試析新會陳皮橙皮苷的量測定工藝

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【摘要】目的比較不同年份新會陳皮總黃酮和橙皮苷含量的變化規律。方法采用紫外分光光度法測定陳皮總黃酮的含量；用高效液相色譜法（HPLC）測定陳皮中橙皮苷的含量。結果不同年份新會陳皮貯存期越長，總黃酮含量和橙皮苷含量越高。結論總黃酮是陳皮有效成分之一，橙皮苷則是陳皮總黃酮的主要成分，實驗結果驗證古人所述陳皮“陳久者良”有一定的道理。

【關鍵詞】新會陳皮不同年份總黃酮橙皮苷

陳皮是蕓香科植物橘CitrireticulataBlanco及其栽培變種的干燥成熟果皮，藥材分為“陳皮”和“廣陳皮”。“廣陳皮”為茶枝柑Citrireticulata‘Chachi’的干燥成熟果皮，主產于廣東新會，是廣東十大道地藥材之一，具有理氣健脾、燥濕化痰的功效。陳皮的主要有效成分為黃酮類化合物和揮發油，其中橙皮苷是陳皮黃酮類化合物的主要成分。中醫藥傳統上認為陳皮“陳久者良”，南宋醫學家陶弘景曰“橘皮療氣大勝，須陳久者良”。本文對不同年份新會陳皮的總黃酮和橙皮苷含量進行系統分析比較，驗證陳皮“陳久者良”的物質基礎，為陳皮的有效開發利用提供依據。

一、儀器與試藥

1.1儀器

SPD-10AVP高效液相色譜儀（日本島津公司）；TU1810紫外分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)等。

1.2材料與試劑

橙皮苷(中國藥品生物制品檢定所，批號110712-200512)；甲醇為色譜純，其他試劑為分析純。陳皮樣品由新會陳皮協會提供，并由廣東藥學院藥用植物與中藥鑒定學教研室李書淵教授鑒定為茶枝柑CitriReticulata‘Chachi’的干燥成熟果皮。樣品粉碎成粗粉，置干燥箱于60℃烘干12h以上。于避光、陰涼處存放。

二、方法與結果

2.1不同年份新會陳皮總黃酮含量測定

2.1.1對照品溶液的制備

精密稱取橙皮苷對照品11.37mg，用甲醇溶解并定容至50ml，制成0.2274mg/ml的橙皮苷對照品貯備液。

2.1.2供試品貯備液的制備

取樣品粉末約1.0g，精密稱定，置索氏提取器中，加80ml石油醚（30～60℃）60℃提取至無色，放冷，揮去石油醚，再加80ml60%乙醇，索氏提取至無色，將提取液轉移置100ml量瓶中，用60%乙醇定容至刻度，混勻，即得。

2.1.3測定波長的選擇

分別精密量取1.5ml對照品貯備液、0.5ml供試品貯備液至25ml量瓶中，用60%乙醇定容至刻度，混勻。以60%乙醇溶液為空白，在200～400nm之間進行掃描。由圖1可見對照品溶液在285nm處有吸收峰，圖2可見供試品溶液在275nm處和331nm處有吸收峰。故選擇285nm為測定波長。

2.1.4標準曲線的繪制

取0.2274mg/ml的橙皮苷對照品貯備液，精密吸取0.5，1，1.5，2.0，2.5ml置于25ml量瓶中，用60%乙醇定容。在285nm處測定吸光度，并繪制校準曲線。結果表明：在4.548～22.74μg/ml濃度范圍內有良好的線性關系。回歸方程為：A=0.033C+0.013，相關系數r=0.9993。

2.1.5穩定性實驗

精密量取供試品貯備液0.5置于～25ml量瓶中，用60%乙醇定容，在285nm處進行測定，結果:0h的A值為0.573，1h為0.571，2h為0.568，4h為0.565，6h為0.564，24h為0.546，RSD為1.7%。結果表明，樣品溶液在24h內穩定性良好。

2.1.6重現性實驗

取同一樣品6份，按“2.1.2”項制備成供試品貯備液并稀釋50倍，在285nm處連續測定6次A值，RSD為1.7%，說明本實驗的重現性良好。

2.1.7回收率實驗

精密吸取對照品貯備液2.5ml稀釋到25ml的量瓶中，得到22.74μg/ml的對照品溶液。精密吸取供試品貯備液3ml稀釋定容到100ml，再分別精密吸取該溶液1ml置9個10ml量瓶，分別加入對照品溶液0.5，1，1.5ml各3份，稀釋定容，在285nm處測定其吸光度，并計算回收率。

2.1.8總黃酮測定

取適量不同年份新會陳皮按“2.1.2”項制備成供試品貯備液并稀釋50倍，在285nm處分別測定A值，計算出供試品中總黃酮的含量。

2.2橙皮苷含量測定

按照《中國藥典》2005版Ⅰ部陳皮項下含量測定方法，用外標兩點法對不同年份新會陳皮的橙皮苷進行測定。

三、分析與結論

用橙皮苷作對照品，用紫外分光光度法測定陳皮總黃酮的含量，通過方法學考察，該法操作較簡便，準確，重現性較好。

文獻研究表明，陳皮提取物具有抗氧化，有效清除自由基的作用；陳皮中黃酮類成分除了具有抗氧化作用還有抗衰老作用，能有效延長果蠅的壽命；橙皮苷能有效軟化心血管，增加心血管通透性，并能減輕家兔實驗性動脈粥樣硬化病變，證明陳皮中黃酮類成分和橙皮苷都是具有藥理作用的活性化學物質。本實驗結果證實：新會陳皮的貯存年份越長，總黃酮和橙皮苷的含量越高，說明古人所述陳皮“陳久者良”有一定的道理。

本實驗用不同乙醇濃度進行陳皮總黃酮的提取，結果顯示60%乙醇提取的效果最好。

通過水分測定，含量測定結果折合成干燥品的含量。

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