海馬范文10篇

【關鍵詞】氟西汀;細胞培養(yǎng);海馬神經(jīng)元;大鼠

氟西汀是5-羥色胺（5-HT）再攝取抑制劑之一，是應用較廣的抗抑郁藥。氟西汀除有抗抑郁作用外，尚可治療其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。有研究表明，氟西汀對海馬的神經(jīng)保護作用是其發(fā)揮抗抑郁效應的機制之一［1］。關于氟西汀對體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元生長的影響未見報道，本研究初步探討了氟西汀對原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元生長的影響。

1材料與方法

1.1新生大鼠海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)

技術方法在參考文獻［2］基礎上加以改進。取出生24h內(nèi)的新生SD大鼠（東南大學醫(yī)學院動物實驗中心提供），無菌分離出雙側海馬，用顯微剪剪碎，D-Hank''''s液清洗2或3次，將剪碎的海馬組織轉移至離心管中，加入等量0.25%的胰酶（美國Sigma公司），37℃消化30min，中間振搖1或2次，加入10%的DMEM/F12（美國Gibco公司）5ml，輕輕吹打15次，然后1000r·min-1離心5min，制成單細胞懸液，置于CO2培養(yǎng)箱（德國Heraeus公司產(chǎn)品）中，差速貼壁30min，去除成纖維細胞，吸取未貼壁的細胞，并用200目的不銹鋼濾網(wǎng)過濾，收集過濾后的單細胞懸液于培養(yǎng)皿中，然后至離心管中，取一滴單細胞懸液進行計數(shù)，并用DMEM/F12將細胞密度調(diào)到1×106ml-1，然后接種于200μg·ml-1多聚賴氨酸（美國Sigma公司）包被的6孔培養(yǎng)板中，轉移至培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，4h后換為無血清培養(yǎng)基，即含2%B27的Neurobasl培養(yǎng)基（美國Gibco公司），以后每3天半量換液1次。使用培養(yǎng)6d的神經(jīng)元進行染色鑒定。

1.2大鼠海馬神經(jīng)元的鑒定

【摘要】目的運用蛋白質組學技術觀察益智健腦顆粒對SAMP8小鼠海馬蛋白質表達的影響，從而探討益智健腦顆粒治療阿爾茨海默病(AD)的部分作用機制。方法將6月齡SAMP820只隨機分為治療組(n=10)和對照組(n=10)，治療組以益智健腦顆粒濃縮液灌胃，對照組以等劑量雙蒸水灌胃。8w后，應用雙向凝膠電泳(2DE)技術分別分離治療組和對照組SAMP8海馬區(qū)組織總蛋白，經(jīng)膠體考馬斯亮藍染色，利用ImageScanner圖像掃描儀及ImageMaster雙向凝膠電泳軟件對圖像進行掃描分析，將有意義的差異蛋白質點經(jīng)基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDITOFMS)分析得到肽質量指紋圖譜(PMF)，經(jīng)MSDB和NCBI數(shù)據(jù)庫查詢，鑒定差異蛋白質點。結果鑒定出治療組13個差異表達大于2倍的蛋白質，其中有8個上調(diào)，5個下調(diào)。結論益智健腦顆粒可調(diào)節(jié)SAMP8小鼠海馬組織的多種蛋白質表達,提示該藥具有多靶點治療的作用。

【關鍵詞】益智健腦顆粒；SAMP8小鼠；海馬；雙向凝膠電泳；質譜分析

益智健腦顆粒是董克禮教授多年臨床實踐治療阿爾茨海默病(AD)的中藥處方，臨床上用于治療AD之腎虛血瘀型,取得滿意療效〔1〕，動物實驗研究能改善SAMP8小鼠的學習記憶能力〔2〕。本研究則在臨床觀察及前期動物實驗的基礎上，應用蛋白質組學技術鑒定益智健腦顆粒干預前后P8品系快速老化小鼠(SAMP8)海馬組織的差異表達蛋白質，試圖從蛋白質組水平探討中藥益智健腦顆粒治療AD的作用機制，為臨床用藥提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1動物及分組選用6月齡20只雄性SAMP8小鼠，隨機分為治療組和對照組,每組各10只，由天津中醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院動物部提供。

1.2藥物、試劑與儀器益智健腦顆粒由淫羊藿、鎖陽、川斷、田七等組成，其水提濃縮液，相當于1ml含3g生藥，由湖南德康制藥有限公司加工制成。雙向凝膠電泳試劑：2DQuantKit蛋白定量試劑盒，尿素，硫脲，NP40，TritonX100，二硫蘇糖醇，碘乙酰胺，固相pH梯度干膠條（pH3～10，24cm），IPG緩沖液（pH3～10），兩性電解質（pH3～10），覆蓋液，雙向凝膠電泳標準蛋白質，考馬斯亮藍G250,溴酚藍均為瑞典AmershamBiosciences公司產(chǎn)品；瓊脂糖，過硫酸氨,丙烯酰胺，甲叉雙丙烯酰胺，甘氨酸，三羥甲基氨基甲烷，CHAPS和十二烷基硫酸鈉，碳酸氫銨，三氟乙酸、乙腈和基質α氰基4羥基肉桂酸均為美國SigmaAldrich公司產(chǎn)品。胰蛋白酶，美國Promega公司產(chǎn)品。PDQuest雙向凝膠圖譜分析軟件是美國BioRad公司產(chǎn)品，MascotMS/MS數(shù)據(jù)庫查詢軟件是英國Matrixscience公司產(chǎn)品，IPGphor等電聚焦儀，Imagescanner掃描儀均為瑞典AmershamBiosciences公司產(chǎn)品，DataExplorer質譜分析軟件，VoyagerDESTR4307MALDITOFMS質譜儀是美國AppliedBiosystem公司產(chǎn)品。

摘要：目的觀察鉛、硒對原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元生長及存活的影響，研究硒對鉛的神經(jīng)細胞生長抑制的拮抗作用。方法建立新生Wistar大鼠海馬神經(jīng)元原代無血清培養(yǎng)技術，通過PbCl2,Na2SeO3單獨及聯(lián)合作用，觀察神經(jīng)細胞的生長和存活情況。結果10-5mol/L鉛明顯抑制了原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元突起生長，引起神經(jīng)元存活率下降；單獨硒(2×10-6mol/L)有明顯促進海馬神經(jīng)元突起生長的作用，尤其在神經(jīng)元突起生長早期；但對海馬神經(jīng)元存活率的影響不明顯。鉛和硒共同孵育時，培養(yǎng)早期硒能拮抗鉛對神經(jīng)元突起延伸的抑制，但隨著培養(yǎng)時間延長，這種拮抗作用消失；從神經(jīng)元存活率來看，在實驗劑量下，未見硒能拮抗鉛對神經(jīng)元存活的抑制作用。結論鉛具有抑制神經(jīng)元生長和存活的毒性，本實驗劑量下的硒在細胞培養(yǎng)早期有促進神經(jīng)元突起生長和拮抗鉛對神經(jīng)元生長和存活的抑制作用。

【關鍵詞】鉛；硒；海馬；神經(jīng)元；神經(jīng)突起

鉛具有顯著的神經(jīng)發(fā)育毒性。毒理學實驗和人群流行病學調(diào)查表明，鉛能對神經(jīng)系統(tǒng)造成不可逆性損害，嚴重損壞海馬神經(jīng)元，影響學習、記憶及行為發(fā)育〔1，2〕。硒有防止鉛吸收和加速其排泄的作用，因此，硒有可能成為有效防治鉛神經(jīng)毒性的重要資源〔3〕。為了解硒拮抗鉛神經(jīng)毒性的效果和研究其拮抗作用機制，同時也為更多有效地利用硒，本試驗對體外原代培養(yǎng)的Wistar乳鼠海馬神經(jīng)元進行低劑量PbCl2和Na2SeO3染毒，觀察低水平鉛、硒單獨和聯(lián)合作用對神經(jīng)細胞生長和存活的影響。

1材料與方法

11材料

111試劑解剖液、種植培養(yǎng)液、無血清培養(yǎng)液［由98%Neurobasal培養(yǎng)基和2%B27(美國Gibco公司)無血清培養(yǎng)基添加劑和1%的青霉素、鏈霉素和005mol/L的谷氨酰胺(美國Sigma公司)組成］；胰酶、DNaseⅠ、左旋多聚賴氨酸和臺盼蘭(美國Sigma公司)；PbCl2(上海試四赫維化工有限公司)；Na2SeO3(天津化學試劑研究所)。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)抗體和神經(jīng)絲蛋白(NF)抗體(北京中山生物技術有限公司)。

【關鍵詞】氟西汀;細胞培養(yǎng);海馬神經(jīng)元;大鼠

氟西汀是5-羥色胺（5-HT）再攝取抑制劑之一，是應用較廣的抗抑郁藥。氟西汀除有抗抑郁作用外，尚可治療其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。有研究表明，氟西汀對海馬的神經(jīng)保護作用是其發(fā)揮抗抑郁效應的機制之一［1］。關于氟西汀對體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元生長的影響未見報道，本研究初步探討了氟西汀對原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元生長的影響。

1材料與方法

1.1新生大鼠海馬神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)

技術方法在參考文獻［2］基礎上加以改進。取出生24h內(nèi)的新生SD大鼠（東南大學醫(yī)學院動物實驗中心提供），無菌分離出雙側海馬，用顯微剪剪碎，D-Hank''''s液清洗2或3次，將剪碎的海馬組織轉移至離心管中，加入等量0.25%的胰酶（美國Sigma公司），37℃消化30min，中間振搖1或2次，加入10%的DMEM/F12（美國Gibco公司）5ml，輕輕吹打15次，然后1000r·min-1離心5min，制成單細胞懸液，置于CO2培養(yǎng)箱（德國Heraeus公司產(chǎn)品）中，差速貼壁30min，去除成纖維細胞，吸取未貼壁的細胞，并用200目的不銹鋼濾網(wǎng)過濾，收集過濾后的單細胞懸液于培養(yǎng)皿中，然后至離心管中，取一滴單細胞懸液進行計數(shù)，并用DMEM/F12將細胞密度調(diào)到1×106ml-1，然后接種于200μg·ml-1多聚賴氨酸（美國Sigma公司）包被的6孔培養(yǎng)板中，轉移至培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，4h后換為無血清培養(yǎng)基，即含2%B27的Neurobasl培養(yǎng)基（美國Gibco公司），以后每3天半量換液1次。使用培養(yǎng)6d的神經(jīng)元進行染色鑒定。

1.2大鼠海馬神經(jīng)元的鑒定

摘要：海馬體照相館能在較短時間內(nèi)在業(yè)界競爭者中脫穎而出并迅速擴張和獲得成功，靠的是營銷創(chuàng)新。其成功秘訣是：抓住傳統(tǒng)影樓進入疲態(tài)期的契機，精準細分市場；鎖定目標市場進行“精致證件照”的精準定位；通過成功質量管理有效提升顧客滿意度；采取加盟形式加快擴張，短期內(nèi)提高市場占有率。

關鍵詞：人像攝影；海馬體照相館；市場細分；情感營銷

一、海馬體照相館的發(fā)展概況

近年來，隨著國民經(jīng)濟的進一步發(fā)展，我國人像攝影行業(yè)不斷發(fā)展壯大。2016年，全行業(yè)總收入3168．7億元，同比增長17．1％。行業(yè)經(jīng)營單位41．6萬家，同比增長3％。從業(yè)人員602萬人，同比增長0．9％，新增就業(yè)5．2萬人。人像攝影業(yè)營業(yè)額占全年國內(nèi)生產(chǎn)總值74．4萬億元的0．4％，新增就業(yè)人數(shù)占全國城鎮(zhèn)新增就業(yè)人口1314萬人的0．4％＇據(jù)不完全估計，2017年人像攝影業(yè)行業(yè)收入增加576．7億元，達3745．4億元，同比增長18．2％；行業(yè)經(jīng)營單位43．6萬家，同比增長5％；從業(yè)人員609．22萬人，同比增長1．2％，新增就業(yè)7．22萬人＇由此可見，人像攝影行業(yè)已經(jīng)成為促進我國經(jīng)濟增長、提升就業(yè)率、提高人民物質生活和精神生活品質的重要行業(yè)。在人像攝影行業(yè)為國家“穩(wěn)增長、惠民生、保就業(yè)、促和諧”大發(fā)展的同時，行業(yè)內(nèi)的一匹黑馬以其強勁的發(fā)展勢頭引人關注：2011年11月10日，海馬體照相館母公司——杭州縵圖攝影有限公司成立，主營攝影業(yè)務，致力于為顧客提供極致的拍攝體驗與優(yōu)質的攝影服務。目前，旗下已有包括“HIMO海馬體照相館”“HIMOKIDS海馬體照相館兒童”“縵圖攝影”“WINDC－CI”“HIMOBUSINESS”、HIMOMASTER、縵圖云端、縵圖萊思學院8大品牌。自創(chuàng)業(yè)以來，海馬體照相館覆蓋了52座城市，落地門店157家，坐擁350多萬顧客。海馬體照相館如何能在較短時間內(nèi)在業(yè)界競爭者中脫穎而出，并迅速擴張獲得成功，其經(jīng)驗值得業(yè)界分析思考并借鑒。

二、海馬體照相館的成功秘訣剖析

（一）抓住傳統(tǒng)影樓進入疲態(tài)期的契機，精準細分市場。在市場競爭愈加激烈的環(huán)境下，沿襲臺灣模式的傳統(tǒng)影樓和當前部分所謂改進版的新型影樓，行業(yè)模式無大的創(chuàng)新，拍攝技術水平低、服務同質化，市場競爭又趨于白熱化，導致惡性競爭升級，低水平價格競爭加劇，價格戰(zhàn)成為唯一的競爭工具，各服務環(huán)節(jié)二次消費成為潛規(guī)則，行業(yè)誠信度和口碑欠佳。影樓經(jīng)營開始陷入“低價搶客—流水線式拍照—客戶投訴率高—口碑差—增加流量成本低價搶客—企業(yè)凈利潤降低—生存困難”的惡性經(jīng)營模式，不少影樓都面臨被淘汰的危機。影樓進入疲態(tài)期為新型人像攝影模式提供了契機，海馬體照相館緊抓契機，深入調(diào)查市場，對人像攝影市場進行精準細分。（二）鎖定目標市場進行“精致證件照”的精準定位。海馬體照相館對年輕消費群體調(diào)查發(fā)現(xiàn)，像證件照、結婚登記照這些意義非凡的“小照片”，傳統(tǒng)影樓低品質的流水線式制作，讓很多消費者得不到滿意的成品。而像職場形象照這樣的“大照片”，影樓卻又把簡單的事情復雜化了，明明每次只需要兩張照片，但按照傳統(tǒng)影樓的規(guī)矩，消費者必須專門到影樓拍許多底片，不僅花了一大筆錢，費時費力不說，效果也不好。基于市場調(diào)查結果，海馬體照相館將目標市場精準鎖定“精致證件照”的細分市場，主營證件照、形象照、文藝照、全家福等。從證件照出發(fā)，成功孵化出了“全年主打”和“限時記憶”兩條產(chǎn)品線。全年主打包括證件照、簽證照、結婚登記證、職業(yè)形象照等多種形象展示型的照片；限時記憶則包括圣誕照、新年照等系列。無論是全年主打還是限時記憶，海馬體照相館要做的都是“成為你記憶中轉站，留下片刻的你”。為此，海馬體照相館采用“把原來的小照片做重，把原來的大照片做輕”的方式，將小照片通過化妝、更衣、拍攝、后期處理等各種各樣服務的升級，使品質更精致、服務更到位、照片更具觀賞性和保存價值。大照片則在海馬體門店通過比較簡潔的方式，用兩三個小時拍攝完成，大大降低了原來影樓的高門檻，同時還提高了拍攝的品質。由此，海馬體照相館成功抓住了傳統(tǒng)影樓的疲態(tài)期，從證件照細分市場出發(fā)，將細分市場做精做專，成為行業(yè)翹楚。（三）通過成功質量管理有效提升顧客滿意度。現(xiàn)代管理學之父彼得？德魯克曾說過：“企業(yè)目標唯一有效的定義是創(chuàng)造顧客。”在市場競爭激烈的今天，企業(yè)間的競爭本質上是對顧客資源的爭奪。而質量是開發(fā)顧客、維護顧客、提高顧客忠誠度的最有效保證。海馬體照相館能在短期內(nèi)獲得行業(yè)標桿的地位與其嚴格的質量管理密不可分。海馬體照相館從優(yōu)化服務流程設計開始，環(huán)環(huán)相扣，層層把關，成功地完成質量管理。其服務流程是：微信客戶端預約—微信客戶端買單—約定時間到店—現(xiàn)場化妝造型—專業(yè)拍攝樣片—本人選片—上傳公司云端專業(yè)修圖師精修—根據(jù)顧客意見門店第二輪精修—顧客最終滿意成片—顧客在微信端下載成片并評價服務—引導顧客分享到社交平臺。從流程設計來看：一是微信平臺預約大大方便了顧客，使其可以更合理地安排時間，不用把大量時間花在等待上，大大降低了顧客的時間成本，提升了顧客的感知價值。二是在化妝造型環(huán)節(jié)，向顧客提供知名品牌的化妝品、充足的卸妝濕巾及各種適宜款式的服裝，將細致的基礎服務做到最優(yōu)化，讓顧客體驗到更高的服務價值，進一步提升顧客的整體感知價值。三是照片必須經(jīng)過兩輪專業(yè)精修并最終以顧客滿意為標準，方能成片的品質標準，有效地保證了照片質量和顧客滿意度。四是微信下載成片一改傳統(tǒng)店鋪用U盤拷底片這一極不方便又容易丟失的做法，顧客隨時可以下載成片，方便快捷且永久保存，大大提升了顧客感知產(chǎn)品的可靠性，進一步提升了顧客的感知價值。五是提供美甲、咖啡等服務，使得顧客在等待過程中降低了精神成本、體力成本，同時提高了感知服務的多樣性，再次提升了顧客的感知價值。六是在整個服務流程中，從前期預約到化妝拍攝、修片和評價體系，每一個流程都有不同的專業(yè)人員負責，員工權責明確，各司其職，以高標準的專業(yè)化素養(yǎng)保證每一環(huán)節(jié)達到預期效果。不僅讓顧客360度體驗了“最美證件照”整個過程，也展現(xiàn)了企業(yè)的服務態(tài)度、完善了員工服務情況的監(jiān)督，獲得了顧客的好評。據(jù)調(diào)查，92．6％的顧客認為照片質量是“最美證件照”主題工作室的關鍵因素。增值類服務的多樣性、預約的便捷程度、工作人員服務態(tài)度，都是影響顧客滿意度的因素，占的比重依次為53．4％、48．2％、47．6％。從中可以發(fā)現(xiàn)對于顧客而言，“最美證件照”攝影工作室應該具備的要素除了擁有較高的攝影水準外，還需要具備預約便捷、服務優(yōu)質等特質。與傳統(tǒng)照相館相比，海馬體照相館顧客滿意度相對較高，達83．6％，且有65％的顧客在體驗過后愿意將海馬體照相館推薦給他人＇（四）加盟形式加快擴張，短期內(nèi)提高市場占有率。海馬體照相館主營證件照、簽證照、全家福、寵物照、輕婚紗、結婚照等。這幾種產(chǎn)品的拍攝手法、燈光、以及pose都可以標準化。與婚紗攝影相比，對攝影師的技術要求相對簡單，可通過快速的培訓進行復制，并保證各個店鋪照片效果統(tǒng)一。符合海馬體照相館加盟條件，投資20萬？50萬元后即可加盟。海馬體照相館總部會提供包括互聯(lián)網(wǎng)支持、全方位的培訓、管理，以總部代運營的模式使雙方成為利益共同體。營銷與產(chǎn)品創(chuàng)新由總部專業(yè)團隊負責整體規(guī)劃，并提供專業(yè)選址團隊幫助進駐當?shù)睾玫纳虉觯€有精準的財務數(shù)據(jù)分析支持。自海馬體照相館哈爾濱店開業(yè)起，便開啟了全國連鎖經(jīng)營模式。在全國不斷擴張發(fā)展，遍布一二線城市，并不斷提升技術與服務。加盟形式不僅整合優(yōu)化了資源，建立了一套快速復制拓展盈利的模式，也加快了海馬體照相館在國內(nèi)人像攝影市場的擴張步伐，為海馬體成為全國知名攝影品牌起了關鍵作用。

【摘要】目的觀察HPK1對SD大鼠全腦缺血/再灌注后海馬CA1區(qū)錐體細胞的作用。方法采用四動脈結扎法建立大鼠全腦缺血模型,缺血15min后分別灌注30min、3h、6h、24h、3天和5天。大鼠隨機分為假手術組、缺血/再灌注組、缺血/再灌注給藥組和缺血/再灌注溶劑對照組。缺血/再灌注給藥組再分為2組，分別腦室注射100g/L的HPK1AS-ODNs、HPK1MS-ODNs，每24h注射1次，連續(xù)3天，在最后一次注射24h后行四動脈結扎全腦缺血。使用免疫沉淀和焦油紫染色法等技術檢測相關信號蛋白的表達、活化水平及神經(jīng)元細胞的死亡。結果在大鼠海馬神經(jīng)元中有HPK1的表達，腦室注射AS-ODNs大鼠海馬CA1區(qū)存活錐體細胞明顯增多。結論HPK1反義寡核苷酸對缺血/再灌注引起的海馬神經(jīng)元凋亡具有保護作用。

【關鍵詞】造血祖細胞激酶1;反義寡核苷酸;海馬；凋亡；大鼠

TheroleofHPK1inischemicbraininjury

LITing,ZHANGGuangyi*

(ResearchCenterforBiochemistryandMolecularBiology,JiangsuKeyLaboratoryofBrainDisease

Bioinformation,XuzhouMedicalCollege,Xuzhou,Jiangsu221002,China)

【摘要】目的：探討基底外側杏仁核（BLA）離體腦片場電位的記錄及其應用.方法：制備杏仁核腦片，在腦片上記錄場電位,觀察其藥理學特性并引導杏仁核的長時程增強（LTP）.結果：在腦片保持良好活性及記錄系統(tǒng)噪音幅度小于0.01mV的前提下，應用國產(chǎn)微電極放大器及記錄系統(tǒng)即可記錄到穩(wěn)定可靠的杏仁核場電位,大小約為海馬CA1場電位的1/10；在灌流液中加入α氨基羥甲基惡唑丙酸（AMPAR）受體拮抗劑氰基2硝基喹啉2，3二酮（CNQX）10μmol/L和N甲基D天冬氨酸（NMDAR）受體阻斷劑D，L2氨基5磷酸基戊酸(APV)100μmol/L后，場電位幾乎完全被阻斷.應用兩串高頻刺激（間隔10min）刺激外囊，在BLA可引導LTP.結論：杏仁核腦片可記錄到穩(wěn)定可靠的場電位，適用于研究杏仁核的突觸可塑性等功能及探討杏仁核在神經(jīng)疾病中的作用及其機制.

【關鍵詞】杏仁核；場電位；長時程增強

0引言

杏仁核與學習記憶、情緒、情感密切相關［1］，而且參與精神分裂癥、抑郁、癲癇和創(chuàng)傷后應激障礙等多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程［2-3］.然而杏仁核深藏于大腦深部，被復雜精細的神經(jīng)結構包繞［4］，很難直接探測到杏仁核神經(jīng)元的活動.腦片是研究杏仁核功能比較理想的標本.腦片上記錄神經(jīng)細胞的活動方式主要有膜片鉗、傳統(tǒng)的細胞內(nèi)和場電位記錄，前兩者對儀器設備要求較高，而場電位記錄對設備要求相對簡單，并可以反映神經(jīng)細胞的功能狀態(tài)，易于推廣.我們采用國內(nèi)的設備系統(tǒng)，制備杏仁核腦片，在腦片上記錄場電位,觀察其藥理學特性并引導杏仁核的長時程增強（longtermpotentiation，LTP），以探討杏仁核場電位的記錄及其應用.

1材料和方法

1.1材料健康SD大鼠24只，雄性，體質量200～250g（福建醫(yī)科大學實驗動物中心），所有動物均在12h光照/黑暗周期環(huán)境中飼養(yǎng)，自由攝食及飲水.D，L2氨基5磷酸基戊酸(APV),氰基2硝基喹啉2，3二酮(CNQX),谷氨酸(美國Sigma公司)；微電極放大器,RM6240數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)（成都儀器廠），其余化學產(chǎn)品均為國產(chǎn)分析純.

【摘要】目的研究銀杏葉提取物(EGb)對點燃模型幼鼠學習記憶等認知功能，對大鼠海馬乙酰膽堿酯酶（AChE）、膽堿乙酰轉移酶（ChAT）活性的影響。方法21、35日齡SD大鼠各40只，經(jīng)初篩后隨機分為生理鹽水對照組、點燃對照組及EGb大、中、小劑量治療組，采用戊四氮（PTZ）誘導幼鼠點燃模型，以Y型電迷宮及生化檢測方法，觀察用藥前后大鼠學習記憶功能和海馬AChE、ChAT活性的變化。結果EGb呈劑量依賴性顯著改善實驗大鼠的學習記憶能力,并顯著抑制海馬AChE活性、增強ChAT的活性。結論EGb可以通過抑制功能腦區(qū)AChE活性、增加ChAT的活性,增強中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)的功能，改善發(fā)育期癲疒間大鼠學習記憶功能。

【關鍵詞】銀杏葉提取物；學習記憶；乙酰膽堿酯酶；膽堿乙酰轉移酶；點燃模型；大鼠

EffectofextractsofGinkgobilobaleafonthelearning-memoryabilityandtheactivity

ofAChEandChATinthehippocampusinratswithkindling-inducedepilepsy

DUANFangrong,YUANBaoqiang*

(DepartmentofPediatrics,TheAffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege,Xuzhou,Jiangsu221002,China)

關鍵詞：老年人前額葉(PF)記憶障礙

額葉是大腦發(fā)育中最高級的部分，它包括初級運動區(qū)、前運動區(qū)和前額葉(prefrontalcorte,PF)，其中PF與認知功能關系密切。前額葉又分為眶部、背部、內(nèi)側部和外側部，其中眶部和內(nèi)側部、背部和外側部的結構和功能較為接近。

PF與大腦其它區(qū)域有著密切關系。PF和所有的感覺區(qū)都有往返的纖維聯(lián)系，其眶后部和腹內(nèi)側部有投射到海馬旁回和海馬前下腳的纖維，組成了內(nèi)側顳葉-間腦系統(tǒng)的一部分；PF與紋狀體、杏仁核、顳葉、枕葉和頂葉等腦區(qū)的聯(lián)系也很密切〔1，2〕，因此，PF與多種感覺信息的加工、記憶、思維及情緒等腦的高級功能有關。從細胞水平來看，PF神經(jīng)元具有多感覺性質，它們參與多種信息的加工；同時，PF神經(jīng)元具有柱狀組織，表現(xiàn)為功能異質性，如一些PF神經(jīng)元在延緩反應的延緩期放電明顯增加，而另一些神經(jīng)元對行為的其它特性更為敏感〔3〕。PF神經(jīng)元的這些結構和功能上的特點是其在記憶中起重要作用的神經(jīng)基礎。

行為研究也證實PF與記憶功能有密切關系，包括工作記憶、源記憶、順序組織、前攝抑制釋放(PI)能力、抑制無關信息的干擾、元記憶、組織和計劃有意識的活動、問題解決等〔1，2〕。West〔4〕認為PF的功能包括：(1)工作記憶；(2)期待性記憶，依據(jù)工作記憶對相應的內(nèi)外線索反應；(3)控制干擾，抑制與任務無關的表征；(4)抑制優(yōu)勢反應，使行為不受先前反應或主要的環(huán)境刺激影響。功能(1)，(2)，(4)由背外側前額葉(dPFC)支持，功能(3)主要由PF眶部或內(nèi)側部完成。West的這一觀點可以說明一些與前額葉有關的行為特點，如選擇與任務相關的信息，將語義和時空信息結合成穩(wěn)定的記憶痕跡，計劃、組織復雜行為等，因而具有一定的參考價值。

1與額葉有關的老年記憶功能障礙

記憶障礙是正常老年人的常見主訴，老年人的再認和回憶等測驗成績均較年輕人低。但不同形式的記憶下降并不一致，老年人的外顯記憶下降大于內(nèi)隱記憶；在外顯記憶中，再認成績又好于自由回憶。老年記憶障礙與前額葉受損、內(nèi)側顳葉受損的表現(xiàn)有許多相似之處，其中，越來越多的證據(jù)表明，老年記憶力下降與額葉功能有密切關系〔5～7〕，PF參與的記憶功能比其它腦區(qū)，如內(nèi)側顳葉系統(tǒng)支持的記憶功能更早下降。一項研究證明，在12項測定PF功能的測驗中，平均年齡為56.62歲的被試有10項比27.71歲的成績差〔4〕。

【摘要】目的觀察鋁負荷大鼠腦組織單胺氧化酶B(MAOB)的活性與表達改變，并探討尼莫地平對該動物模型的影響。方法采用三氯化鋁（AlCl3）(400mg/kg)灌胃大鼠，1次/d，5d/w，持續(xù)3個月，建立鋁負荷致大鼠慢性腦損傷的動物模型，尼莫地平(80mg/kg)在每次鋁給予4h后灌胃，觀察行為學、生化酶學、MAOBmRNA及蛋白表達水平等指標的變化。結果鋁負荷能明顯導致大鼠被動回避性學習記憶能力和空間識別能力障礙，使其腦組織乙酰膽堿轉移酶(ChAT)活性顯著降低(P＜0.01)，而膽堿酯酶(AchE)活性顯著升高(P＜0.01)，超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著降低(P＜0.01)，而丙二醛（MDA）含量顯著升高(P＜0.01)，MAOB活性與MAOBmRNA及蛋白表達水平顯著增加(P＜0.01)；NMDP能明顯改善鋁負荷大鼠的學習記憶能力障礙，明顯阻遏鋁負荷大鼠海馬組織ChAT與SOD活性的降低，AchE活性與MDA含量的增高，MAOB活性及其mRNA與蛋白表達的增加。結論鋁負荷致大鼠腦損傷涉及腦組織的MAOB活性與表達改變；NMDP可能降低鋁負荷大鼠腦組織MAOB表達和活性，并增加SOD活性，減少自由基而保護大鼠慢性腦損傷。

【關鍵詞】尼莫地平；鋁負荷大鼠；單胺氧化酶B

由于阿爾茨海默病（AD）發(fā)病機制未明，目前尚缺乏理想的治療手段。尼莫地平是雙氫吡啶類鈣通道拮抗劑，脂溶性高，易通過血腦屏障，其擴張腦血管，改善腦血供應等作用已得到肯定并應用于臨床，而其對老年癡呆認知記憶障礙的改善作用〔1〕，機制至今仍不很清楚。有研究報道單胺氧化酶B（MAOB）的活性改變與神經(jīng)元損傷和神經(jīng)元退變可能有密切關系〔2，3〕。為探討尼莫地平在改善老年癡呆等導致的認知記憶障礙中的作用，本研究擬采用鋁負荷大鼠腦損傷模型，觀察腦損傷學習記憶障礙與腦組織MAOB改變的關系及尼莫地平對鋁損傷大鼠腦組織MAOB表達的影響，為神經(jīng)元退行性疾病的發(fā)病機制研究奠定實驗與理論基礎，為防治藥物的開發(fā)探尋新方法與新途徑。

1材料與方法

1.1動物與分組清潔級3月齡Wistar大鼠100只，雄性，180～220g，由重慶醫(yī)科大學動物實驗中心提供〔動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(渝)2005002〕。按體重隨機分成3組，每組10只，即空白對照(溶劑為0.5%羧甲基纖維素鈉)組，鋁模型(AlCl3400mg/kg)組與尼莫地平組(80mg/kg)，灌胃容積1ml/100g體重。在實驗過程中，鋁模型組死亡2只鼠。

1.2方法