三黃軟膏治療急性軟組織損傷論文

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三黃軟膏是浙江省中醫院的醫院制劑散瘀膏,在臨床應用30余年,治療急性軟組織損傷患者達數萬人,療效顯著［1］。本實驗通過提取散瘀膏藥物的有效成分，從損傷證候評估、損傷局部組織前列腺素E2(PGE2)的含量的測定來闡明其對急性軟組織損傷的療效，現將實驗結果報告如下。

1材料與方法

1.1實驗動物健康SD大鼠180±10g36只，雌雄各半，浙江醫學科學院實驗動物中心提供。飼養期間給予嚙齒類動物標準顆粒飼料及自由飲水。

1.2藥品及試劑①三黃軟膏由浙江中醫藥大學藥學院提供;②青鵬膏：西藏林芝奇正藏藥廠，批號：0703060239;③RatPGE2ELISAKit:美國Cayman公司。批號:180174。

1.3實驗動物造模及分組將實驗組30只SD大白鼠在實驗前一天用8%硫化鈉溶液雙腿去毛。實驗前一天禁食禁水。用3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉（注射劑量：1.5ml/kg），麻醉成功后將大鼠固定在自制打擊器上,將200g重的砝碼通過與砝碼直徑相當的塑料管中自20cm高處垂直自由落在大鼠小腿后側,踝關節上2.5cm處,連續打擊2次,打擊面積約1×2cm2，30min后可見打擊局部出現散在出血點,皮下瘀腫創面，但皮膚完整無破損且無骨折的急性軟組織損傷動物模型。將造模成功的大鼠半小時后按隨機數字表法分為模型對照組（B）6只,給予布膠外敷;基質對照組（C）6只,給予基質1.6g/kg，后用布膠固定;青鵬膏對照組（D）6只,給予青鵬膏1.6g/kg，后用布膠固定;三黃軟膏低劑量組（E）6只,給予三黃軟膏1.6g/kg，后用布膠固定;三黃軟膏高劑量（F）組各6只,給予三黃軟膏3.2g/kg，后用布膠固定。換藥1次/d。正常組（A）：給予正常飼養。

1.4損傷證候評估參考馮芳軍等［2］損傷證候指數，觀察傷肢腫脹和瘀斑等證候表現，并評分。①皮下瘀血:多量塊狀計2分，少量點狀計1分，無瘀血者計0分。②下肢腫脹:明顯腫脹計2分，稍有腫脹計1分，無腫脹者計0分。③皮膚顏色:紫暗色深計2分，暗紅色淺計1分，色澤正常計0分。計算總積分。每天觀察記錄1次。總積分＝（左腿積分＋右腿積分）/2。

1.5前列腺素E2(PGE2)含量的測定于造模后3d、5d分別于各組中任取3只大鼠處死，用手術刀切開大鼠受打擊部位皮膚，分離皮下組織，切取受打擊部位的中心（踝關節上2.5cm處）呈青紫色的肌肉組織，用生理鹽水漂洗1min，濾紙吸干，分析天平稱取100±5mg，每10mg組織加入生理鹽水0.5ml，于勻漿器中緩慢而均勻地研磨15min，至勻漿液呈均勻一致懸濁液，倒入試管中，在高速冷凍離心機以2500r/min離心15min，收集上清液，置-20℃冰箱中備用。用ELISA法測定PGE2的含量。具體操作步驟按照試劑盒要求完成。

1.6統計方法所有數據以“平均數±標準差”（x±s）表示，多組計量資料采用單因素方差分析，兩兩比較用LSD檢驗。所有統計學處理在SPSS13.0統計軟件上完成。

2結果

2.1損傷證候評估造模后第1天各組大鼠的損傷證候指數基本相同，組間比較無顯著性差異（P>0.05）；治療3d后，各組的損傷證候指數較造模1天后有所下降，同時D組、E組及F組的損傷證候指數明顯小于同期的B組和C組（P<0.05），而D組、E組及F組之間損傷證候指數基本相同，無顯著性差異（P>0.05），B組和C組之間損傷證候指數基本相同，無顯著性差異（P>0.05）；治療5d后各組的損傷證候指數較治療3d后有所下降，與同期的B組和C組相比，D組、E組和F組的損傷證候指數有明顯下降，顯著性差異明顯（P<0.05），而D組、E組及F組之間損傷證候指數基本相同，無顯著性差異（P>0.05），B組和C組之間損傷證候指數基本相同，無顯著性差異（P>0.05）。各組損傷指數見表1。

表1各組急性軟組織損傷治療后不同時期的損傷證候指數（略）

2.2大鼠局部PGE2的含量治療3d后，A組與B組、C組比較存在顯著性差異（P<0.05），而與D組、E組和F組比較無顯著性差異（P>0.05）；B組、C組與D組、E組和F組比較存在顯著性差異（P<0.05），而B組與C組比較無顯著性差異（P>0.05）。

治療5d后，A組與B組、C組比較無顯著性差異（P>0.05），而與D組、E組和F組比較存在顯著性差異（P<0.05）；B組、C組與D組、E組和F組比較存在顯著性差異（P<0.05），而B組與C組比較無顯著性差異（P>0.05）；而D、E組和F組之間比較無顯著性差異（P>0.05）。見表2。

表2治療3、5天后各組組織PGE2含量的改變（略）

3討論

前列腺素E2(PGE2)是重要的炎性介質，具有多種生物活性,參與各種病理生理過程。前列腺素E2在體內分布廣泛,它是具有重要生物學活性的前列腺素物質,具有胃黏膜保護、增加腎血流量、擴張血管、促進排鈉利尿、抗血小板聚集、參與炎癥反應等功能。前列腺素E2持久而廣泛血管擴張、致痛、影響免疫功能，在創傷中起重要作用。炎癥與血管生成是損傷及修復的重要病理基礎，神經分布也伴隨血管生成，壓力、缺氧刺激新的神經，炎癥使神經變得敏感，引起疼痛［3］。PGE2能影響血管通透性,使血管擴張，毛細血管通透性增加，從而引起局部水腫及組織器管損傷。三黃軟膏以“活血化瘀，涼血消腫止痛”為治則。選用大黃為方中君藥，具有活血化瘀、瀉熱通便、涼血解毒、逐瘀通經之功；黃芩消腫止血、清熱燥濕、瀉火解毒之效，是為臣藥；黃柏具有清熱燥濕、瀉火除濕、解毒療瘡之功效，為佐藥；玄明粉潤燥軟堅、清火消腫為使藥，諸藥合用，共奏活血袪瘀、涼血止痛、消腫散結之功效。

通過動物實驗發現,三黃軟膏對閉合的急性軟組織損傷大鼠具有治療作用。它能夠緩解損傷局部的癥狀,明顯抑制損傷局部的PGE2的含量,減少損傷局部的炎癥反應。三黃軟膏對閉合的急性軟組織損傷大鼠具有治療作用可能與抑制損傷局部的PGE2的含量有關,但其確切的作用機理有待進一步的研究。

【參考文獻】

［1］童培建，周林寬，徐農，等.散瘀膏治療踝關節扭傷臨床觀察［J］.浙江中醫學院學報，1994，18（1）：122.

［2］馮芳軍,楊毓華,蘇榮梅.中藥外治大鼠軟組織損傷的實驗研究［J］.頸腰痛雜志，2002,23(3):206209.

［3］BonnetCS,WashDA.Ostearthritisangiogenesisandinflammation［J］.Rheumatology，2005，44(1)：716.

摘要】［目的］觀察三黃軟膏對急性軟組織損傷大鼠的療效并探討其作用機理。［方法］用隨機數字表法將36只大鼠分成正常組（A）6只和實驗組（B、C、D、E、F）30只，將實驗組制造急性軟組織損傷模型。造模成功后再將實驗組隨機數字法分為模型對照組（B）、基質對照組（C）、青鵬膏對照組（D）、三黃低劑量組（E）、三黃高劑量組（F）5組。以損傷證候指數、損傷局部組織前列腺素E2(PGE2)含量的測定作為觀察指標進行實驗研究。［結果］D、E、F組在損傷證候指數均優于B、C組（P<0.05）；與B、C組分別比較，D、E、F組損傷局部組織前列腺素E2(PGE2)的含量明顯下降（P<0.05）。［結論］表明三黃軟膏對急性軟組織損傷動物模型有良好的治療和修復作用。

【關鍵詞】軟組織損傷;三黃軟膏;實驗研究;大鼠