榿葉唐棣組培快繁生產技術分析

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榿葉唐棣是薔薇科唐棣屬一種落葉小喬木或灌木，原產于北美洲從阿拉斯加中部到科羅拉多的落基山脈地區。其果實為漿果狀梨果，含有多種營養成分，可稱之為高鈣植物。果實可加工或鮮食，主要用于釀酒、食品、藥品等。其樹型美觀大方，花、果頗為俏麗，具有一定的觀賞價值，可作為園林綠化樹種栽培。研究以榿葉唐棣腋芽為外植體，通過組織培養快繁技術，在較短時間內達到了高效誘導外植體分化增殖和高質量保證幼苗成活的目的，并且保存了母體的全部優良性狀，遺傳性狀穩定。

1試驗材料與方法

1．1無菌體系建立。以70％乙醇（消毒時間為20s與30s）為表面消毒劑，分別加入5％次氯酸鈉（滅菌時間為15min與30min）、10％次氯酸鈉（滅菌時間為10min與20min）和0．1％升汞（滅菌時間為6min與10min）為浸泡消毒劑，接種100瓶，共設12個處理（見表1）。采用MS培養基為基礎培養基，附加少量植物生長調節劑IBA、6－BA，培養條件為蔗糖3％，瓊脂0．65％，溫度22～25℃，光強2000lx，光照14h／d。定期觀察結果。1．2試管苗初代培養。將切取帶腋芽的莖段在無菌條件下接種到以MS為基礎培養基，附加0．1～1．0mg／L濃度的6－BA和0．05mg／L濃度的IBA的誘導培養基中，重復100次隨機取50次未污染的莖段，共10個處理（見表2），培養條件為蔗糖3％，瓊脂0．65％，溫度22～25℃，光強2000lx，光照14h／d，定期觀察腋芽分化狀況。1．3試管苗繼代培養。選取腋芽培養分化后的試管苗，在無菌環境下接種到以MS為基礎培養基，附加0．2～1．0mg／L濃度的6－BA和0．05～0．1mg／L濃度的IBA的繼代培養基中。每種培養基設計接種10瓶，每瓶接種3株試管苗。共10個處理（見表3），培養條件為蔗糖3％，瓊脂0．65％，溫度22～25℃，光強2000lx，光照14h／d，定期觀察腋芽分化狀況。1．4試管苗生根培養。選取繼代培養中生長健壯芽，在超凈臺上分離成單芽后，轉接到以1／2MS為基礎培養基，附加植物激素IBA不同濃度的6種培養基中（見表4）。培養條件為蔗糖2％，瓊脂0．65％，溫度22～25℃，光強2000lx，光照14h／d。每種培養基接種30個莖段，定期統計試管苗生根情況。

2試驗結果與分析

2．1無菌系建立中各消毒劑的用量分析。試驗結果表明，70％乙醇處理的時間在20s即可取得較好效果，時間過長則會出現脫水現象。用5％～10％次氯酸鈉處理20min以上才能達到消毒目的，但外植體多數出現褐變現象，而使用0．1％升汞處理榿葉唐棣莖段，只需浸泡6min就可能達到消毒目的，但為避免升汞的殘留對植物組織造成傷害必須用無菌水清洗5～6次，并用無菌濾紙吸干水分。2．2不同處理對試管苗腋芽萌發的影響。研究表明，0．5mg／L6－BA＋0．05mg／LIBA濃度的培養基誘導出的腋芽普遍生長健壯，葉片嫩綠，腋芽萌發數量和萌發率較高，為最適合的初代培養基（見表2）。2．3不同處理對試管苗繼代增殖的影響。當培養基為MS＋0．6mg／L6－BA＋0．1mg／LIBA時，每個芽新增芽數為6．5，芽多，葉片大，生長快，能更好的保持芽增殖數量與生長速度之間的平衡化（見表3）。2．4不同處理對試管苗生根的影響當培養基不加激素IBA時，榿葉唐棣試管苗也能生根，但生根率較低僅為55％，生根數量較少且根纖細易斷。當IBA濃度為0．1mg／L時，生根率提高到了98％，每株生根數達到5．5條，平均根長2．3cm，所生根較粗堅韌質量好。當IBA濃度增大到0．2～0．4mg／L時，雖然生根率達到了80～95％，但每株生根數下降到2．8～4．2條，根長度1．6～2．0cm，并且根基部愈傷組織較多。因此，生根培養基中IBA較合適的濃度應為0．1mg／L（見表4）。

3結論

榿葉唐棣的外植體先用70％乙醇處理20s，再使用0．1％升汞浸泡6min可取得較好的消毒效果；初代培養中，添加0．5mg／L6－BA＋0．05mg／LIBA的MS培養基誘導腋芽萌發效果最好；繼代培養中，添加0．6mg／L6－BA＋0．1mg／LIBA的MS培養基能更好的保持了芽增殖與生長之間的平衡；在生根試驗中，添加0．1mg／LIBA的1／2MS培養基，生根效果最好。

作者:樸凱偉 單位:撫順市現代農業及扶貧開發促進中心