此，西部地區眾多的中小企業，恰恰可以吸收大量的就業人口，其中不乏有許多經驗豐富的技術人員，這樣既緩解西部地區越來越大的就業壓力，增加了地方政府的財政收入，又保持社會經濟的穩定、健康、和諧發展。
4 西部地區中小企業產業結構矛盾突出
西部中小企業產業結構上，大部分企業集中在建材、冶煉、采礦、采煤、建筑、運輸等行業，其比重占到80％以上，而在教育產業、電子通訊、生物工程、航空技術等高科技領域的知識型、科技型企業較少，再加上有一部分企業產業結構不合理，工藝設備落后，低水平的重復建設現象嚴重。企業產品結構上，西部中小企業的產品都是以初加工、粗加工為主，產品擁有高附加值、高科技、高市場占有率的名優產品不多。
5 典當融資――西部中小企業融資新渠道
典當，指當戶將其動產、財產權利作為當物質押或者將其房地產作為當物抵押給典當行，交付一定比例費用，取得當金，并在約定期限內支付當金利息、償還當金、贖回當物的行為。典當行的服務對象是以中小企業為主，對中小企業的融資支持不受地域的限制，典當行作為具有融資功能的特殊工商企業，門檻低、手續簡便而且典當行分布廣泛。據統計，截至2005年底，陜西省共有典當行54戶，注冊資本50096萬元，當年共發生典當業務7248筆，同比增長6.6％；典當總額50975.4萬元，同比增長170.7％；利稅總額963.2萬元，同比增長53.5％；實現凈利潤465.4萬元，同比增長35.6％；上交稅金497.8萬元，同比增長53.2％；在數量、規模、典當總額、經濟效益、經營設施和管理水平等方面都取得了較大提高。
二、西部中小企業融資現狀
1 西部地區中小企業自身積累不足
西部地區中小企業資金自我積累意識較差，一方面，是由于企業經營者自我壟斷意識太強，缺乏企業長期經營理念，在利潤分配上“只看眼前”；另一方面是折舊率過低，無法滿足企業設備更新和技術改造。我國長期以來在計算折舊時只考慮設備的有形損耗，而忽視其無形損耗，因此造成中小企業折舊資金較少，企業缺乏足夠的資金進行設備更新和技術改造。
2 銀行貸款依賴性強
目前我國中小企業，尤其是西部地區中小企業融資在很大程度上還是依賴于銀行貸款。而壟斷信貸資金高達80％的四大國有商業銀行卻將其發展戰略定位在“大行業、大企業”，對中小企業的貸款存在著許多限制，再加之因為風險的存在，西部中小企業接受擔保也比較難。抵押難以及企業本身所有制的影響，導致來自銀行貸款的數量也越來越有限。根據國家發展改革委員會對中小企業發展較好、信用擔保機構較多的地區調查。結果發現中小企業因無法落實擔保而被拒貸的比例為23.8％，再加上32.3％因不能落實抵押而被拒貸的，拒貸率達到了56.1％。可以想象，在中小企業發展狀況一般甚至較差、信用擔保機構較少的地方，拒貸率將會更高，中小企業的融資難狀況將更突出。
目前，西部國有政策性銀行和商業銀行把貸款的絕大部分都投向了國有企業。西部省區也沒有建立起有效的技術創新資金支持系統和信貸擔保體系，銀行擔心信用問題所引起風險，不愿將資金投給西部中小企業。人民銀行西安分行和成都分行提供的資料顯示，川、貴、云、藏、陜、甘、寧、青、新西部9省區，到2003年6月末金融機構的存差已擴大到3500多億元，大量資金從西部流向了東部，9個省區以中小企業為主的鄉鎮企業短期貸款僅占短期貸款總額的6.52％。
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【關鍵詞】 結核分枝桿菌 RD1區；PPE68/GST融合蛋白 表達
0引言
世界衛生組織的最新研究報告指出，由于艾滋病蔓延及結核桿菌耐藥菌株的產生，使結核病的流行日益盛行.結核病的快速準確診斷，是全球控制結核病的重要措施.Rv3873編碼的PPE68蛋白是結核分枝桿菌(MTB)PPE蛋白家族的一員，它可能與結核分枝桿菌抗原變異和逃避免疫機制有關，具有重要的免疫學意義，是一種免疫優勢抗原［1］.我們克隆表達并純化PPE68蛋白，以期待進一步研究其免疫特性，評價其是否可作為結核診斷試劑的候選蛋白.
1材料和方法
1．1材料
結核分支桿菌標準株H37Rv由四川省疾病預防控制中心結核病預防控制所提供；結核患者血清抗體由綿陽市疾病預防控制中心所提供;E.coli JM109，質粒pGEX4T1由本室保存. pfu DNA聚合酶， dNTP，核酸相對分子量標準DL2000，Marker VI均購于天為時代有限公司；限制性內切酶BamHI，EcoRI，蛋白質分子質量標準均購于晶美公司; T4 DNA連接酶購于上海生工生物工程有限公司;質粒微量抽提試劑盒、硝酸纖維膜素濾膜、DAB試劑盒購于西安寶信生物有限公司；膠回收試劑盒、EB（溴化乙錠），瓊脂糖、DAB試劑盒、溶菌酶、丙烯酰胺、NN亞甲基雙丙烯酰胺、SDS（十二烷基磺酸鈉），二硫蘇糖醇（DTT），異丙基βD硫代半乳糖苷（IPTG）均購自成都溶海生物科技有限公司；GST融合蛋白純化試劑盒購自上海杰美基因公司；辣根過氧化物酶標記羊抗人IgG購自北京中山生物技術有限公司.其余試劑均為國產或進口分裝分析純級產品.
1.2方法
基因組DNA提取參照文獻［2］的方法稍加修改后進行.根據GeneBank中Cole等［3］報道的結核桿菌H37Rv株Rv3873基因序列設計引物. 引物序列: P1: 5′ATA GGA TCC ATC ACC ATG CTG TGG CAC3′; P2: 5′TAT GAA TTC CAT TAC GGG AGC TCA CCA GT3′. 引物P1及P2的5′末端分別引入BamHI和EcoRI酶切位點(用下劃線表示).
上述引物由上海生工生物工程有限公司合成.Rv3873基因的PCR擴增以結核分支桿菌H37Rv基因組DNA為模板，反應條件為：94℃預變性5 min;94℃變性1 min;59℃復性1 min;72℃延伸2 min;72℃ 5 min共30個循環;72℃繼續延伸5 min.反應結束后取5UL擴增產物于8 g/L瓊脂糖凝膠中電泳檢測結果.將PCR產物及載體pGEX4T1用限制性內切酶BamHI和 EcoRI分別進行雙酶切后用膠回收試劑盒回收.用T4 DNA連接酶將回收后的目的片段與載體在16℃連接過夜.取連接反應物5 UL轉化感受態大腸桿菌（氯化鈣法制備［4］）JM109，取轉化菌液200 UL涂布于含氨芐青霉素（50 mg/L）的LB固體培養基上，37℃培養過夜.隨機挑取陽性轉化子培養并提取質粒DNA進行酶切及PCR鑒定.將鑒定含有目的基因的重組質粒保種菌液送至寶生物工程有限公司進行測序.挑取含有重組質粒的JM109單菌落37℃振搖培養過夜，以1∶100轉種于含有氨芐青霉素(50 mg/L)的LB液體培養基中，繼續振蕩培養至OD600為0.6時，加入IPTG至終濃度1 mmol／L，誘導表達4 h. 同時用JM109菌和含空載體pGEX4T1的JM109菌作對照. 取菌液1 mL離心，PBS洗滌3次后用PBS重懸菌體，加入溶菌酶（10 g/L）至終濃度為10 mg/L，室溫放置30 min，反復凍融，12 000 r/min離心5 min分別取上清和沉淀加入1×SDS上樣緩沖液，煮沸5 min后，進行SDSPAGE.大量誘導表達蛋白，方法同前，處理菌體分為上清和沉淀，每克沉淀重懸于2 mL含8 mol/L尿素的0.1 mol/L TrisCl (pH 8.5)中，室溫靜置30 min，離心，轉移上清，以透析法除去蛋白樣品中尿素，透析后的樣品于-20℃保存［4］.按照GST親和層析柱所提供的方法純化融合蛋白.將上述純化產物和JM109對照菌表達產物進行SDSPAGE后轉移至硝酸纖維素膜上，50 g/L脫脂奶粉4℃封閉過夜，加入結核患者血清（1∶100）， 37℃孵育過夜， TTBS洗滌3次， 加入辣根過氧化物酶標記的羊抗人IgG (1∶500)， 37℃孵育1 h， TTBS洗滌3次， DAB試劑顯色.
2結果
2.1重組質粒pGEX4T1Rv3873的鑒定
用PCR方法以MTBH37Rv基因組DNA為模板進行擴增，經8 g/L瓊脂糖凝膠電泳后，得到約為1125 bp的DNA條帶，與預計目的基因片段大小相符，而空白對照未擴增出條帶（圖1）分別用EcoRI和BamHI對重組質粒pGEX4T1Rv3873進行單酶切，均見一約3775 bp片段，比空質粒雙酶切約大1125 bp;用BamHI和EcoRI對重組質粒pGEX4T1Rv3873進行雙酶切，見與空質粒和PCR產物等大約4900 bp和1125 bp兩個片段；對酶切正確的重組質粒進行PCR擴增鑒定，擴增出約為1125 bp的目的片段（圖2）.重組質粒經測序，結果顯示，重組質粒所含目的基因片段與GenBank中報道的結核分支桿菌H37Rv株Rv3873基因序列同源性為100%，表明pGEX4T1Rv3873重組質粒構建成功.
2.2融合蛋白表達和純化含重組表達
質粒pGEX4T1Rv3873的E.coli JM109經IPTG誘導后，能夠表達1條約為Mr 63 000的融合蛋白條帶，其中PPE68約為Mr 37 330， GST約為Mr 27 000，凝膠掃描分析融合蛋白占菌體總蛋白的40％.該蛋白存在于裂解菌體的沉淀中，說明該蛋白主要以不可溶的包涵體形式表達.空菌和空載體組未見此蛋白條帶.純化后的蛋白經薄層掃描分析融合蛋白純度可達85%以上（圖3）.純化蛋白在約Mr 63 000處出現明顯雜交信號，而JM109對照菌在該處未出現雜交信號（圖4）.
3討論
找到結核分支桿菌的特異性抗原，對于結核病的診斷及開發新疫苗均具有重要意義.RD1區是BCG減毒傳代過程中最先缺失的一段區域，它與結核分枝桿菌毒力相關，因為該區基因所編碼的蛋白能被宿主免疫系統高度識別，目前大家對結核分枝桿菌診斷試劑的研究主要集中在RD1區，RD1區一共編碼9個蛋白，PPE68是由位于該區的Rv3873所編碼［5］.研究表明PPE68能夠被T淋巴細胞所識別，激發出強烈的細胞免疫，刺激小鼠脾淋巴細胞增殖，誘導大量IFNγ產生，可以認為PPE68是除esat6和cfp10以外的第3種重要的免疫優勢抗原.由于編碼Rv3873，cfp10，esat6的3個基因相鄰， 有學者稱， 這3個基因形成的基因簇在結核分枝桿菌中編碼了的一個新的傳輸系統，這個新的功能單位與宿主免疫系統間有著緊密的聯系，這種功能單位不僅僅存在于RD1區，同時也存在于其他跟PPE蛋白家族相毗鄰的類esat6和cfp10蛋白的基因簇［6］.
我們通過設計MTB Rv3873特異性引物，用PCR方法從MTBH37RvDNA庫中擴增出目的基因Rv3873，序列測定與Genbank完全一致.為使融合基因得到高效及穩定的表達以及考慮到純化工作，我們選擇了pGEX4T1作為表達GST融合蛋白的原核高效表達載體，它帶有強的tac啟動子，構建的表達載體中，SD序列下游是GST基因，目的基因接在GST下游，因此表達產物為帶有GST的融合蛋白即PPE68／GST.這種表達系統可以克服轉錄和轉錄后水平對外源基因表達可能帶來的不利影響，表達的PPE68／GST融合蛋白便于通過GST親和層析純化，從而獲得了純化的PPE68，用結核患者血清進行Western Blot試驗，證實所獲得的融合蛋白PPE68/GST可以與患者血清發生反應，提示PPE68可作為結核病診斷用特異性抗原，為進一步研究它在血清診斷中的作用奠定了基礎.
參考文獻
［1］Voskuil MI，Schnappinger D， Rutherford R，et al. Regulation of the mycobacterium tuberculosis［J］. Tuberculosis，2004，84:256-262.
［2］Whipple DL，leFebver RB，Andrews RE Jr，et al.Isolation and analysis of restriction endonucleas disgestive patterns of chromosomal DNA from mycobacterium paratuberculosis and other mycobacterium species［J］.J Clin Microbiol，1987，25:1511-1515.
［3］Cole ST，Brosch R，Parkhill J，et al.Deciphering the biology of Mycobacterium tuberculosis from the complete genome sequence［J］.Nature，1998，393:537-544.
［4］黃培堂，王嘉璽，朱厚礎，等譯.分子克隆實驗指南［M］. 3版.北京:科學出版社，2002:96-99，1256-1259.
篇10
“人造骨”整形正當紅
2000年初，美國加州大學的一個研究小組率先把“人造骨”移植體推向市場。這種形狀類似絕緣小導管的移植體由聚四氟乙烯制成，與人體的親和力比較強。人體自身的細胞和組織可以在中空的開口內生長，管狀植入體既有利于固定，除去也非常容易，具有實心植入體所沒有的優點；即使移植后效果不夠理想，一個小手術就可以把它取出來，所以非常適用于那些對造型美感要求嚴格的各種面部整形手術。
“人造骨”可插入面部、鼻部或頸部皮膚下的軟組織內，在臨床運用中取得了較好的效果。研究報告表明：“人造骨”使人們的皮膚更加飽滿，皺紋消失了，看上去充滿生機。
目前，最常用的人工骨骼由氫磷化合物制作，它的化學分子式與骨骼一樣，但卻不像真骨骼那樣具有多孔結構，在結實程度上也比不上真骨骼，植入最長壽命僅為10年。"骨骼中毛孔的作用十分重要，" 美國CCACS研究中心主任斯喬文博士解釋說，"它們是血液流動的通道，而且可有效降低骨骼重量并增大骨骼強度。同時，毛孔也提供了一種長期植入人造骨骼可借鑒的方法：如果真骨骼能在植入的人工骨骼的毛孔中生長，那就大功告成了--兩者自然地結合在一起，不會再出現連接處損壞的現象。"
于是在今年，世界各國先后公布了一系列新型元素，逐步升級了“人造骨”及其移植技術。
“骨”世界六大新鮮元素
第一元素：生物降解泡沫骨架
最近，多倫多大學的生物醫學專家約翰?戴維斯和他的同事利用經過改造的生物降解泡沫材料，成功地研制出了微孔人造骨。
首先，他們用生物降解泡沫材料為病人按照需修補部位做了一個骨架模型，模型上布滿了無數個與人體軟骨組織類似的微孔，然后在微孔中植入骨骼生長細胞。這種人造骨骼模型一旦被植入人體，其中的骨骼生長細胞可按骨架方向生長并形成新骨，從而達到修補骨骼的目的。
第二元素：計算機訂制“陶瓷骨”
日本大阪OSU公司與大阪產業大學合作，開發出一種多層多孔結構的金屬陶瓷材料。這種材料實際上是高溫燒結的多層多孔碳化鈦，其多孔結構的空隙率為50 ％，比重比最輕的金屬鎂還要輕。研究人員認為，這種多層多孔的碳化鈦是人造骨骼的最好材料。
用陶瓷制造骨骼是依靠X線來確定骨骼尺寸和形狀的，精確度可達到0.1毫米。然后再將要替換的骨骼形狀輸入計算機，計算機根據骨骼形狀將其分割為幾部分，再自動制作出所需骨骼，之后還會在骨骼上鉆一些小孔，這樣便于手術醫生將新骨骼與病人的舊骨骼連接起來。通過計算機系統為患者專門訂做的“陶瓷骨”，完全適合面部整形患者的個性需要。另外，由于這種人造骨骼所用的材料與人體骨骼非常相似，因而會讓植入者感到更加舒適。
第三元素：磷酸鈣骨膠原復合骨
Cerasorb是德國curasan公司自行研制的人造骨骼再生材料，它由骨骼的基本成分――鈣和磷酸鹽組成，具有良好的生物兼容性，在很多美容整形手術中，使用這種材料可以維持空間、形成骨架，它的沉淀礦物質還可以促進骨質生長，并且在新的骨質形成時被完全吸收，沒有疾病的污染，不會刺激植入部位發炎，減少了手術的危險和患者的疼痛。
日前，日本物質和材料研究機構公布了Cerasorb的升級版人造骨骼，它由磷酸鈣和有機成分骨膠原組成，其強度與彈性均接近于真正的骨骼。把它移植到缺損部位，破骨細胞能把人造骨骼吸收，而骨芽細胞能在其周圍生長出新的骨骼。在狗身上做的實驗表明，大約3個月就可以再生出新的骨骼來。不過這一科研成果目前還處在動物實驗階段，尚需進行實用化研究開發，才能達到臨床應用水平。
第四元素：骨髓細胞體外再生骨
日本奈良縣立醫科大學教授高倉義典使用骨髓細胞在體外再生骨骼獲得成功。
在移植手術實驗中，科學家先從患者骨盆的髂骨中抽出骨髓液，再提取其中的間葉干細胞培養兩周，然后把它涂抹在陶瓷制人工關節的表面，在激素等的誘導下成長為成骨細胞，并吸收鈣質。培養大約一個月，人工關節便被再生骨骼所覆蓋。對需做四肢關節整形的移植手術而言，使用它不會發生排異癥狀，兩名女性患者術前行走困難，但目前已可在室內自由活動。
第五元素：羥基磷灰石等離子噴涂骨
2003年，我國科學家研制出一種嶄新的人造骨骼制備方法――羥基磷灰石等離子噴涂法。它是在已有的金屬鈦復合材料表面，用高溫等離子火焰噴涂上一層幾十微米厚的羥基磷灰石，它既保持了金屬鈦材料的強度和韌性，也保持了羥基磷灰石的生物活性。這種涂層克服了一般簡單植入再生骨所帶來的生物機體排異性，實現了良好的生物兼容性，能夠很好地為成骨細胞所接受。
第六元素：激光三維點鑄金屬鈦骨
