微生物知識培訓范文

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【關鍵詞】臨床微生物；標本不合格；原因分析 文章編號：1004-7484（2013）-12-7457-02

實驗室的工作目標是提供有效、及時、準確的檢驗信息，滿足臨床醫師對患者在疾病預防、診斷、治療方面的需求[1]。標本采集是臨床微生物檢驗工作的關鍵點。標本采集過程是否正確，直接影響檢驗結果的準確性[2]。如果標本采集不合格，將對檢驗結果的準確性大大降低。即使后續工作再精確，也難以消除在標本采集時引入的誤差。現將我院檢驗科自2010年3月――2013年3月間拒收的微生物不合格標本情況進行回顧性分析。

1資料與方法

1.1資料收集2010年3月――2013年3月間我院檢驗科拒收的721份臨床微生物標本

1.2方法將收集到的721例不合格臨床微生物標本統計分析，并組織臨床和檢驗人員對出現不合格微生物標本的原因進行分析，找出相應的干預對策、針對問題進行干預，并將三年間送檢標本質量進行對比分析。

2結果

2.1721份不合格標本中痰液占63%，尿液占19%，血液占10%，分泌物占6%，其他類型標本占2%。不合格標本類型分布情況，見表1。

3論論

3.1不合格微生物標本的原因分析①醫護人員對患者宣教不夠，患者隨意留取標本；②護工標本送檢過程中發生傾倒、外泄，致使標本污染或標本量嚴重不足；③臨床醫護人員無菌意識缺乏，采集標本時未無菌采集；④護士責任心缺乏，由于患者原因拒絕留取標本，未執行查對制度，也未告知臨床醫師和檢驗科醫師，直接將空盒送往檢驗科。

3.2對策加強臨床醫護人員對標本采集知識的學習與培訓。編寫標準操作文件，規范管理微生物標本的采集及處理，建立各環節的質量保證體系（涉及醫師、護士、患者等人員）。檢驗科應組織醫護人員（包括護工）對標本采集操作規范與標準操作流程進行學習，確保送檢微生物標本的采集質量，加強實驗室分析前的質量管理。醫護人員應加強對患者、陪護人員的健康宣教力度，增強患者合格留取微生物標本的意識，正確指導患者如何留取標本，把留取標本的方法、注意事項一一告知患者，必要時親自協助患者留取微生物檢驗標本。護士執行醫囑時應該仔細核對檢查項目，了解各項檢驗的注意事項，完善患者信息及確保準確的標本采集時間及采集部位等。檢驗標本采集后應立即送檢，有些微生物標本活性很弱，時間過長會導致標本中某些成分的降解或失活，使檢驗結果的準確性受到影響，從而影響臨床的分析與診斷。

3.3經過以上對策的干預，2010年微生物不合格率為16.1%，2011年為12.9%，2012年為8.1%，不合格率呈逐年下降趨勢。

綜上所述，臨床醫護人員及檢驗醫師應重視微生物檢驗前的質量控制，實驗室前的質量控制是得到準確檢驗結果的關鍵。加強臨床與檢驗的溝通以及微生物標本采集知識的培訓，確保細菌檢驗結果的準確性，提高細菌陽性檢出率，為臨床合理應用抗生素提供堅實依據。

參考文獻

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關鍵詞：臨床微生物檢驗；實習帶教；溝通能力；科研創新

臨床微生物學檢驗是一門將實驗室科學與臨床醫學相結合的學科，主要為感染性疾病的診斷和抗菌藥物的合理使用提供實驗室依據，臨床微生物檢驗工作者也在醫院內感染的監控和臨床細菌耐藥監測研究上取得了一定成效。但是，在各種抗菌藥物推陳出新的今天，感染性疾病的發病率和致死率仍然居高不下，且細菌耐藥率呈逐年上升的趨勢，降低細菌耐藥率已成為全球抗感染治療關注的熱點［1－2］，因而也對微生物檢驗工作者的專業能力提出了更高的要求。臨床實習是學校教育的延伸，改進臨床微生物實習帶教方法，以及不斷規范實習帶教體系，是提升畢業生專業能力的有力保障。近年來，本院檢驗科通過不斷的理論探索和實踐，較好地實現了既定人才培養目標，現將實習帶教的關鍵點總結如下。

1重視實驗室安全培訓是實習工作順利完成的基礎

臨床微生物實驗室是針對各種病原體檢測分析的特定場所，是病原體相對集中的地方，因此，做好生物安全防護是微生物檢驗工作順利開展的基礎。首先，利用崗前培訓對實習生進行生物安全培訓，主要通過多媒體教學的方式講授實驗室生物安全管理相關法規，重慶市的相關政策，《人間傳染的病原微生物名錄》應用，菌（毒）種及標本的儲藏、轉運和管理等法律法規，并結合近年來發生的實驗室生物安全事件進行深入闡述，強調不恰當的實驗操作將給自己和社會帶來的危害，初步樹立“有菌操作，無菌觀念”的意識；其次介紹實驗室的概況及日常工作流程，并對實習生進行滅火器、消防栓等消防用具如何使用的培訓，熟知消防安全應急處理預案和科室的緊急逃生通道；最后，通過模擬日常工作可能出現的實驗室突發事件深入闡述個人防護和消防安全的重要性，使人人掌握意外事故應急處置流程。完成培訓后，每位實習生必須通過考核方可進入微生物實驗室學習。

2加深實習生臨床實踐的參與度，提升專業知識水平

靈活應用對分課堂的方式，加深實習生對理論知識的理解和提升實踐操作能力。對分課堂是由美國普林斯頓大學博士、復旦大學心理學教授張學新創立的一種教學方式；把課堂時間一分為二，一半交由教師講授，一半留給實習生進行討論，實質上在講授和討論之間引入一個心理學的內化環節，讓實習生對講授的內容吸收之后有準備地參與討論［3］。盡管臨床實習不能完全實現學校一樣的固定課堂時間，但是依然可以通過小講座及疑難病例討論的方式強化學員對專業知識的理解和應用，不必拘泥形式、地點，利用有限的時間及資源完成教學任務［4］。臨床微生物待測標本完成檢測涉及多個崗位環節，包括標本核收、涂片、接種、分離培養、藥敏鑒定等，每個環節嚴格遵照相應的操作規程才能保障結果的準確性。帶教教師在示教過程中講授實驗操作的規范流程及相關的原理，實習生在規定的時間內開始獨自練習或者組隊練習，然后帶教教師根據講授的內容設計實踐操作題目，實習生完成標本檢測及報告分析。實驗的結果不由教師判斷，而是由參與實驗操作的全部人員構成評價小組對整個操作流程進行評價，相互指出操作中的不足及提出改進措施。最后教師根據評價小組的結論，強調實驗中每個環節的關鍵控制點，并指出實習生在實驗操作中出現的共性錯誤、出錯后的補救措施等，以實習生掌握知識的實際水平為主導，不斷調整實習帶教的側重點。具體帶教流程見圖1。微生物實習期一般為8周，但對于某些細菌的學習極可能在實習期內無法獲取相應標本，導致實習生對某些少見菌及苛氧菌缺少直觀認識。幾乎每家醫院的微生物實驗室經過多年的積累都存有種類繁多的細菌，帶教教師可通過細菌庫目錄挑選出需要教學的細菌，并且指導實習生自己動手建立教學細菌庫。在每年實習生進入微生物實驗室實習前，首先由帶教教師根據教學要求挑選出此實習階段較少出現的菌株混入各種類型的標本中，然后由進入微生物實驗室實習的實習生對這些標本進行培養鑒定，在培養過程中觀察細菌菌落形態的變化，根據各種生化反應特點確定細菌的種類，分析細菌的耐藥特點，引導實習生復習理論知識；最后由實習生將這些有意義的細菌存放到實習細菌庫里，并詳細記錄這些細菌的屬性，方便接下來進入微生物實驗室實習的另一批實習生學習。細菌經過不斷傳代培養，其菌落形態和耐藥水平都可能出現變化，根據前一批實習生的記錄，發現細菌經過傳代后發生的變化并展開討論，可使實習生們加深對理論知識的理解和提出啟發性問題，同時也提升了實習生們的團隊合作意識［5］。臨床微生物學檢驗的最終目的就是為臨床診斷和感染性疾病的治療提供病原學依據，以制訂科學的用藥方案，這就要求微生物實驗室必須加強與臨床溝通。因此，在帶教過程中，非常重視臨床溝通能力的培養。以1例尿路感染的患者為例，本院檢驗科報告其臨床尿液培養＞3種細菌生長，細菌量＞105CFU／mL，建議重新留取清潔中段尿送檢。帶教教師發現通過這樣的典型臨床病例設計，可以培養實習生解決臨床實際問題的能力。首先，實習生們需參考尿液標本的細菌學檢驗程序，分析在實驗前、實驗過程中可能存在的問題，然后向臨床科室咨詢患者留取標本的時間、方式及用藥情況等，指導臨床留取合格的標本送檢；結合患者的臨床癥狀及相關檢測結果，判斷結果報告是否妥當；判斷對臨床疾病的診斷是否具有指導意義，并建議臨床可以做哪些進一步檢查。實習生們通過類似典型病例的學習，不但掌握了各類標本培養鑒定的要點，也提高了實習生綜合分析問題的能力。

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關鍵詞：微生物學；雙語教學；教學模式；教學方法

中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2014）10-0100-02

微生物學是生物技術、生物科學等生物學專業學生必修的專業基礎課程，既是生命科學理論研究的核心，又是一門在生命科學中及其活躍、應用性極強的學科，在應用型人才培養課程體系中占據重要地位。

2001年教育部頒布《關于加強高等學校本科教學工作提高教學質量的若干意見》首次明確提出在高校生物技術等專業的本科教育階段開展雙語教學。2005年，在《關于進一步加強高等學校本科教學工作的若干意見》中提出要繼續增加雙語教學課程的數量。2007年，在《關于進一步深化本科教學改革，全面提高教學質量的若干意見》中再次強調要鼓勵高校開展雙語教學工作。作為一所農業高校，青島農業大學定位為以教學型為主、應用型為特色的省屬高校。2009年學校確定以生命科學學院作為本科雙語教學的試點學院，微生物學雙語課程是最早獲準開設的兩門雙語課程之一。筆者通過教學實踐，總結和分析了應用型高校開設雙語課程的必要性、雙語教學目前采用的教學模式和教學方法等內容，以促進雙語教學進一步的改革和發展。

一、應用型特色高校開展雙語教學的必要性

應用型特色高校開展雙語教學符合當前社會形勢發展的需要。首先，隨著改革的深入進行，國內與國際在經濟、貿易等領域的合作不斷增強，越來越多的中國企業走出國門，到國外投資開設分公司，同時從國外本土招聘人員加入到企業的各個職能部門，同一公司內部、不同國籍員工之間的工作交流越來越普遍，僅僅掌握公共英語已滿足不了現實的需求。其次，現代的企業已經不是一個單純的生產單位，很多都設有研發部門，甚至博士后流動站，通過對產品的產量、質量的不斷改進來增加產品的競爭力，通過閱讀國外期刊以便了解最新的生產技術和研究成果，這就需要有一定的專業外語背景。再次，微生物生產企業中很多的科研和生產設備為進口產品，操作人員為了要掌握這些設備的正確使用方法，完整和準確地閱讀外文說明書是必要的環節之一。因此，將雙語教學納入到應用型為主的高校教學體系中，可以增加學生學習外語的動力，提高在未來工作實踐中處理與外文有關的專業技術問題。

二、教學模式的選擇與實踐

國外常用的雙語教學模式有三種：浸入型雙語教學（immersion bilingual education）、保持性雙語教學（maintenance bilingual education）和過渡型雙語教學（transitional bilingual education）。這三種模式均有不少成功的案例，這與特定國家實際語言環境有密切關系。在我國，由于缺少語言環境的支持，雙語教學模式主要包括：全外型：即教材、講義和授課均使用外文；半外型：教材、講義使用外文，授課和板書以外文為主，對學生外語和專業知識水平要求較高。；混合型：教材、講義和板書主要使用外文，講授以漢語為主。

無論采取何種雙語教學模式，首先要綜合考慮學生的英語水平和接受能力。雙語教學要區別于專業外語教學和單純的外語教學，既不是成為純粹的專業外語課，也不能是單一的英語課。雙語教學的目的是以外語為手段，讓學生學習和掌握某一門專業課為目的，對專業技術知識的學習是放在首位的。雙語教學由于這些年高考大規模擴招，導致省屬高校生源的質量明顯下降，絕大多數二本院校的學生的共同特點是英語水平參差不齊，語法知識不扎實，聽說水平更差。在實際教學實踐中，我們采用混合型教學模式，根據學生的英文基礎，在授課過程中控制好中英文的比例。在雙語教學的前幾章，如緒論、原核微生物、真核微生物和病毒等章節的學習過程中，將多媒體幻燈片內容中英文比例大致為1：1，教師在講述過程中的中英文大致在6：4左右，并適當增加了圖片的比例，這樣一方面可以讓學生對微生物雙語教學有一個適應過程，另一方面學生增加對微生物基礎知識的學習，并激發學習本課程的主動性。在微生物營養和代謝、微生物的生長和控制、微生物遺傳和微生物生態這些章節的學習中，將幻燈片的中英文比例從7：3逐漸過渡到9：1，只是在一些主要的英文單詞的后面用中文進行標注，教師授課的中英文比例大致為1：1，對一些課外實例的講解用全中文，這可以在一定程度上調節課堂的學習氣氛。此外，教師課堂上盡量使用簡單易懂的英文對專業知識進行講解，對于教材中的重、難點的解釋不能拘泥于形式，比如對于每個章節的重、難點內容先用全部漢語將重、難點解釋清楚，保證學生對專業知識的完全理解，在此基礎上再用英語做簡要的闡述和總結。這樣既可以保障學生在真正掌握專業知識的同時，專業外語水平也得到一定程度的提高，達到雙語教學的目的。

三、教學方法及手段的選擇與實踐

1.課堂講授和網絡教學相結合。《微生物學》雙語教學與漢語教學的理論課課時均為40學時。雙語教學過程中重、難點基本上要用中、英文重復講解，在不減少教學互動環節的前提下，教學信息量大大降低。為了提高教學效率，教師針對下一次講課的主要內容事先提出幾個問題，學生針對問題課下預習中文教材，教師在課堂正式講解前要求同學回答之前布置的問題，針對學生的回答有針對性地對重、難點采取先中文后英文的講解，在一定程度上減輕了課堂教學任務的壓力。此外，在網絡教學平臺上上傳了多媒體課件、各章節的重、難點等知識要點、微生物題庫以及課外知識擴展內容，同時還在網絡教學平臺上增加了師生平臺互動模塊，學生在課下遇到問題可以在平臺上直接提問和留言，教師可以選擇在平臺上或者課堂上答疑。通過這些措施，教學效果得到明顯提升。

2.外文教材和中文教材相結合。國外引進的原版教材語言純正、印刷精美，可讀性強，但是系統性遠不如國內教材，并且語言難度遠遠超過二、三年級生的實際英語水平。此外，很多學生在學習微生物學的某些難點時，閱讀中文都很困難，更不用說直接閱讀外文了。中文教材知識體系清晰，整個編寫思路及難度也符合我國學生的認知規律。因此各有各的優缺點。在實踐中，我們要求學生借閱或購買一本中文教材，輔助雙語教學。教師將國內和國外教材的精華內容匯集整合在一起，發揮中西方教材的特點和優勢，并適當補充一定的實例和案例。通過這些手段使得學生既學習到國內教材中的先進理念和方法，又對國內教材內容有了深刻的了解。

3.將“大班上課”改為“分班上課”。學生英語水平參差不齊，專業基礎不理想。盡管在授課方法、授課模式上做了相應的改進，并取得了一定的實效。但是仍然存在學習靠后的同學“跟不上”，學習考前的同學“吃不飽”的現象。針對這種情況，我們準備采用變大班授課改為分班授課的教學方法。目前《微生物學》雙語課程有三位主講教師，可以先通過摸底調查，將學生分為快、中、慢三個檔次，然后分別由三位教師分別授課，根據學生英語水平調整中英文授課比例。

四、雙語教材的選擇和使用

好的教材是省屬高校成功實施雙語教學的關鍵因素之一。目前國內高校開設《微生物學》雙語課程采用的雙語教材主要有：《Brock Biology of Microorganisms》全球版（Madigan M等人編著，美國Pearson公司出版）、《Microbiology》影印版以及《Instant Notes in Microbiology》導讀版（Baker S等人編著，科學出版社出版）三種。綜合性大學普遍采用的是《Brock Biology of Microorganisms》，該書特點是內容全，信息量大，尤其適合于研究型大學本科雙語教學。其次是《Microbiology》影印版，書中有精美的圖片和豐富的素材，該書被教育部高等教育司推薦為“國外優秀生命科學教學用書”，特點是所涉獵的章節內容介紹比較詳細，但是醫學微生物學內容的介紹較多，并且價格比較昂貴。《Instant Notes in Microbiology》導讀版內容緊湊，相應章節前均有中文的重、難點介紹。在雙語教材選擇上，我們主要從國外教材與國內教材兼容性方面、教材知識點的廣度和專業外語所占比例幾個方面來確定雙語教材，基于以上因素考慮，青島農業大學生命科學學院微生物教研室最終決定選用《Instant Notes in Microbiology》導讀版（第三版）作為教材。這本教材內容新穎、圖表適宜，內容包括微生物世界（相當于緒論）、微生物的分類、微生物的細胞結構和功能、微生物的生長、微生物的代謝、微生物的遺傳、原核微生物、真核微生物、病毒和工業微生物等章節，與國內普遍采用的中文教材的內容體系兼容性好，便于學生對照學習。當然這一教材仍然有很多不足之處，如對于微生物遺傳、生態和應用這三部分涉獵內容較少。因此，在教學過程中，我們將有關微生物基因水平轉移、微生物生態、微生物應用的英文期刊綜述文獻以及國內教材中相關知識點上傳到學校內部網路教學平臺以彌補這方面內容介紹的不足。另外，在原核微生物章節中增加了衣原體、立克次氏體、霉形體和放線菌的介紹，在真核微生物中針對包括我國在內的東南亞各國對食用菌的偏好以及山東作為全國食用菌生產大省的現狀，增加了蕈菌（mushroom）的生活周期及食藥用菌的種類及特性的介紹。

五、配套的政策措施

1.加強師資隊伍建設，組織骨干教師進行外語培訓和進修。暑期有計劃的組織雙語課程主講教師參加英語培訓班，提高教師的口語表達能力。優先安排雙語教學主講教師到歐美國家培訓進修。

2.執行嚴格雙語教師試講制度，并對教師專業知識的理解程度和口語表達能力做出一定的要求。有歐美留學經歷的優先推薦擔任主講教師，訓練合格的雙語教學師資是開展雙語教學的保障。

3.建立有效的激勵機制，充分調動教師的積極性。計算教師工作量時，雙語課程工作量在普通課程工作量的基礎上再增加0.5個系數，有效地提高教師備課的積極性。

參考文獻：

[1]林靜.高校新型課堂教學模式的選擇及實現方法[J].中國大學教學，2011，（9）：74-77.

[2]婁道凱.我國高校開展雙語教學的困難與對策[J].延邊教育學院學報，2008，22（2）：16-20.

[3]張同利.加強高校雙語教學的探討[J].中國高教研究，2007，（5）：90-91.

[4]吳平.五年來的雙語教學研究綜述[J].中國大學教學，2007，（1）：37-45.

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民以食為天，食品與人民群眾的生活息息相關。近年來，食品安全事件頻發，從而引起公眾的不滿情緒，食品安全問題越來越引起各方面的關注，也成為現階段我國亟待解決的一大問題。為推測食品的安全性和衛生程度，我國把食品的微生物污染列為評價食品衛生質量指標。食品微生物檢驗成為保證食品安全重要防線，檢驗數據的準確可靠可以為疾病預防控制、衛生監督及采取相應措施提供科學依據。但是由于食品品種多，結構及成分復雜，給檢驗過程帶來難度，雖有國家標準方法的規定，但實際工作中還存在許多復雜因素，忽視這些因素，很可能給檢驗結果帶來偏差，本文對基層衛生單位影響食品微生物檢驗結果的因素進行了探討，以期更好地開展食品微生物檢驗，保障消費者的食品安全。

1　微生物檢驗專業人員

檢驗人員的專業技術素質直接影響檢驗結果的可靠性，因此微生物檢驗人員應具有較強的專業知識和技能，從人員結構上看，　多年來以中等或大專畢業生為主體的檢驗隊伍正逐步為本科畢業生所代替，　一些受過微生物專業訓練的研究生人才也陸續培養出來。但是還有一些基層衛生單位從事微生物檢驗的專業人員人數少，任務重，人員年齡結構老化，需要加強。微生物檢驗專業人員必須在思想上提高對檢驗質量的重視，　以檢驗結果的真實性、準確性作為第一要務。認識到微生物檢驗數據是質量控制的核心內容，　其中各個檢驗環節均應按要求嚴格執行，　建立全面、全程的檢驗質量控制體系。因此，　除要有強烈的事業心、高度的責任感外，　從事微生物檢驗的技術人員，　還必須經過廣泛的基礎教育和訓練，　包括微生物學、基礎醫學等知識的學習以及專業化的實驗技能培訓，　并經過考核合格后持證上崗[1]。安全是實驗室重中之重。要把實驗室的安全教育納入日常工作，并堅持經常化、制度化。經常對實驗人員及學生進行安全教育和安全技能訓練，如各類滅火器、消防栓的正確使用；各類化學品發生危險時的處理方法；避免細菌污染的措施等，使安全工作深入人心并落到實處，通過安全檢查消除事故隱患，確保實驗室日常工作安全進行。

基層衛生單位要創造條件，讓檢驗人員參加培訓和技術交流，豐富專業知識，提高檢驗水平，及時了解和掌握微生物檢驗領域的新技術、新的進展，并運用到實際工作中。微生物檢驗從方法學上看，　基本上是以手工為主，　主觀性強。在操作過程中每一個環節都可能出現變化，　因此，　操作人員的經驗、態度、操作熟練程度尤為重要。在按國家標準方法和規范操作的同時，　不斷探索更加先進的技術。在技術人員的管理上，　可采取培訓與考核嚴密結合的方法，　以隨時評估其檢驗能力和操作熟練程度，　必要時采取再培訓。此外，　微生物檢驗領域的全面質量管理和實驗室國內、國際標準化組織質量認證的概念正逐漸為檢驗界所理解和接受。基層衛生單位微生物實驗室在做好室內質控的同時，還應盡可能參加市級、省級、國家級等實驗室組織的的室間質評活動，盡力拓寬渠道，參與室間質評活動，以提高微生物檢驗人員的水平。

2　儀器設備

檢測儀器設備是微生物檢驗質量的根本保證，微生物實驗室應配備足夠檢驗工作需要的儀器設備和器材，建立起一整套規范化的儀器設備管理的檔案和操作程序，對每臺儀器的有關原始資料和技術資料建檔，并由專人負責保管，微生物實驗室的主要儀器及設備包括：微生物自動鑒定儀、微生物快速初篩儀、菌落計數器、高壓滅菌器、干熱滅菌器、離心機、蒸餾設備、培養箱、厭氧箱、水浴箱、普通冰箱、低溫冰箱、顯微鏡、超凈工作臺、酶標儀、PCR　儀、電泳儀、凝膠成像系統等。所有的儀器和設備均應按生產廠家提供的方法和有關規定正確使用。操作者必須嚴格遵守操作規程，做好記錄，并做好運行檢查及儀器維護。對于連續工作的儀器如冰箱、培養箱，每天都應進行溫度監控和記錄并定期維護，以保證儀器處于良好的工作狀態。需要強制性定期檢定的儀器和設備，應經計量鑒定部門檢定合格后方可使用。儀器設備量具的量程，精確度等，要符合檢測項目的相應要求。高壓蒸汽滅菌器須按規定定期檢測，發現隱患及時排除，到安全使用期后應及時報廢。對相應的新技術，新方法所需要的檢測設備要及時更新。但是還有一些基層衛生單位由于經費不足等原因，微生物檢驗的檢測設備陳舊老化，數量不足，亟待解決。

3　培養基與試劑

培養基質量要求的高低直接關系到微生物培養的成敗。購置新批號培養基和試劑時要求供應商提品質控證書等相關證件，　盡量選擇通過ISO　9001的生產廠家購買。培養基和試劑使用前首先通過外觀、批號、pH　值、滅菌要求、選擇性等進行初步評估，　按照培養基和試劑標簽說明的貯藏條件保存，　不同批號的培養基和試劑不要混合使用。應用已知標準菌株作質量鑒定，方可使用。培養基的配制要有記錄可查，　要按要求選擇合適的方法（如溫度和時間等）　進行滅菌，還應有高壓滅菌效果的監測記錄。高壓滅菌培養基應隨機抽樣5%～10%作無菌試驗；無菌分裝的培養基應在培養箱（36℃）過夜，無菌生長才能使用，培養基應放在適當溫度下保存。同時，　應根據檢驗微生物指標不同，　選擇不同的培養基，　如基礎培養基、選擇性培養基和生化反應培養基等。培養基應有明確標記與配制日期。液體培養基應清澈。含倒管者，倒管內應液體充盈，無氣泡；固體培養基應保持適當的硬度，接種前無菌落；不定期抽樣檢查ph　值，要求在規定的ph±0.2　內。有指示劑的培養基要保持應出現的顏色；需在有效期內使用，使用時觀察培養基是否變質。

生化反應試劑盒每個批號，　在正式用于出報告之前，　都要按說明書作一次專門測試以判別質量，　同一批號不同時間到貨也需要同樣測試。運送、儲存條件不同，　可能會影響質量。自配的染液每周必做質控。自配的染色液要求將整個配制過程形成記錄并保存。實驗室常購買商品化的染色液。在購買時應核對品牌、試劑名稱、批號、存放條件、失效期等；　初次使用必須用標準菌株作質量鑒定，　以證實其質量要求，如果有條件可參照國際食品微生物與食品衛生委員會（　ICFMH　）　提供的關于培養基質控方法進行質控[2]。危險化學品及菌種由專人負責保管，并建立嚴格的使用登記制度。

培養基和試劑的貯存應按照其說明的貯存條件來保存，試劑貯存時注意避光、冷藏，　以保證試劑的穩定性[3，4]　。試劑的儲存應遵守以下原則：　無機和有機試劑分別存放；　易燃、腐蝕性試劑應有明顯顏色標識并存放在安全處；　有毒試劑須上鎖；　腐蝕性試劑存放在視線以下。經常檢查貯存在冰箱中的各種血清，　若發現渾濁、出現絮狀，　立刻停止使用。放試劑的冰箱要及時清理，以保證足夠的空間。

4　檢驗標準和方法

《食品衛生檢驗方法微生物學部分GB4789―2010》頒布之后，我國的食品衛生微生物檢驗逐步走上了標準化的發展軌道。除此之外，我國還頒布有各類國家標準、行業標準及衛生行政部門頒布的檢驗方法等。微生物檢驗應嚴格遵從這些標準和規范，確保檢測數據準確可信[3-4]但是在實際工作中存在許多復雜因素影響食品微生物學檢驗，可能給檢驗結果帶來偏差甚至錯誤，因此必須對影響檢驗結果的諸多因素采取控制手段保證檢驗結果的正確性。隨著食品業對新技術的采用，食品中所含微生物的種類發生了變化，現用的檢驗標準和方法會對食品中微生物的某些種類造成漏檢。例如現用標準和檢驗方法培養的菌落只是好氣微生物或兼性好氣微生物的菌落，但這并不是食品中雜菌的總數，厭氧微生物在這種培養條件下漏檢；引起低溫冷凍儲存食品變質的主要是低溫菌，所以對冷藏食品和冷凍食品的培養溫度應降低，采用37℃的培養溫度會導致相當數量的低溫型微生物漏檢；食品在制造、加工、貯運等過程中，受到加熱、干燥、濃縮、冷藏或冷凍等理化處理，使細菌受到不同程度的損傷，損傷菌是活菌，但其后可以復原，在適當的條件下可以增殖，導致亞致死損傷菌漏檢。雖然有些細菌在37℃或有氧的條件下不發育增殖，但在它們發育增殖的儲存條件時已代謝出毒素，易引起食物中毒，種種漏檢因素，都會致使食品微生物污染數量與檢驗結果之間發生較大差異。微生物檢驗要注重上述方面的質控，同時還應關心分析標本采集、運送、處理和分析后數據處理、結果報告、聯系臨床等多個方面影響因素。因此，從事具體檢測工作時，應全面考慮，抓住重點，對食品衛生質量進行客觀評價。

5　環境設施

微生物檢驗對檢測場所的環境設施要求較高，各項設施和環境條件應既符合檢測技術規范的要求，　又能保障工作人員的健康和環境的安全，但是有的基層衛生單位微生物實驗室比較簡陋，簡單分為操作間和緩沖間，區域劃分不明確，這樣格局的實驗室顯然不適應醫學發展的要求，會影響到檢驗結果的正確性。必須對實驗室進行合理分區，　布置微生物實驗室時要不能影響檢測結果的可靠性、有效性和準確性，并按規范進行裝飾，　例如凈化實驗室應采用封閉過濾除菌，　通風方式、吊頂、隔墻、圍護全部采用彩鋼板，　地面作環氧樹脂自流平處理。微生物實驗室要設立凈化區、更衣區、非凈化區，要配備生物安全柜，對無菌室、超凈工作臺、生物安全柜必須進行定期監測和日常維護，　并有監測和維護記錄。日常維護包括紫外線燈擦拭、濾網擦洗更換、空氣消毒及全面清潔衛生等。實驗室的總體布局和各部位的安排要充分考慮減少潛在的對樣本的污染和對人員的危害，　做好工作人員的隔離防護工作，實驗中要強化無菌操作要領。微生物實驗室的無菌工作區域是檢測工作的基礎，該區域應當有明確的標識，并對進出、使用進行有效地控制，同時要做好記錄。定期對無菌工作區域進行監測，對廢棄的樣品和廢棄物應當制定專門的程序加以文件化。

綜上所述，　基層衛生單位微生物實驗室雖然在各方面有了長足的進展，但是由于歷史的原因，還有很多不足之處，建議在人口稀少和經濟欠發達地區，基層衛生單位實現資源共享，將有限的資金和人力集中在一個微生物實驗室，而不是分散到不同部門不同單位，建立一個基層衛生單位中心實驗室，最大限度地完善中心實驗室食品微生物檢驗的質量控制。這既是實驗的要求，也是對消費者、對企業負責的表現。

參考文獻：

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篇5

關鍵詞：標本； 微生物檢驗； 陽性率

引言：

微生物檢驗已經成為臨床各種感染性疾病的主要診斷和治療依據，微生物檢驗提供可靠有力的病原學證據，讓臨床工作在病因病原上找到疾病的診斷要點，從而進行更為合理有效的治療，提高患者的預后。因此提高微生物檢驗的陽性率，增強微生物檢驗的準確率成為了微生物檢驗的技術重點和關注熱點。本研究通過收集于2011年5月-2012年5月和2012年9月-2013年9月在我科進行微生物檢驗的臨床標本共2800例，分析比較兩個時間段檢驗陽性率的差異性，并針對可能導致差異性的原因進行分析，提出微生物檢驗中存在的問題，以期更好地服務于臨床診療工作。

1 材料和方法

1.1 材料及標本分類 收集于A組2011年5月-2012年5月和B組2012年9月

-2013年9月在我科進行微生物檢驗的臨床標本共2800例，其中A組1392例，B組1408例，各臨床標本類型和例數分布見表1。

1.2 檢驗方法 檢驗過程采用梅里埃ATB Expression細菌鑒定藥敏分析儀對所收

集標本進行統一的微生物標準化檢測操作，嚴格保障科學準確的檢驗質量。

1.3 數據分析 采用SPSS18.0統計軟件，采用X2檢驗進行兩個時間段陽性率差

異分析，P

2 結果

A組合B組標本的陽性率進行檢驗分析，其中B組呼吸道標本的陽性率低于

A組（P

3 討論

醫學微生物的檢驗技術不斷發展為自動化、微量微機化、分子生物化。隨著

微生物檢驗技術的創新，其準確性、可靠性、可重復性得到了提高，微生物的檢驗為臨床感染性疾病的診療提供了重要的依據 [1]。在臨床感染性疾病的診療中，微生物檢驗的結果起著主導性的關鍵作用。然而在現實微生物檢驗工作中，其檢驗結果并沒有完全滿足臨床工作的需要，如出現假陽性率和假陰性率時，對臨床工作不再是指導而是誤導，故微生物的檢驗工作需要更進一步完善和發展，爭取在技術不斷更新改進的同時，人員綜合素質同時增強，從而為臨床提供更可靠的保障。本研究收集于A組2011年5月-2012年5月和B組2012年9月-2013年9月在我科進行微生物檢驗的臨床標本共2800例，進行A組和B組的陽性率比較分析，結果顯示二者具有差異性。分析其原因可能與以下因素緊密相關。

3.1 采集微生物標本：在標本采集的過程中，由于采集涉及的環節眾多，具有較多潛在的污染因素而導致采集的標本不合格。此外患者的準備工作不準確不到位，如留取中段尿、大便培養等標本時，是患者本人進行標本的留取，若是醫護人員對留取過程和標本要求告知不足，患者留取的標本量不夠或取不到陽性標本進行檢驗[2]。醫護人員在進行標本的采集過程中一定要嚴格遵守標本采集的相關操作規定，部分采集工作強調無菌的操作環境。采集標本的最佳時機、最準確的采集方法、足夠的采集量、避免空氣或其他微生物的污染等對一份完整有質量的臨床標本起著關鍵作用。

3.2 運送保存微生物標本：微生物的運送和保存是微生物檢驗結果可靠準確的保障。在運送過程中維持生命活力、防止其他微生物的污染和干擾是主要原則。根據微生物的種類和檢驗的目的不同，有著不同的運送和保存方法，如厭氧菌的運送和保存有著自己獨特的方式，一是防止和空氣接觸導致厭氧菌失去活力，二是即刻送檢，防止兼性厭氧菌過度生長抑制目標厭氧菌的繁殖，從而降低陽性檢測率[3]。臨床檢驗針對不同的標本有著不同的規范和要求，相關的運送人員要積極學習相關知識，熟悉標本特性，接受專業運送的培訓，從而深入了解掌握各種微生物標本的保存和運送規范。

3.3 檢驗微生物標本：微生物的檢驗關鍵在于檢驗人員和檢驗技術設備。檢驗工作的紛繁復雜、臨床標本的多種多樣、微生物繁多的種類和特性要求檢驗人員具有扎實的檢驗專業知識、熟練相關的檢驗技術和設備、掌握微生物的基礎知識及熟悉各種微生物標本的特殊性和檢驗方法。此外需要檢驗人員具備手工操作、準確的判斷能力及定性試驗等綜合素質。加上臨床上每天大量的微生物檢驗標本要進行檢驗，檢驗人員更應該做到量多不雜、快而不亂。一位經驗豐富、學識扎實的檢驗人員能夠對檢驗結果產生直接的有利結果，相反則可能會對臨床工作造成誤導。因而培養專業文化素質高、臨床經驗豐富的檢驗人員具有重要意義。

綜上所述，微生物的檢驗在臨床有著廣泛的應用價值，其檢驗結果受多種臨床和個人因素的影響，因而在微生物檢驗的過程中培訓相關采集運送人員的專業能力，完善自動化和微機微量化的流程，加強檢驗員的專業素質和操作技術能力，為臨床提供更準確更有價值的檢驗結果依據，從而更科學有效地指導臨床診療。

參考文獻

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篇6

【關鍵詞】 藥學類專業;微生物學實驗;教學改革

Teaching content reform of microbiological experiment for pharmacy specialty in Chinese traditional medicinal university

TAN Zhoujin,SHEN Kejia,HU Jianzhong.

School of Preclinical Medicine, TCM University of Hunan, Hunan Changsha 410208, China

【Abstract】 According to the main problems in former microbiological experimental teaching, a study was conducted on the practical teaching content reforming for pharmacy specialty in Chinese traditional medicinal university. The useful microbiological experimental teaching body was designed and optimized for pharmacy specialty in Chinese traditional medicinal university. This study emphasizes the status and learning purpose of microbiological experiment, and gives prominence to the contents of microbiological experiment which are correlative with pharmacy specialty. The results could provide some referenced information in the teaching innovation of pharmacy specialty.

【Key words】Pharmacy specialty; Microbiological experiment;Teaching reform

微生物學是生命科學中至關重要的基礎學科,也是一門實踐性與應用性很強的學科[1],在藥學類專業中具有重要的地位。隨著微生物學的發展和深入研究,微生物學的分支學科也越來越多,按照微生物的應用領域來分有醫學微生物學、工業微生物學、農業微生物學、食品微生物學、石油微生物學、衛生微生物學、水微生物學、藥學微生物學、飼料微生物學、環境微生物學、免疫學等。微生物學實驗內容也非常豐富,它不僅是學習理解及掌握微生物學理論知識的重要途徑,這些基本技能也是學習分子生物學、現代生物技術、細胞工程等其他后繼課程實驗技術的基礎[2]。為了在有限的課時內開設合理的實驗內容,使學生真正掌握實驗技能,學以致用,根據專業特點,筆者對中醫藥院校藥學類專業的微生物學實驗內容改革提出了初步設想。

1 中醫藥院校藥學類微生物學實驗內容的不足

目前,中醫藥院校醫類專業的醫學微生物學與藥類專業的微生物學基本上都是由病原免疫學教研室一起來承擔教學任務,微生物學實驗內容在很大程度上就按照醫類專業的要求在進行安排[3]。實際上,醫類專業的醫學微生物學教學主要是讓學生熟悉病原有關的一些基本知識,他們以看病為主,工作后很少需要進行實踐操作,化驗也由專門的檢驗員完成,微生物學實驗也就多以簡單的示教性實驗為主。而藥學類專業的部分學生將在生物制藥工廠、藥品檢驗室等部門從事微生物學相關的工作,這就要求他們掌握微生物學的基本實驗技術,并且,藥學類專業分屬于理學或工學類專業,學生畢業之后大多以從事操作技能要求高的工作為主,要求學生的動手能力比較強,這就要求學校在每一門課的實驗安排時對學生的動手能力進行強化訓練[4]。目前,中醫藥院校藥學類專業的微生物學實驗內容中學生真正動手做的就是一個革蘭氏染色法、顯微鏡的使用、藥敏實驗、稀釋平板計數法(僅做稀釋和計數),其他可以說都是示教類實驗,這樣的實驗安排完全不符合藥學類專業的實踐教學要求,需要進行調整。

2 中醫藥院校藥學類微生物學實驗課教學內容體系建設思路

隨著我國高等教育改革的深入,針對目前高等教育發展大眾化、國際化、終身化等趨勢, 對高等教育理論教學和實踐教學也提出了更高的要求,重基礎、重實踐、重效率已成為人們的共識。如何將有限的資源發揮更大的效益?如何達到學歷教育與技能培訓一體化、基礎教育與應用教育一體化和學校教育與社會實踐一體化呢?

為適應新形勢新要求,原有專業基礎課和專業課學時都已相應減少,這就要求高等教育重效率。要求我們在教學過程中盡量合理安排教學內容,減少重復。實驗教學中,對于課堂上已經通過多媒體進行了展示的內容,我們就沒有必要再讓學生看一下實物,例如糖發酵實驗,我們在課堂上對于發酵的原理、現象及其應用已經進行過講解,就沒有必要讓大家再看一下試管里的現象,這是一種簡單的重復。由于原有專科院校、中專院校的升級,一些企業存在著新技能人才短缺,技術崗位招工難的現象,這就要求高等教育能夠具有技能培訓的功能。在實驗開設過程中,我們應該利用有限的資源、有限的時間,盡量多安排一些讓學生動手的內容,最好是實現人人能夠動手,達到培養學生動手能力的目的。為了做到學時減少而不減少實驗內容,能夠達到事半功倍的效果,對實驗課的一些教學內容進行合理的調整就很重要,例如,把顯微鏡使用和細菌的簡單染色及細菌的革蘭氏染色3個實驗合并為1個實驗,包括抗酸染色法也可以省去或者合并。另外,實驗安排過程中,我們也應該采取技能訓練、應用教育與社會實踐相結合的辦法,盡量提高教學效果與教學效率[5]。

因此,我們應該在中醫藥院校藥學類微生物學實驗課教學內容體系建設中做到:增加學生動手實驗,減少示教性實驗,實驗室內容與社會實踐應用相結合,一次實驗多種效果。

3 中醫藥院校藥學類微生物學實驗課教學內容改革的核心與目標

中醫藥院校藥學類微生物學實驗課教學內容改革的核心是根據微生物學實驗內容的總體結構,以微生物學基本技術為主線,合理利用教學學時與資源,重基礎,強調動手操作,體現實踐與應用,從驗證性實驗向設計性和綜合性實驗發展。同時,整個實驗教學過程中要重視培養學生對微生物學實驗課的興趣和動手能力[6]。盡管微生物學實驗所用的實驗設備不多,費用并不昂貴,實驗操作也不算復雜,我們應該力求學生的實驗操作和實驗結果今人滿意,以達到培養學生良好科學道德和態度的效果。我們在內容安排上應該做到:①實驗過程盡量讓學生將理論知識的學習與實驗技能的訓練相聯系,讓實驗課達到基本理論鞏固與實驗技能培訓相結合的效果;②選材時,能夠起到實驗課講解的過程中,充分調動學生進行主動思考,對實驗課產生興趣,而不是被動的接受。

中醫藥院校藥學類微生物學實驗課教學內容改革的目標是提高學生的動手能力和綜合素質。通過改革,使原來孤立的,不連續的實驗形成一個連續的整體,每次實驗都由若干個技術要點組成,學生有新鮮感,學生就會一絲不茍地做好每一步實驗,掌握微生物學的基本技術[7]。同時,學生也會對自己所做的每次實驗結果進行詳細觀察和記錄,養成良好的科研習慣,使他們在實驗中步步深入,從而能大大提高學習主動性,產生濃厚的實驗興趣。通過課堂講授、實驗操作與實驗報告寫作相結合,使學生們可以在理性認識與感性認識上進行融合,使學生對實驗原理、實驗過程、實驗結果等有一個初步了解,增加學生對實驗課的興趣。實驗課堂上,要盡量克服學生對老師的依賴性,培養學生的動手能力和獨立自主的工作能力。

4 結語

內容總體設計是進行合理教學和有效教學的前提,根據專業教學目的和課程內容特點,在總體內容上要做到不重復、實用、整體性。教材是溝通教與學的橋梁,是學生賴以領會、接受理論與技能的基本工具,微生物學實驗教材也不例外,在實驗課程教學中,所選用的教材對于教學質量的保證和提高同樣具有十分重要的作用。目前,針對各類高校不同專業教學要求編寫的微生物學實驗教材版本很多,各種教材內容側重點也有很大的不同。但是沒有一本針對中醫藥院校藥學類專業的微生物學實驗教材,因此編寫和使用一本優秀的實驗教材也非常重要。

根據藥學類學生畢業后的工作需要,增強教學的針對性和實踐性,突出實驗課程在專業技能訓練中的作用,合理安排教學內容,做到有的放矢,是提高高校教學效率的保障。通過教學為學生奠好基石,做到學以致用,是充分利用教學資源的有效措施。筆者在總結多年教學經驗的基礎上,對藥學類專業學習的微生物學實驗內容提出了總體設計思路,其內容實施將符合藥學類專業的培養目標。如何具體安排實驗內容,突出教學重點,節約學習時間,提高課堂效率,增強學生的自學能力和實際動手能力,從而達到事半功倍的效果,這是我們下一步要進行研究的問題。

參 考 文 獻

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篇7

1 室內質量控制

1.1 人員和組織管理的質量控制[1]

1.1.1 為了保證微生物檢驗結果的正確，必須加強微生物檢驗人員的質量控制。加強人員的基礎知識教育，保證人員基本業務能力。微生物檢驗工作人員不僅要學習醫學、微生物學、微生物檢驗學知識，還要學習與工作有關的其他學科，如食品檢驗，公共衛生等。以提高專業技術和能力。

1.1.2 注重業務學習與培訓，由于醫學的快速發展，新的檢驗方法和理論的出現。特別是新的標準的出臺，要求檢驗工作人員不斷地學習和使用。通過參加上級部門組織的業務培訓，或到業務水平高，設備先進的高級實驗室進修學習，或參加專業的學術交流會議等，使檢驗工作人員能夠掌握新的標準和理論。

1.1.3 嚴格微生物檢驗人員準入制度，中心需要對微生物檢驗人員進行業務知識考核，合格者持證上崗，明確崗位職責。只有保證了一定的專業基礎知識，實際操作能力和分析判斷能力，才能保證檢驗工作的質量。除此之外培養檢驗工作人員高度的責任心，務實、嚴謹的工作態度也是準入的基本條件。

1.2 檢驗過程的質量控制

1.2.1 仔細閱讀檢驗申請單，重視微生物檢驗采樣前的準備工作；如采樣容器的消毒，檢驗試劑的配制，培養基的配制與保存等。

1.2.2 嚴格檢驗標本的使用制度，合格的樣品對檢驗的結果至關重要[2]。采集的樣品必須具有真實性，代表性、保證無菌采樣；采樣所采用的方法是正確的，記錄采樣時的環境狀況。采集的樣品必須按規定以正確的方式和時限送到實驗室。在實驗室內的樣品應有唯一性標識，樣品的處理和保存符合規定，以滿足樣品的復核。

1.2.3 及時處理或接種標本，檢驗人員應按標準操作指導書將合格的標本及時處理，一般為樣品的涂片、染色、接種、分離、純化、生化鑒定、抗血清反應及結果報告。

1.3 標準菌株的對照實驗 微生物檢驗的工作中，質量控制系統必須有標準菌株做對照實驗以保證檢驗的正確。在工作中標準菌株做陽性對照實驗，也用有關的標準菌株做陰性實驗。對于標準菌株的使用和管理，應在質量手冊作具體規定。

1.4 新的標準或方法的的驗證實驗[3] 在微生物檢驗的工作中，不斷有新的標準或方法出現，在工作中應采用一定的樣品對新的標準進行預實驗，來達到熟練使用標準的能力，從而保證檢驗結果的正確。

1.5 微生物實驗室檢驗所用的培養基、試劑、染色液、抗血清的的質量控制。

1.5.1 培養基的采購，驗收、配置、使用等是培養基質量控制重要環節[4]。選擇有質量保證和服務能力的生產企業。微生物檢驗所用的培養基為商品化干粉培養基或專用固化培養管，配制的培養基一般質量要求為；培養基應有標識與配制日期，新配制的液體培養基外觀透明、無渾濁、無沉淀。顏色符合要求。固體培養基應有適當的硬度，表面光滑平整，在接種前應無菌。培養基的PH值應符合規定，有指示劑的培養基應有其特有的顏色。對每一批培養基按生產企業所提供的技術參數進行技術驗證，并且在有效期間使用。

1.5.2 試劑、染色液 根據試劑、染色液的穩定性及靈敏性的要求，配置好的試劑、染色液，必須用標準菌株定期地進行陽性和陰性對照，一些與細菌酶反應有關的，需要較高質量的試劑，在每次使用時檢測其穩定性及靈敏性，對于較為穩定的試劑，每周檢查核對一次。并記錄結果。

1.5.3 抗血清 要求抗血清的質量可靠，按質量手則的要求記錄其名稱、包裝、數量及批號、生產企業等。在使用時觀察是否澄清，定期用標準菌株進行監控。按規定儲存和在有效期內使用。

1.6 微生物實驗室檢驗所用設備儀器的質量控制

1.6.1 高壓滅菌器 檢驗人員應掌握高壓滅菌器使用方法，對于大容積的高壓滅菌器，在不同的部位放化學指示卡，以觀察滅菌的效果。并做記錄。

1.6.2 培養箱、水浴箱、冰箱 隔水式培養箱應定期加水。二氧化碳培養箱應保持二氧化碳的濃度，而生化培養箱保持相宜的濕度和溫度。每天開始工作前和結束工作后，應對所需的溫度進行調節和記錄。水浴箱定期換水，冰箱則需要定期清理和消毒。一旦發現異常，及時的維修或更換。

1.6.3 超凈工作臺 生物安全柜的監測 上述設備過濾網更換應有專業人員更換，紫外燈的輻射強度監測控制結果應符合規定。

1.7 微生物實驗室的環境設施的質量控制

1.7.1 隨著疾病預防控制系統實驗室建設項目的建立和推進，疾控中心建立了高標準的微生物實驗室。國家也加大了對各種重大傳染病的監測力度，如艾滋病、流感、手足口等。大量高危險的生物樣品進入實驗室。通過建立相關的制度，配置有關的生物安全設備或設施，達到實驗室的環境設施的質量控制。防止病原體的交叉污染，確保標本，人員，實驗室環境的安全。

2 室間質量控制

實驗室室間質量控制主要是由省級疾病預防控制中心或其他部門實施，組織實驗室間比對和能力驗證進行的。定期或不定期發放盲樣，對實驗室間分析的精密度和準確度進行考核，驗證實驗室的技術和能力。通過分析結果，識別實驗室的問題并采取有效措施，證實實驗室對標準方法，程序，過程的質量控制。

參考文獻

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篇8

【關鍵詞】 實驗室生物安全 學生 防護策略

Biosafety and their protective strategies for students in medical laboratories

WANG Ke， PAN Jin，ZHAO Dong，et al.Laboratory of biological pathogens and immunology， Capital University of Medical Sciences， Beijing 100069，China

【Abstract】 Medical institutions' laboratory safety is different from other institutions in the laboratory. According to its professional characteristics should be based on security， the so-called laboratory biosafety (LBS) refers to pathogenic microorganisms that engaged in activities of the laboratory experiment in the pathogenic microbes to avoid staff and associated personnel hazards. With the national security of the importance of biological laboratories， it is necessary for medical students to learn laboratory biosafety knowledge and skills training against the existence of problems protection strategies.

【Key words】 Laboratory biosafety; student; protection strategy

實驗室生物安全的概念起源于20世紀50～60年代，由于種種原因，我國對生物安全的研究和認識明顯落后于西方國家，直到2002年，衛生部頒布了微生物和生物醫學實驗室生物安全通用準則，該準則對生物醫學實驗室內的生物安全作了詳細的規定，可惜當時并未引起足夠重視；2003年傳染性非典型肺炎的流行，使得國家相關部門把對實驗室生物安全的關注提到一個新的高度，有關法律法規相繼面世［1，2］ 。隨著國家經濟和社會的飛速發展，醫療衛生與健康問題逐漸成為社會的關注焦點。為此國家加大了對醫學教育的重視和投入，隨之而來的就是大量先進儀器的進入和現代化實驗室的建設，實驗室利用率的加大，使大量的不同層次的學生走進了醫學實驗室，人員流動性增大，給醫學實驗室的生物安全管理帶來了很大難度。在實驗過程中發生的差錯，輕的會造成實驗材料的浪費，結果的錯誤，重的會導致感染，傳播病原微生物，甚至造成人員的死亡。因此學生進入醫學實驗室應把生物安全放在第一位。首先要進行生物安全知識的教育，使學生在具有自我保護的意識下，克服不良習慣，養成良好習慣，結果受益終生。結合醫學實驗室的特點，將實驗室及學生有序的管理好是非常必要的，通過多年的實驗室工作和不斷地思考總結歸納以下實驗室容易出現的問題和針對問題解決的策略僅供參考。

1 醫學實驗室生物安全存在的問題

主要存在于與病原生物學相關的專業所使用的實驗室。

1.1 學生上課做實驗直接接觸病原微生物，存在著因防護不嚴而病原微生物失控 不僅感染實驗室人員，甚至還可能傳播到社會，引起傳染病的流行。

1.2 與實驗無關的東西隨意帶進實驗室 甚至有時將食物、飲料、衣物等擺放在實驗臺上與實驗材料同放。

1.3 進實驗室前的個人防護問題 許多學生很隨意的穿著自己的衣服進入實驗室，還有的學生穿者涼鞋、拖鞋，更有甚者為肩佩長發一邊做實驗一邊用摸完實驗用品的手不斷的弄頭發。

1.4 上實驗課準備不足 有的同學上實驗課慌慌張張的現找實驗室，頭腦空空，上什么內容也不知道，上課鈴聲響完還不斷地有人進入，內容聽不全，實驗中就來回走找實驗材料問實驗方法等，實驗室顯得十分混亂。

1.5 使用酒精燈不注意安全 在病原微生物接種時酒精燈是最常用的，它的安全問題往往被忽略，有的同學因某種原因離開自己座位時依然點著酒精燈，酒精燈發生意外致人損傷的事件在學生實驗室曾經是有過先例的。

1.6 實驗后不洗手、隔離衣亂放 做完實驗離開實驗室前有的同學忘記洗手，趕上午飯前直接去飯廳，是十分危險的。再有下課后有的同學不將白大衣反折單放，而是直接塞入書包與其他物品同放。

1.7 實驗物品的分類使用和存放混亂 值日生同學不懂實驗后的用品如何分類，經常將污染的與沒污染的用品混放，造成污染的范圍擴大，更有甚者為亂倒實驗垃圾，不知道實驗垃圾應該如何分類等。

2 醫學實驗室生物安全管理的重點應放在硬件建設、制度建設和安全的教育上

高等院校實驗室的安全事故時有發生，因此現在大家對實驗室的安全問題十分重視，基本實行“以人為本”、“預防為主”、誰主管，誰負責的原則，將安全責任落實到每個實驗室和個人，逐級簽定安全責任書，開展各級培訓班。把各項規章制度掛在墻上。這些都是最基本、最起碼的安全管理，但未必就能防止安全事故的發生，一旦發生事故，一切原則、責任都于事無補，因此還需要在以下3個方面對安全管理加以支撐和保證。

2．1 硬件建設，確保實驗室的安全 所有實驗室門口都應貼有明顯的標識牌（例如某某實驗室，生物安全幾級以及逃生門等必要的內容），實驗室內外要有足夠量和有效的消防器材，以備火災時使用。緊急噴淋和洗眼器，以備有害液體不慎飛濺到眼睛或皮膚上時沖淋以減輕傷害。實驗室應設置緊急救助藥箱，備好基本救助材料，以供緊急需要時使用。

對于利用病原微生物開展教學的醫學實驗室，必須根據所開展工作的性質、接觸的病原微生物的危害和因之所需要的生物安全等級（目前分為4級），使實驗室的建筑結構和設施、安全設備、安全操作規程達到相應的要求，否則該實驗室不能使用。

2．2 嚴格安全制度，消除安全隱患 防患于未然才能從根本上保證實驗室的安全，預防措施必須以制度的形式穩固下來。

2.2.1 定期檢查制度 對于實驗室的安全條件和設施要做到胸中有數，定期檢查，及時發現和杜絕安全隱患問題 。一旦發現重大安全隱患問題的實驗室，必須立即停止使用，疏散人員，限期整改，確保人身安全。

2.2.2 加強教育嚴格準入制度 對進微生物實驗室做實驗的學生，首先要進行系統的生物安全教育以及防護方法教育，使他們通過教育具有安全意識，做事有條理，遇事不慌，處理得當。與實驗無關的人員不得隨意進入實驗室。

轉貼于

2.2.3 定期演練制度 通過組織相關人員對突發事故的模擬演練，來檢查人員的安全意識，正確處置和快速反應能力。可定期進行演練，在演練過程中不斷發現問題，達到不斷提高的目的。

2.2.4 危險品保管制度 對易燃、易爆、劇毒、致病性病原微生物等危險品，要設專室專柜儲存，雙人雙鎖妥善保管。實驗人員領用時必須經負責人簽署意見，并作好詳細領用記錄。

2.2.5 不斷進行安全教育 開展定期的、經常的安全教育，不斷創造重視安全的氛圍，是提高實驗人員安全意識、養成良好安全習慣，從而防止安全事故發生的有效途徑。安全教育內容包括：學習涉及實驗室生物安全通用的要求、病原微生物安全防護、醫療廢物及危險品管理等國家和學校的有關法規、制度，學習掌握各種標準化、規范化的實驗操作，熟悉實驗室環境和安全措施，學習正確使用消防器材，掌握基本的急救知識和逃生技巧等。

3 學生重在樹立安全意識，養成良好的安全習慣，加強自我保護和防護策略

對于初進醫學實驗室的學生，為確保實驗室和自身安全，必須要高度重視和認真對待實驗室安全問題，認真學習和掌握實驗室安全教育的內容。樹立安全意識，養成良好的安全習慣，加強自我保護和防護策略，對于新開的實驗課一定要在課前找好實驗室的準確位置，了解其實驗特點，要做那些實驗內容，千萬不要腦子空空，現上課現找實驗室，匆忙進入實驗室，投入實驗，完全依賴帶教老師，這樣做的結果不但浪費時間和資源，重要的是加大了不可控制因素帶來的危害。

3.1 做好個人防護，不存僥幸心理 進醫學實驗室前一定要穿好白大衣，實驗課前一定要認真預習實驗內容，接觸有毒有害物品前，必須做好個人防護，不要抱僥幸心理，以為不會出事。課上嚴格按照帶教老師所提的要求去做，對不懂的問題或操作，一定要問帶課教師，不可自作主張，莽撞惹禍。一旦出現問題不要私自處理，要立刻報告給老師，在老師的指導下進行處理。

3.2 做實驗要嚴肅認真，集中注意力 不要閑聊和大聲喧嘩，以免影響實驗進度和實驗室整體氛圍，使人麻痹大意，引發事故，造成不必要的傷害。

3.3 不要將與實驗無關的物品隨意帶入實驗室，更不要放在實驗臺上 實驗臺在實驗的整個過程中都應保持清潔有序，對于病原微生物專業常用的酒精燈一定要更加注意它的安全性。

3.4 用電設備的使用，要謹慎儀器要在帶課教師的指導下正確使用 不要用帶水的手進行操作，用后需切斷電源的一定要切斷電源，不需切斷電源的千萬不要切斷電源。例如微生物實驗室所用的溫箱、冰箱課后不要隨意斷電。以免造成結果無法觀察的后果。

3.5 實驗完畢后不要隨意處理實驗所用物品 要在帶教老師的指導下，分門別類的將其放好送到應該送的地方，洗手或用消毒液浸泡手后，將白大衣反折單放后再離開實驗室等。

4 結束語

醫學實驗室的特點，儀器設備多、空間狹窄、實驗復雜，涉及的危險因素多。學生進入實驗室，如果對安全重視不足，教育不夠，養成壞習慣，不僅會成為事故的制造者，造成人身傷害，還可能惡習難改，影響自己長遠的職業生涯和將來工作的實驗室的安全［3～6］。

學生是醫學實驗室安全教育的重點，通過認真全面的安全教育，使他們樹立安全意識，養成良好的實驗室習慣，盡快實習實驗室環境，盡快掌握各種規范化實驗操作。作好他們的生物安全知識培訓，不僅保證其學習期間的安全，還有以下深遠意義：受過正規生物安全知識培訓并且熟練掌握其知識。有些學生畢業后將繼續從事科研工作，或有機會參與實驗室設計和建設，可使他們從容應對工作中面對的問題。還有些學生畢業后可能從事教學工作，把所學到和掌握的生物安全知識傳授給學生，這樣我國的醫學實驗室生物安全工作將會進入一個良性循環的時代：隨著改革開放國際交流的日益增多，有些畢業生走出國門學習深造、或參加各種合作的研究項目，受過正規生物安全知識培訓并且熟練掌握其知識，可以在國際交流中體現我國醫學生的基本素質；熟練掌握其知識，受益終生。

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現代臨床微生物學是一門由臨床醫學、基礎醫學和預防醫學相結合的交叉學科，又是檢驗醫學中重要和成熟的專業之一。這門新興的學科需要微生物醫師和實驗技術人員聯合進行工作，具體任務有四項：①對微生物標本做出快速、準確的檢驗報告，及時滿足臨床的需要；②進行有關抗菌藥物耐藥性方面的各種試驗，受理抗菌藥物合理應用的咨詢；③密切結合臨床，與臨床醫師討論、研究及處理有關感染性疾病的問題；④參與抗菌藥物臨床合理應用的管理和醫院感染監測、控制和管理［1］。這就要求臨床微生物工作者不僅要完成實驗室工作，還要完成有關的臨床工作，成為感染控制和抗菌藥物臨床應用的參謀和顧問。

1 病原學診斷

1.1 病原學診斷的基本要求

1.1.1 確保臨床標本可靠:恰當的標本采集是感染性疾病診斷的最為重要的一個步驟。要求臨床醫師正確采集能代表感染部位的臨床標本，廣泛采用保護性試子、合格的容器及安全運送培養基，避免標本中的微生物受毒性物質作用而死亡。

1.1.2 全面了解機體的正常菌群：了解人體的正常菌群是細菌檢驗的必要前提，要了解正常菌群的概念、分布和種類，條件致病菌與內源性感染、菌群失調癥與二重感染的概念，既不要將所有標本分離出來的細菌都當成致病菌，也不能將正常寄居菌所導致的內源性感染輕易放過。

1.1.3 三定一結合：分離鑒定時要做定性、定量和定位分析，并結合病情。要求根據臨床和標本的具體情況確定檢驗程序，選擇培養基及合適的鑒定試驗。要判斷分離出的細菌是致病菌、條件致病菌、還是非致病菌（定性），同時要有一個細菌數量的大致估計，必要時進行半定量和定量培養。在人體有菌部位分離的細菌，其意義大小要參考微生物的定性和定量分析作出判斷；如在無菌部位（如血液、腦脊液）分離出細菌，無論是何種微生物和數量多少，均具有重要意義（定位分析）。在進行“三定”分析時，一定要結合病情，觀察是否與病情相符。

1.1.4 提供快速、準確的病原學診斷：在臨床醫師提供病人的臨床診斷信息和適當的臨床標本，并盡可能獲得流行病學資料的情況下，進行微生物檢驗和藥敏試驗，要求及時、全面地分析檢驗結果，為臨床提供準確的病原學診斷以便對病人作出恰當的處理。盡管目前微生物的分離鑒定仍作為病原學檢測的金標準，但這種“以活菌生長”為基礎的傳統的細菌學鑒定方法速度較慢，不能適應臨床的需要，要求以標本的直接檢查為基礎，如形態、染色、抗原檢測及核酸檢測（核酸雜交、PCR和16SrRNA分析），檢測致病基因（致病島、毒力島）和耐藥基因。盡可能在快速診斷方面下工夫。

1.1.5 及時報告：要使實驗室數據有效地轉化為臨床有用的信息，病原微生物診斷報告應實行三段報告制度，即在涂片或培養陽性結果出現時、敏感試驗結果出來時以及最終結果出來后都要及時報告。

1.1.6 加強質量控制，增加檢驗項目：臨床微生物室必須加強質量控制，保證各種標本的檢驗質量，為臨床提供可靠依據，并滿足臨床需要的各種檢驗項目。當前臨床微生物實驗室應根據本單位的實際情況增加檢驗項目，臨床要求關注的一些項目有：①呼吸道標本的細菌學篩選和半定量培養方法；②呼吸道非典型病原體的檢測，包括衣原體、支原體和軍團菌；③非結核分枝桿菌的培養和藥敏；④免疫抑制或器官移植患者特殊病原體的檢測，如巨細胞病毒，卡氏肺孢子菌等；⑤抗生素相關腹瀉的病原體（主要是艱難梭菌）的檢測；⑥侵襲性真菌的快速檢測和藥敏試驗等。

2 密切聯系臨床，參與臨床會診和感染病例討論會

2.1 獲取臨床信息，做出及時、準確的微生物報告：臨床感染性疾病往往涉及多種病原體，沒有任何一個單一的試驗能夠檢出所有潛在病原體。因此，臨床信息是選擇試驗方法的重要參考依據。臨床醫師在開化驗單時應寫明有關病人的推測性診斷，以便實驗人員能據此選擇合理的檢驗程序和試驗方法，并能指導臨床正確采集恰當的標本；當實驗室開始有實驗結果時，必須及時通知臨床醫師，以便讓他們重新評價診療方案。

2.2 疑難微生物報告的解釋與咨詢：近年來，不少感染性疾病特別是醫院感染的病原譜和藥敏譜發生很大變化。以往罕見的微生物頻頻出現在檢驗報告單上，藥敏試驗的方法、受試品種、結果解釋也有不少改變。臨床醫師常常難以正確理解和利用臨床微生物檢驗資料。面對這一現狀，臨床微生物室應積極與臨床溝通，幫助解決臨床醫師在判斷微生物檢驗和藥敏結果報告單時的困難。指出正常菌群、污染菌和感染菌的鑒別與判斷少見菌或罕見菌的意義；培養陰性時的可能原因；藥敏試驗結果的判斷標準和局限性；特殊耐藥細菌的耐藥特點等，必要時在報告上增加注解。

2.3 設置微生物醫師，作為臨床與微生物室溝通的橋梁：目前國外不少醫院均有臨床微生物專家或檢驗醫師的會診、咨詢制度［2］。如檢驗開始時發現圖涂片有問題，即由檢驗醫師主動與臨床聯系，共同討論涂片所見的意義。每天微生物室的醫師與技師在一起看培養和藥敏結果，尤其是痰培養結果要與直接涂片核對，發現問題及時與病房聯系。建議臨床微生物室每日有一位醫師參加本院感染科、呼吸科或ICU的晨會，并回來向科內醫師匯報有關感染病人情況。或定期派出醫師帶上有關檢驗結果，參加一些臨床科室的感染問題討論會，具體解決感染癥的治療問題［3］。如定時參加ICU、腫瘤科、神經外科、兒科等的討論會，對血培養陽性、腦脊液檢查陽性或嚴重燒傷感染的病人，微生物醫師要主動去病房看望，參加治療方案討論。對菌血癥或膿毒血癥病人要協助找出原發癥灶。臨床微生物醫師巡視病人后要在病歷上記錄意見，必要時可與臨床的主管醫師、主任一起討論。各臨床科室如有感染問題可與臨床微生物室聯系，詢問檢驗報告的意義或要求會診。微生物室每周召開一次感染病例討論會，討論感染病人的情況，交流發現的問題，并將臨床微生物室的意見與臨床科室進行交流。微生物室醫師也要參與日常檢驗工作，并接受臨床有關微生物學問題。

3 參與抗菌藥物臨床應用的管理

合理應用抗菌藥物，減少或避免耐藥菌株產生，是當前抗感染領域的一大難題，臨床微生物室在抗生素合理使用中起重要作用［4］。首先要重視感染的病原學診斷。臨床醫師在使用抗菌藥物前，應采集多份微生物學標本做細菌培養和藥敏試驗，微生物室則為臨床提供快速、準確的細菌檢驗和藥敏結果。此外，微生物專家與臨床醫生密切聯系并參與患者的治療也是控制抗生素用量的重要方法。微生物專家應參與醫院藥事委員會，參與制定抗生素使用指南、教育和培訓、監督和檢查等。這方面香港馬麗醫院的做法是由感染監控護士負責走訪感染病例，發現抗菌藥物誤用或不合理應用時，由微生物室主任出面向院長、當事科室主任和當事人反饋，取得較好效果。

4 參與醫院感染的監測、控制和管理

我國《醫院感染管理規范》明確指出檢驗科在醫院感染管理中應履行以下職責：負責醫院感染常規微生物學的監測；開展醫院感染病原微生物的培養、分離鑒定、藥敏試驗及特殊病原體的耐藥性監測，定期總結、分析向有關部門反饋，向全院公布；醫院感染流行或暴發時，承擔相關檢測工作。

臨床微生物實驗室在醫院感染的監測、控制和管理中的作用包括：①加強病原學監測，作為判定醫院感染的基礎；②加強耐藥性監測，以指導合理使用抗菌素；③加強環境、器械等微生物學調查，以達到衛生學指標要求；④保證醫院內消毒、滅菌的質量；⑤通過流行病學調查和細菌學分型試驗，追蹤感染源并加以控制［5］。

4.1 加強監測：臨床微生物室是醫院感染控制委員會的必然成員，微生物檢驗在醫院感染的監測中起重要作用。若在臨床微生物檢驗中發現有醫院感染問題，要及時與醫院感染控制部門、病房醫師和護士聯系，并注意發展動態。醫院感染中的一些特殊耐藥菌如GRE、MRSA、產ESBL腸桿菌科細菌等常通過交叉感染傳播，曲霉菌、軍團菌等常在空調、供水系統、霧化裝置存在并導致感染，對可能攜帶這些致病菌的來源常規監測并提醒臨床注意，通常可有效預防傳播擴散并節省大量抗感染費用［6，7］。

4.2 醫院感染的教育和培訓：臨床微生物室要參與有關人員的醫院感染教育和培訓工作。如講解臨床微生物標本的采集、保存、運送的要求和注意事項，對標本采集前要求病人應該做些什么準備，采集標本應選擇什么時機、什么部位，每天采幾次、采多少量以及采樣部位應該如何消毒等一系列問題進行解釋；對人體常見的正常菌群、定植菌、污染菌和感染菌等內容進行培訓；對各種細菌耐藥酶的檢測及其含義和在選用抗生素方面的意義與臨床進行經常性的溝通等等。可采用多種方法如講座、討論會、簡訊、墻報園地甚至參與查房等形式。也可以融合到醫院感染管理的繼續教育培訓項目之中。

4.3 參與消毒隔離的管理：正確、科學地實施消毒與隔離技術對預防和控制醫院感染非常重要，正確地指導、監查消毒隔離工作也是臨床微生物室的工作之一。當發生醫院感染暴發流行或特殊耐藥細菌感染時，臨床微生物專業人員應參與制定消毒隔離措施，對相關的人員管理、廢棄物的處理等環節提出微生物專業意見。

4.4 定期細菌耐藥性監測結果：目前對許多感染性疾病的抗菌藥物選擇是經驗性的。但經驗用藥也需要循證醫學和流行病學資料的支持。建議將所有病原菌分離和藥敏的資料用WHONET軟件保存，定期細菌耐藥性監測結果，隨時統計分析ICU等重點科室常見病原菌和耐藥狀況，對臨床經驗性選擇抗生素、提高重癥感染的救治成功率大有幫助。

4.5 通過分子分型技術控制醫院感染：常用的分子分型技術有PFGE、RAPD等。微生物實驗室設置分子分型實驗室，對及時發現和控制病原菌流行具有重大的意義。國外一些醫院的做法是對VRE等不常見的耐藥菌一經發現即進行分子分型，根據基因分型，判斷流行的可能性及范圍并采取相應措施控制感染［8］。如某醫院對2個月時間內自16個病人分離出的19株VRE進行分型，結果顯示其中十四株為一個型別，其他為一個型別，高度提示VRE流行，經調查分析，發現14名患者中11人有直接聯系。根據這些分析，采取了針對控制措施而中止了感染［9］。另一些醫院針對肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、粘質沙雷菌等感染流行問題，均通過分子分型而得到控制。據統計，微生物室成立分子分型實驗室（設備及人員）的費用為18,050美元，每年分子分型相關支出為400，000，美元，假設所有醫院（美國）都常規進行分子分型，實驗相關費用達20億美元，但節省下來的治療醫院感染的費用將超過5倍（100億）。

總之，筆者認為：臨床微生物實驗室在感染控制中發揮作用大小的關鍵：一是要走出實驗室，加強與臨床的聯系；二是要立足本職，做好常規的臨床微生物檢驗工作，努力提高標本的培養陽性率，縮短結果的報告時間，提高檢驗結果與臨床治療結果的符合率；三是要加強宣傳、教育培訓，在醫務人員中普及臨床微生物學知識，并對檢驗的結果作出合理的解釋，協助臨床正確閱讀和分析微生物檢驗報告單，使微生物檢驗結果和資料能及時有效地被臨床醫師所利用。

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1.1造就能“文”能“武”的雙師型教師高職院校要培養全面發展的高素質人才,實現教、學、做一體化教學，就必須要有一支博學多能、經驗豐富、專業技術熟練，既能“文”又能“武”的“雙師型”教師隊伍。我們通過“走出去”即學院提供各種條件鼓勵教師到臨床醫院進修、培訓或訪問，讓教師走在醫學研究的最前沿，學習新知識，彌補其操作技能的不足。在走出去的同時，還可以“請進來”，即邀請行業專家來到學院對教師開展相關項目的指導，把其多年的實踐經驗、操作技能和新技術帶入學校，與本校教師相互促進，形成互補，促進了教學和實踐的結合。這樣不僅提升了教師個人的專業修養，同時也提高了教師的動手能力，成為實踐操作也過硬的“雙師型”教師。目前我們微生物免疫組教師隊伍95%以上達到了“雙師型”的要求。

1.2以“能力為目標”、“就業為導向”整改課程內容本著以臨床檢驗科微生物檢驗崗位能力需求和相應工作任務的要求，強調操作技能的訓練，理論以夠用為度。我們對《微生物學檢驗》教材的內容進行一定刪改、編排并進行了模塊化整合，將原有的《微生物學檢驗》課程設計為五大模塊（即基本技能模塊、專業技能模塊、綜合技能模塊、綜合實訓模塊和臨床頂崗實踐模快）和七大任務（即“培養基制備、制片、染色及鏡檢、細菌的分離、培養、臨床標本微生物學檢驗、臨床細菌檢驗的質量控制、醫院感染微生物監測和細菌檢驗的商品化、自動化儀器的使用”），每個任務再分為幾個子任務，每個子任務既是一個學習情境，也是一個完整的單任務過程。

1.3理論教學的部分內容移入實踐課中傳統的《微生物學檢驗》授課時，常常將理論和實踐分開講，各自為政，互不干涉。這種教學方式講授抽象的專業理論課，學生感覺較難入門，導致學習興趣不高，容易產生厭學情緒。特別是在介紹每個細菌的形態特征鑒定時，內容多、學生感覺很枯燥，又容易張冠李戴；老師講得也“累”，覺得自己的辛苦不被學生所接納。而專業技能課，由于受到理論學習程度的限制，無法深入，其教學效果可想而知。教、學、做一體化教學克服了這種教學的弊端，我們在教學計劃里壓縮了單純的理論課，在學生實際操作時，將理論知識運用到實踐中。例如：做革蘭染色時，課前讓學生預習實驗操作步驟，上課時教師只針對操作過程的一些注意事項加以說明，即讓學生動手，觀察完實驗結果后，針對結果出現的問題再導入革蘭染色原理、臨床意義等一系列問題。

1.4教學方法的探討《微生物學檢驗》是一門培養人的思想、發展人的思維的重要學科，依據本課程教材的特點，教學方法設計遵循以工作任務為導向，實現教、學、做一體化的原則，創造條件讓學生通過職業崗位訓練，有效地培養職業素質與實際工作能力。我們根據所教模塊的特點，采用靈活多樣的教學方式。

1.4.1理論教學方法實施“以問題為中心”的教學模式，設計以問題為中心，采用多種教學方式如啟發式教學、討論分析式、案例教學法等進行教學。在介紹“常見微生物鑒定技術”這一章節前，先以學生熟悉的生活實例或臨床病例作先導自然引入，并提出當次課教學目標及思考題，然后老師圍繞著教學目標展開講解，學生帶著思考題認真聽講，最后由老師進行歸納，學生回答問題。通過實例或臨床病例分析能激發學生的學習熱情，培養學生自主學習能力、思維能力和綜合分析和解決問題的能力。對重要微生物的檢驗采取案例教學法，如講授“埃希菌屬”這一節時，采用案例教學法。先導入一臨床案例“5歲男孩在隨母親旅游中，進食小店賣的水果沙拉，回家2d后，出現嚴重腹部疼痛等癥狀，到醫院急診，檢查有溶血性貧血及血小板減少等溶血性尿毒綜合征。”再提出問題“①針對該病例應做哪些微生物學檢查？②此病原菌屬于什么菌屬？如何與該菌屬中其他可引起腹瀉的病菌相鑒別？”，讓學生根據已學過的知識加以討論。另外也可以通過一些當前的臨床實例來激發學生的好奇心。近年來，不斷有新的傳染病出現，如近年對人類生命造成巨大威脅的非典、禽流感、手足口病、H7N9禽流感等。在教學中我們將相關內容在課堂上用微生物及免疫學的知識原理對學生進行講解，增加同學們的興趣及信息量，激發其學習的主動性，讓學生更覺得貼近實際而興趣盎然。

1.4.2實踐教學方法在《微生物學檢驗》實踐教學過程中，除了使學生獲取有關微生物檢驗方面的基本理論知識外，更應注重學生對微生物檢驗基本技能的獲取。對實踐教學我們首先重新組織實驗教學內容：結合當地、當年、當時感染性疾病流行情況設計有關試驗內容與環節，刪除過時、陳舊、驗證性實驗項目,增加先進、實用、綜合性、創新性實驗項目。其二，將課程內部的實驗進行整合：將單一獨立的小實驗整合為系統連貫的大實驗。如開設“細菌的培養與形態學鑒定”系統實驗，提高了學生學習興趣，明確了微生物檢查在臨床疾病診斷中的重要意義。其三，將實驗內容與流行病學調查有機結合：如在實驗教學中開展酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測乙肝。其四，根據專業發展動態更新免疫學實驗內容。此外還增加了綜合實訓課程，在新建設的BSL-2實驗中采取“分段實訓，循序漸進”的教學模式，通過見習、實訓、崗前培訓、頂崗實習，分階段對學生進行技能訓練，使學生達到理論與實踐的相結合。

2“教、學、做一體化”教學模式的評價

教學模式評價是教學過程的最終環節，考核結果直接反映了“教、學、做一體化”教學改革的成敗。我們主要依據“理論+實踐”雙相考核模式為主，平時表現為輔的原則對學生進行考核，具體做法是將實踐課考核與理論考試分開進行，總成績為100%：其中理論考試成績占總成績的60%、實驗技能成績占總成績的30%、平時成績占總成績的10%。

2.1實驗技能課考核分為筆試、操作和平時實驗三部分，各占10%。①筆試內容主要是有關實驗的理論和技術問題以及實驗結果的分析。②操作內容為每個學生在實驗課中親手操作過的、教學大綱要求必須掌握的基本技術，是對學生實際動手能力的考核。③平時實踐情況由實踐課指導老師根據每個學生的實驗報告、課堂練習、實踐課態度和紀律等綜合計分。

2.2理論考核主要包括考試成績、作業質量情況、任務項目完成質量等。

2.3平時考核主要包括學生的自主學習能力、學習態度、出勤情況、學習活動參與情況、交作業情況、課堂違紀情況等。

3小結