乳腺癌端粒酶診斷技術論文

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目前已公認乳腺癌是一種全身性疾病，在其早期即有轉移，因此，探索提高乳腺癌術前確診率的診斷方法對于提高乳腺癌的治療效果有重要意義。端粒酶是近年發現的一種具有一定特異性的腫瘤標記物，是一種含有蛋白質和端粒。互補，的核糖核蛋白酶，也是一種逆轉錄酶。幾乎在所有的人類原發惡性腫瘤中均可檢測到端粒酶活性，而在惡性腫瘤起源的正常組織細胞中則大多檢測不到端粒酶活性。這使端粒酶作為一種新的腫瘤標記物應用于臨床成為可能。我們對，例患者的乳腺腫塊分別行穿刺細胞端粒酶活性檢測和光鏡細胞學檢查，對比了兩種方法的診斷準確率，研究了乳腺腫瘤生物學特性與端粒酶活性表達的相關性，從而對端粒酶活性檢測的臨床應用價值和提高乳腺癌術前確診率的新方法進行了探討。

一、資料與方法

1，一般資料

乳腺腫塊患者，在我院普外科病房接受治療的女性患者，患者均在檢查后，內手術。經術后病理證實，乳腺癌例，乳腺良性腫塊例，乳腺腫塊直徑。

2，主要試劑及儀器

端粒酶活性檢測采用山東醫科大學生命科學技術研究中心提供的微量穿刺標本端粒酶檢測試劑盒，主要成分包括，**。公司，引物，華美生物工程公司合成，**酶公司。≤，擴增采用美國∞公司產的，型熱循環儀。電泳采用北京六一儀器廠生產的電泳儀及電泳裝置。

3，研究方法

術前行乳腺腫塊穿刺，穿刺標本一部分作細胞涂片，其余注入裝有°，≥液，主要成分包括≤，≤，∞。管中，置于，ε保存，以備端粒酶活性檢測用。涂片采用瑞氏2姬姆薩染色法，分別在和倍光鏡下觀察。查見癌細胞者為陽性，未查見癌細胞或查見異型細胞但不能確診為癌細胞者為陰性。

端粒酶活性檢測采用端粒重復擴增法，將注入穿刺標本的∞。管離心后收集細胞，加入裂解液，冰浴后在，ε條件下離心，取全部上清液加樣。

向裝有反應液的∞。管中加入全量待測的上清液，或陽標混勻。向反應管中加入引物，度帶者為端粒酶活性陽性。

4，統計學處理

兩種診斷方法診斷率的比較采用Υ檢驗，端粒酶活性表達與乳腺腫瘤生物學活性的相關性分析采用。

二、結果

1，乳腺腫塊術后病理結果

乳腺腫塊患者為乳腺癌，例為乳腺良性病變。穿刺標本端粒酶活性檢測采用**。法，應用陽性對照和陰性對照，以出現條，梯度帶者為端粒酶活性陽性。

2，術前細胞學檢查結果和端粒酶檢測結果。

3，兩種檢測方法的靈敏度！特異性！約登指數和陽性預測值結果

如表所示。端粒酶活性檢測同細胞學檢查相比，靈敏度，Υ，1，Π，1，顯著增高，特異性，Υ，1，Π，1，！約登指數，Υ，1，Π，1，和陽性預測值，Υ，1，Π，1，差異無顯著性意義。

4，端粒酶活性檢測和細胞學檢查聯合診斷乳腺腫塊結果

如表所示。在例乳腺癌患者中，兩種檢測方法均為陽性的例，故聯合診斷乳腺癌靈敏度為1，聯合診斷方法均為陽性的例患者，病理證實均為乳腺癌，故聯合診斷的陽性預測值為，顯著高于陽性預測值較高的細胞學檢查，Υ，1，Π，1，可以術前確診。

5，乳腺癌端粒酶活性表達與患者年齡

無顯著相關性，但隨著腫瘤長徑的增加，端粒酶陽性率呈上升趨勢。乳腺癌雌激素受體陽性者和孕激素受體陽性者乳腺腫塊端粒酶陽性率分別顯著高于雌激素受體陰性者。

6，乳腺良性病變類型與端粒酶活性關系

如表所示。乳腺纖維腺瘤和乳腺病的端粒酶陽性率顯著高于其他乳腺良性病變。

三、討論

端粒酶自身攜帶模板是端粒酶的一個重要特征。端粒酶維持著端粒的長度和穩定性。端粒酶的激活可導致細胞無限增殖，與細胞癌變有直接關系。而且研究已發現端粒酶活性表達在惡性腫瘤中具有一定特異性，許多學者發現在乳腺癌中端粒酶陽性率可達，因此能否將端粒酶活性檢測用于乳腺癌的術前診斷已引起學者們的重視。

1，端粒酶活性檢測在乳腺癌中的表達，我們在，例乳腺腫塊中進行腫塊穿刺標本細胞學檢查和端粒酶活性檢測，將端粒酶檢測乳腺癌的診斷結果同乳腺癌目前臨床常用的診斷方法細胞學檢查進行了對照，結果顯示，兩種方法的特異性！約登指數和陽性預測值差異無顯著性意義，而靈敏度則端粒酶檢測顯著高于細胞學檢查。在本組中，乳腺癌患者癥狀！體征均不典型，細胞學檢查陰性，端粒酶活性檢測則為陽性。這表明，細針穿刺端粒酶活性檢測很可能作為一種靈敏度較高的新方法應用于乳腺癌的術前診斷。

2，這種新方法具有以下優點靈敏度高，由于采用了技術，微量癌細胞即可得出陽性結果客觀性強，采用陽性對照判斷結果，較少受檢查者主觀影響創傷小，應用方便，便于普查，易于為患者接受。但也有不足之處，受穿刺技術影響，可能出現假陰性結果，采用技術，稍有污染，可出現假陽性結果。公務員之家

3，端粒酶活性檢測和細胞學檢查聯合術前診斷乳腺癌的價值，本研究顯示，當端粒酶和細胞學均為陽性時的陽性預測值達，顯著高于陽性預測值較高的細胞學檢查，可達到術前確診的水平。端粒酶活性表達與乳腺腫瘤生物學特性的相關性，等發現端粒酶活性與形態學分級！雌激素受體和孕激素受體表達顯著相關，但與腫瘤分期或淋巴結轉移情況無明顯差異。研究認為端粒酶表達與性激素受體水平！。倍性及淋巴結狀況有關。而，等和等則認為乳腺癌淋巴結轉移情況與端粒酶活性無關。認為端粒酶表達與腫瘤大小！淋巴結轉移情況和腫瘤分期顯著相關。

本研究顯示，端粒酶活性與性激素受體表達顯著相關，但與患者年齡，腫瘤長徑，腋淋巴結轉移情況無顯著相關。此外，在乳腺良性病變中，與雌激素密切相關的乳腺纖維腺瘤和乳腺病端粒酶活性表達率顯著高于與雌激素無明顯關系的其他乳腺疾病。這些提示端粒酶的活性表達可能與雌激素相關，受雌激素的調節。